柠檬苦素在大鼠体内代谢产物与代谢途径的UHPLC-Q-Orbitrap HRMS分析

目的：采用超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱法(UHPLC-Q-Orbitrap HRMS)分析鉴定柠檬苦素在大鼠体内的代谢产物，探究柠檬苦素单剂量灌胃给药后在大鼠体内原型成分和代谢产物分布的性别差异性，并推测代谢途径。方法：采用Thermo Scientific Accucore^TM C₁₈色谱柱(3mm×100mm,2.6μm)，以0.1%甲酸水溶液(A)-0.1%甲酸乙腈溶液(B)为流动相进行梯度洗脱(0～1min,5%B;1～6min,5%～20%B;6～18min,20%～50%B;18～23min,50%～80%B;23～25min,80%～95%B;25～30min,95%B)，流速0.3mL·min^-1，柱温30℃。在电喷雾离子源(ESI)正离子模式及扫描范围m/z 100～1 500条件下采集生物样品的质谱数据。收集并制备灌胃给药后的血浆、组织(心、肝、脾、肺、肾、胃和小肠)、尿液及粪便样品，对其中柠檬苦素原型成分及代谢产物进行鉴定。结果：雌、雄大鼠的粪便、胃、小肠及雌鼠的心、肝、脾、肺和肾...     

马兜铃水提物在大鼠体内代谢产物的定性分析

目的：基于超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱法(UPLC-Q-TOF-MS^E),定性分析马兜铃水提物(AFE)和马兜铃酸Ⅰ(AAⅠ)大鼠体内马兜铃酸类物质(AAs)代谢产物的差异。方法：该实验选取SD大鼠,分别连续灌胃给予AFE(110 g·kg^-1·d^-1)和AAⅠ(5 mg·kg^-1·d^-1)5 d,收集血清、尿液和粪便。采用ACQUITY UPLC BEH C₁₈色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.7μm),流动相甲醇(含0.01%甲酸+5 mmol·L^-1乙酸铵,A)-水(含0.01%甲酸+5 mmol·L^-1乙酸铵,B)梯度洗脱(0～1.0 min,10%B;1.0～7.0min,10%～75%B;7.0～7.2min,75%～95%B;7.2～10.2min,95%B;10.2～10.3min,95%～10%B;10.3～12.0min,10%B),流速0.3 mL·min^-1     

基于UPLC-Q-TOF-MS的泽泻盐制前后血清药物化学比较分析

目的：基于超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱法(UPLC-Q-TOF-MS)对泽泻、盐泽泻水提液灌胃给药后大鼠血清中的移行成分进行比较分析。方法：SD大鼠随机分为空白组、泽泻组(10 g·kg^-1)和盐泽泻组(10 g·kg^-1),每组3只,给药组分别灌胃给予泽泻、盐泽泻水提液,空白组灌胃等体积饮用水,早晚各1次,连续3 d,末次给药60 min后,眼眶采血,制备血清样品。采用ACQUITY UPLC BEH C18(2.1 mm×50 mm,1.7μm)色谱柱,流动相乙腈(A)-0.1%甲酸水溶液(B),梯度洗脱(0～10 min,10%～50%A;10～27 min,50%～95%A;27～27.1 min,95%～10%A;27.1～30 min,10%A),流速0.3 mL·min-1,正离子模式下采集数据,扫描范围m/z 100～1 200。在自建泽泻化学成分库的基础上借助UNIFI 1.9.2软件对泽泻、盐泽泻水提液及给药血清、空白血清的总离子流图和二级质谱碎片信息进行比对,推导泽泻、盐泽泻可能的入血移行成分及其裂解规律,并计算...     

