原癌基因c-fos在大鼠缺血再灌注肾组织中的表达

目的：探讨原癌基因ｃ－ｆｏｓ在缺血再灌注肾脏中表达情况及其在急性缺血性肾脏损伤修复中的作用。方法：用免疫组织化学法及原位分子杂交技术，检测急性肾缺血再灌注后大鼠肾组织内Ｆｏｓ蛋白及ｃ－ｆｏｓ ｍＲＮＡ表达的分布、强度及时程动力学等指标。结果：缺血再灌注早期即可诱导肾组织中ｃ－ｆｏｓ的高效表达，且ｃ－ｆｏｓ ｍＲＮＡ表达早于Ｆｏｓ蛋白；Ｆｏｓ蛋白表达出现于再灌注后１ｈ，２￣４ｈ达高峰，８ｈ开始锐减，     

电针和福尔马林诱发大鼠脑c—fos基因表达研究

目的：从分子水平探讨电针镇痛的机理。方法：采用ＲＮＡ斑点杂交技术比较电针与福尔马林刺激时大鼠脑内ｃ－ｆｏｓ ｍＲＮＡ表达的改变,并观察吗啡对ｃ－ｆｏｓ ｍＲＮＡ表达的影响。结果：电刺激具有明显的镇痛作用。电针和福尔马林刺激后均可诱发ｃ－ｆｏｓ ｍＲＮＡ表达增强。吗啡能明显抑制福尔马林诱导ｃ－ｆｏｓ ｍＲＮＡ表达,而对电针诱导的ｃ－ｆｏｓ ｍＲＮＡ表达则无明显影响。结论：ｃ－ｆｏｓ基因可能参与痛觉调     

大鼠肾缺血再灌注损伤时c—fos基因的表达

为探讨原癌基因ｃ－ｆｏｓ在急性缺血性肾脏损伤修复中的分子调控作用，用免疫组织化学法及原位分子杂交技术，对急性肾缺血再灌注后大鼠肾组织内Ｆｏｓ蛋白及ｃ－ｆｏｓ ｍＲＮＡ表达的分布、强度、时程和动力学特征进行研究。缺血再灌注早期即可诱导肾组织中ｃ－ｆｏｓ的高效表达，肾缺血４５ｍｉｎ，Ｆｏｓ蛋白表达在再灌注１ｈ、２ｈ￣４ｈ达高峰、８ｈ锐减、２４ｈ消失。ｃ－ｆｏｓ ｍＲＮＡ０．５ｈ出现、１ｈ达高峰、２ｈ锐     

神经生长因子对脊髓神经元损伤后c—fosmRNA表达的影响

探讨神经生长因子（ＮＧＦ）对脊髓神经元保护作用的机制。采用Ａｌｅｎ′ｓ法制成大鼠Ｔ８脊髓损伤模型,用原位杂交方法检测神经元ｃ－ｆｏｓｍＲＮＡ的表达。结果：脊髓损伤后神经元ｃ－ｆｏｓｍＲＮＡ表达较正常对照未损伤神经元显著增加,表达高峰出现在损伤后１ｈ;神经生长因子能显著抑制损伤后神经元ｃ－ｆｏｓｍＲＮＡ的异常表达。结论：神经生长因子对损伤后神经元保护作用机制,可能是其抑制了ｃ－ｆｏｓ基因异常表达,保护了神经元     

体外鼠脑星形胶质细胞损伤后c-fos蛋白、GFAP及其mRNA的动态表达

研究ｃ－ｆｏｓ蛋白、ＧＦＡＰ—ｍＲＮＡ和ＧＦＡＰ在鼠脑星形胶质细胞（ａｓｔｒｏｃｙｅ，ＡＳ）损伤后反应性星形胶质化时的动态变化。用ＡＳ原代培养技术建立体外ＡＳ机械损伤模型．并结合应用免疫组织化学和原位杂交方法．结果：（１） ｃ－ｆｏｓ蛋白于损伤后 ４５ ｍｉｎ即有阳性表达，伤后 ２ ｈ消失； （２损伤边缘的 ＡＳ于损伤后 ６ ｈ开始表达 ＧＦＡＰ－ｍＲＮＡ， １ｄ达高峰，３ ｄ则在损伤边缘少数 ＡＳ中可检出 ＧＦＡＰ－ｍＲＮＡ；（３）损伤后 １ｄ，ＧＦＡＰ表达明显增强，胞体肥大，粗大突起伸向损伤区形成反应性星形胶质化。结论：（ｌ） ＡＳ受损后原癌基因 ｃ－ｆｏｓ首先被激活，ｃ－ｆｏｓ蛋白呈－过性的表达，参与调节ＡＳ的激活；（２）ＡＳ损伤后，ＧＦＡＰ－ｍＲＮＡ的转录增加，ＧＦＡＰ表达增强是由于在转录水平上ＧＦＡＰ－ｍＲＮＡ表达增强的结果；（３）反应性星形胶质化是ＡＳ的自身特性，以ＡＳ肥大为主，ＡＳ受损后，原癌基因ｃ－ｆｏｓ的蛋白参与调节ＡＳ激活的确切机制尚待阐明。     

SD鼠未成熟心肌细胞缺氧/复氧期c-fos,c-