关黄柏水提物在大鼠血清、尿液和粪便中原型成分及其代谢产物的UPLC-Orbitrap Fusion Lumos Tribrid-MS鉴定

目的 应用超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱-线性离子阱质谱法（UPLC-Orbitrap Fusion Lumos Tribrid-MS）分析关黄柏水提物在正常大鼠血清、尿液及粪便中的原型成分及其代谢物,探讨关黄柏在大鼠体内的药效物质基础。方法 采用ACQUITY UPLC^? CSH^TM C₁₈色谱柱（2.1 mm×100 mm,1.7 μm）,以0.1%甲酸水溶液（A）-乙腈（B）为流动相进行梯度洗脱（0~15 min,2%~25%B;15~25 min,25%~50%B;25~28 min,50%~98%B）,流速0.3 mL·min^-1,进样量10 μL,柱温40 ℃。运用加热电喷雾离子源（HESI）,扫描范围m/z 100~1 000,正离子模式采集数据。通过比较给药后样品和空白样品的差异,对灌胃给予关黄柏水提物后大鼠血清、尿液和粪便中的原型成分及其代谢产物进行鉴定。结果 灌胃给予关黄柏水提物后,从大鼠血清、尿液及粪便中鉴定和表征了70个外源性成分,包括15个原型成分和55个代谢产物。其中15个原型成分包括12个生物碱和3个柠檬苦素,55个代谢产物包括52个生物碱和3个柠檬苦素。关黄柏水提物在大鼠体内的代谢途径主要包括脱饱和、甲基化、氧化、硫酸化及葡萄糖醛酸结合等反应。结论 生物碱在大鼠体内进行Ⅰ相代谢和Ⅱ相代谢,柠檬苦素类在大鼠体内主要进行Ⅰ相代谢,可为进一步解析关黄柏体内过程,阐明其药效物质基础提供实验依据。     

基于UPLC-Q-TOF-MS分析白术及其不同炮制品化学成分及其差异

目的 采用超高效液相色谱-四级杆-飞行时间串联质谱法(UPLC-Q-TOF-MS)对白术生品及其4种炮制品的成分进行快速分析及鉴定，找出炮制前后差异成分。方法 运用Titank C₁₈色谱柱(2.1 mm×100 mm, 1.8μm),流动相0.1%甲酸水溶液(A)-乙腈(B)梯度洗脱(正离子模式：0～0.01 min, 5%B;0.01～5 min, 5%～30%B;5～14 min, 30%～60%B;14～23min, 60%～70%B;23～31 min, 70%～95%B;31～35 min, 95%B)正离子模式检测，电喷雾离子源(ESI),扫描范围m/z 50～1250。结合对照品、数据库及相关文献对白术及其炮制品进行化学成分鉴定。各样品数据经MarkView 1.2.1归一化处理后导入SIMCA 14.1中进行主成分分析(PCA)及偏最小二乘法-判别分析(PLS-DA),通过变量重要性投影(VIP)值>1且t检验中P<0.01的原则，筛选得到白术炮制前后差异成分。结果 共鉴定出57个化学成分，白术50个成分，麸炒白术53个成分，土炒白术...     

基于代谢组学和网络药理学探究人参固本口服液治疗肾纤维化的作用机制

目的 基于代谢组学和网络药理学开展人参固本口服液治疗肾纤维化小鼠的作用机制研究。方法 将36只C57BL/6小鼠随机分为空白组、模型组、人参固本口服液组,除空白组外,均采用单侧输尿管结扎术制备小鼠单侧输尿管梗阻模型。术后人参固本口服液组灌胃给予4.2 g·kg^-1浸膏粉的水溶液,连续给药14 d,空白组和模型组灌胃给予等量蒸馏水。末次给药后,收集尿液,采用超高效液相色谱-三重四极杆-串联质谱法（UPLC-QQQ-MS/MS）进行检测,以0.1%甲酸水溶液为流动相A,乙腈-异丙醇（70∶30）为流动相B,梯度洗脱（0~1 min,5%B;1~5 min,5%~30%B;5~9 min,30%~50%B;9~11 min,50%~78%B;11~13.5 min,78%~95%B;13.5~14 min,95%~100%B;14~16 min,100%B;16~16.1 min,100%~5%B;16.1~18 min,5%B）,柱温40 ℃,流速0.4 mL·min^-1,电喷雾离子源（ESI）,采集范围m/z 50~900;通过网络药理学对人参固本口服液成分的靶点与肾纤维化的靶点进行交互分析,网络拓扑分析筛选出关键成分和关键靶点,采用功能注释生物信息学分析数据库（DAVID）预测人参固本口服液治疗肾纤维化的信号通路。结果 共鉴定出人参固本口服液治疗肾纤维化的7个差异代谢物,涉及8条代谢通路。网络药理学分析发现,人参固本口服液中36个核心成分与该7个差异代谢物相关,主要为人参皂苷类、三七皂苷类及核苷酸类化合物。基于“药材-成分-靶点-通路”网络,共筛选出23个关键靶点,与差异代谢物共同涉及亚油酸代谢、精氨酸生物合成、三羧酸循环（TCA）、精氨酸与脯氨酸代谢等通路。结论 该研究基于代谢组学与网络药理学技术,确定了人参固本口服液治疗肾纤维化中7个差异代谢物、36个潜在药效成分、23个核心靶点和4条关键通路,可为该药的临床应用及机制研究提供实验依据。     

基于序贯代谢的五味子入血及脑脊液成分分析

目的 基于序贯代谢方法，结合液质联用技术鉴定五味子入血和入脑脊液原型成分和代谢产物。方法 雄性SD大鼠在灌胃给药和在体肠灌流给药后收集其综合代谢、肠代谢、肝代谢血浆和脑脊液样品，利用超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱法（UPLC Q-Exactive Orbitrap MS）分析并比对五味子提取液、空白血浆、含药血浆、空白脑脊液、含药脑脊液样品谱图差异，采用ACQUITY UPLC BEH Shield RP18色谱柱（2.1 mm×100 mm，1.7 μm），流动相乙腈（A）-0.1%甲酸水溶液（B）梯度洗脱（0~7 min，95%B；7~12 min，95%~35%B；12~17 min，35%~15%B；17~20 min，15%~12%B；20~22 min，12%~5%B；22~23 min，5%B；23~25 min，5%~95%B；25~28 min，95%B），加热电喷雾离子化源（HESI），正、负离子检测模式，扫描范围m/z 100~1 500。根据化合物的保留时间、特征碎片、分子式及对照品信息鉴定五味子入血及脑脊液的原型成分和代谢产物。结果 从五味子提取物中共鉴定出42个化学成分，包含木脂素、黄酮、氨基酸、鞣质等化合物，其中以木脂素类化合物为主。从不同部位获取的血浆样品中共鉴定出27种原型入血成分与14种代谢产物；在脑脊液中共鉴定出15种原型成分和9种代谢产物；代谢产物生成过程中涉及的代谢反应主要有去甲基化、甲基化、去甲氧基化和羟基化等。结论 通过对五味子在大鼠体内的原型成分与代谢产物的系统鉴定，为后续更好地挖掘五味子中治疗中枢神经系统疾病的药效物质基础提供了数据支撑。     

小金丸脂溶性和水溶性部位的HPLC指纹图谱分析

目的:建立小金丸脂溶性部位、水溶性部位的高效液相色谱法(HPLC)指纹图谱并进行指纹图谱相似度评价,探讨小金丸的质量一致性。方法:采用Welch Ultimate AQ-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相选择0.1%磷酸水溶液(A)-乙腈(B)梯度洗脱(脂溶性部分:0～5 min,40%B;5～10 min,40%～50%B;10～20 min,50%～60%B;20～30 min,60%～65%B;30～40 min,65%～70%B;40～50 min,70%～80%B;50～60 min,80%～90%B;60～65 min,90%～95%B;65～75 min,95%～100%B;75～80 min,100%B。水溶性部分:0～20 min,2%～5%B;20～30 min,5%～10%B;30～37 min,10%～20%B;37～45 min,20%～30%B;45～50 min,30%～40%B;50～58 min,40%B),流速1 mL·min~(-1),柱温30℃,脂溶性部位和水溶性部位的检测波长分别设定为202,250 nm,进样量依次为10,20μL。对5个厂家共30批市售小金丸进行HPLC检测,使用主成分分析(PCA)对各部位色谱峰进行分析,并对色谱峰进行指认。结果:指纹图谱共检测出55个色谱峰,30批小金丸指纹图谱相似度差异较大。小金丸脂溶性部位、水溶性部位的指纹图谱相似度RSD分别为21.5%和32.8%,厂家间与厂家内样品质量差异较大,且脂溶性部位成分主导小金丸化学一致性评价结果,其中,来自枫香脂的成分是影响该制剂化学差异的主要原因。结论:市售小金丸质量一致性较差。双部位指纹图谱的建立为小金丸整体质量评控提供了新思路,可为传统丸剂的质量一致性评价提供参考。     

基于UPLC-Q-Orbitrap-MS和分子对接技术的青盐方药效物质基础分析

目的 采用血清药物化学方法研究青盐方的入血成分，并考察入血成分与雌激素受体（ER）的结合能，确认青盐方在大鼠体内的药效物质基础。方法 采用超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱法（UPLC-Q-Orbitrap-MS）比较青盐方70%乙醇提取物、各单味药70%乙醇提取物、空白血清、青盐方70%乙醇提取物给药后血清的指纹图谱差异，根据质谱的保留时间、相对分子质量，以及一级、二级离子碎片，判定青盐方在大鼠体内的入血成分，流动相选择0.1%甲酸水溶液（A）-乙腈（B）梯度洗脱（0~5 min，2%~20%B；5~10 min，20%~50%B；10~15 min，50%~80%B；15~25 min，80%~95%B；25~26 min，95%~2%B；26~30 min，2%B），流速0.3 mL·min^-1，进样量5 μL，电喷雾离子源，检测范围m/z 150~2 000，正、负离子扫描模式。采用分子对接技术表征入血成分与ERα、ERβ的结合能，进一步确认青盐方药效物质基础。结果 口服青盐方后，从血清中检测出30种入血成分，其中9种为原型成分，21种为代谢产物。经鉴定9种原型成分分别为水晶兰苷、车叶草苷、麦角甾苷、松果菊苷、β-蜕皮甾酮、尿囊素、去乙酰基车叶草苷酸、甜菜碱、咖啡酸，21种代谢产物包括有机酸、氨基酸、胆碱类等。上述9种原型成分与ERα的结合能分别为-6.7、-8.9、-6.0、-5.7、-5.3、-4.9、-7.3、-3.3、-6.3 kcal·mol^-1（1 kcal≈4 184 J），与ERβ的结合能分别为-6.6、-7.2、-7.7、8.0、-7.4、-5.5、-6.9、-3.6、-6.4 kcal·mol^-1。结论 水晶兰苷等9种入血的原型成分是青盐方在体内发挥雌激素样作用的活性成分，可为该方质量标准的制定及后续研发提供实验依据。     

基于UPLC-Q-TOF/MS代谢组学和分子对接技术探索胆黄连“清肝胆实火”的物质基础

目的：采用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间串联质谱法（UPLC-Q-TOF/MS）代谢组学及分子对接技术研究胆黄连清肝胆实火的物质基础。方法：采用UPLC-Q-TOF/MS代谢组学技术分析黄连、清炒黄连和胆黄连的整体化学成分，流动相0.1%甲酸水溶液（A）-乙腈（B）梯度洗脱（0～2 min,5%B;2～20 min,5%～65%B;20～40 min,65%～10%B;40～45 min,10%B;45～46 min,10%～95%B;46～49 min,95%B），电喷雾离子源（ESI），正、负离子模式扫描，扫描范围m/z 80～1 200。在此基础上，结合偏最小二乘法-判别分析（PLS-DA）和方差分析筛选不同黄连炮制品之间的差异化合物。利用网络药理学和分子对接技术验证差异化合物与肝胆实火证的关联程度。结果：共鉴定了33个化学成分，包括2个酚酸类、5个结合型胆汁酸类、26个生物碱类。PLS-DA和方差分析确认差异化合物16个，其中11个生物碱、5个结合型胆汁酸。在京都基因与基因组百科全书（KEGG）数据库进行通路富集分析得到差异成分与“肝胆实火”相关的疾病通路8条，“成分-靶点-...     

草酸铵对僵蚕抗凝作用的影响

目的：研究草酸铵对僵蚕抗凝作用的影响。方法：以凝血酶时间(TT)为指标，用添加法比较不同浓度草酸铵对僵蚕提取液和凝胶分离液抗凝作用的影响。结果：添加草酸铵浓度在1．8～21．3mg／ml范围内，对固形物含量15．8～31．6mg／ml的提取液和14．6～29．1mg／ml的凝胶分离液的TT值增加成正相关。结论：草酸铵对僵蚕提取液、凝胶分离样品的抗凝作用均有增强作用，随提取液浓度降低影响增大，而随凝胶分离液浓度增大影响增大。     

蛇床子素抗凝血作用

目的:研究蛇床子素的抗凝血作用。方法:通过测定小鼠凝血时间(CT)、大鼠的凝血酶原时间(PT)和优球蛋白溶解时间(ELT),观测蛇床子素的抗凝作用。结果:蛇床子素能显著处长CT、PT,缩短ELT。结论:蛇床子素具有明确的抗凝血作用。     

"软系"疗法的中医探讨

从中医角度探讨“软系”疗法的科学性,探求“软系”疗法疗效显著的原因。     

中医药治疗黄褐斑现状

综述了1995－2001年中药内治、外治疗法及针灸治疗黄褐斑的特色和优势。     

大黄素对急性胰腺炎胰腺组织TGFβ1表达的影响

目的通过分析中药大黄素对大鼠急性胰腺炎治疗前后胰腺组织细胞转化因子β1(TGFβ1)的表达、DNA合成及总蛋白含量的影响，从胰腺再生角度探讨大黄素治疗急性胰腺炎的作用机制。方法以雨蛙肽(caerulein)腹腔注射诱导大鼠急性胰腺炎模型，并于大黄素治疗前后6、24、48、72及96h处死大鼠。同时应用RT-PCR技术检测治疗前后胰腺组织TGFβ1mRNA表达，同位素体外掺入法测定胰腺组织DNA合成以及Lowry′s法测定胰腺组织总蛋白含量。结果大黄素治疗后血清淀粉酶显著下降。正常胰腺组织、胰腺炎诱导后6h未见TGFβ1mRNA表达。TGFβ124h后出现表达，72h时达高峰。大黄素治疗后6h即可检测到TGFβ1mRNA表达，且24、48h时表达均较非治疗组显著增强，并于48h时达最大值。同时胰腺炎诱导后72h，胰腺组织DNA合成显著下降，大黄素治疗后96hDNA合成明显增加，胰腺炎诱导后48h胰腺组织总蛋白含量下降，大黄素治疗后96h显著增加。结论大黄素治疗急性胰腺炎的作用机制可能是通过诱导细胞因子TGFβ1基因表达增强，调控细胞增殖和分化，刺激多种细胞外基质成分合成，增加胰组织DNA合成和蛋白含量，参与胰腺细胞修复、再塑过程。     

蛇床子素抗凝血作用

目的：研究蛇床子素的抗凝血作用。方法：通过测定小鼠凝血时间（CT）、大鼠的凝血酶原时间（PT）和优球蛋白溶解时间（ELT），观测蛇床子素的抗凝作用。结果：蛇床子素能显著处长CT、PT，缩短ELT。结论：蛇床子素具有明确的抗凝血作用。     

苯唑青霉素对丁胺卡那毒素药动学的影响

 采用微量微生物法对丁胺卡那霉素（AMK）单用及AMK与苯唑青霉素（OXA）合用后，兔体内AMK血药浓度进行测定；药时数据用MCPKP软件经IBM计算机处理，并对两组药动学参数进行了统计学处理，结果表明OXA对AMK的药动学有显著的影响。     

《诸病源候论》对皮肤病学的贡献

对《诸病源候论》在皮肤病方面的成就进行了较为系统的整理总结 ,该书着重讨论了皮肤病的命名、分类、病因病机 ,并阐发了《内经》“邪之所凑 ,其气必虚”理论和预防为主的思想。     

基于细胞自噬探讨左归丸对肾虚仔鼠皮肤发育的影响

目的:研究左归丸对先天肾虚仔鼠发育过程中皮肤内细胞自噬的影响及其机制,探索补肾填精法在生长发育异常中的应用价值。方法:36只雌雄比例为2∶1的大鼠进行配对,复合应激法刺激孕鼠构建先天肾虚仔鼠模型,根据将孕鼠处理方式不同,分为正常组,肾虚组,左归丸低、高剂量组(2,8 g·kg^-1)。正常组不造模给予生理盐水灌胃,肾虚组造模给予生理盐水灌胃,左归丸低、高剂量组造模给予左归丸悬浊液灌胃。切取出生后21 d仔鼠的背部皮肤,苏木素-伊红(HE)染色观察仔鼠皮肤显微结构形态,测量真皮层和表皮层厚度,蛋白免疫印迹法(Western blot)和实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)分别检测仔鼠皮肤分泌型糖蛋白3a(Wnt3a)和β-连环蛋白(β-catenin)mRNA和蛋白表达量,免疫双荧光检测皮肤内自噬指标微管相关蛋白轻链3(LC3)和人死骨片1-泛素结合蛋白p62(SQSTM1-p62)的表达。结果:正常组仔鼠皮肤层次清楚,结构正常,肾虚组真皮层胶原排列疏松,左归丸低、高剂量组皮肤组成基本正常;与正常组比较,肾虚组仔鼠在皮肤的表皮层增厚,真皮层变薄(P<0.05);与肾虚组比较,左归丸低、高剂量组皮肤的表皮层和真皮层厚度的改变明显恢复(P<0.05)。与正常组比较,肾虚组仔鼠Wnt3a和β-catenin蛋白和mRNA表达明显下降(P<0.05);与肾虚组比较,左归丸低、高剂量组Wnt3a和β-catenin蛋白和mRNA表达升高(P<0.05)。同时免疫荧光法检测发现与正常组比较,肾虚组的LC3的表达上调,SQSTM1-p62表达下调;与肾虚组比较,左归丸可以逆转SQSTM1-p62和LC3的异常表达(P<0.05)。结论:左归丸可以通过增加仔鼠皮肤内Wnt3a和β-catenin蛋白和mRNA的表达,下调皮肤细胞自噬水平,改善先天肾虚仔鼠皮肤异常发育。     

中医药防治中风先兆证的研究概况

中风病以其高发病率、高致残率、高病死率及高复发率严重危害人类的健康。中风先兆证是与中风病有密切联系的临床综合症，它多见于中年以上人群，以反复发作的眩晕、一过性偏身麻木、瘫软、语涩、晕厥为主要临床表现，其中一部分患者可发展为中风病。大多患者如能及时治疗和调护，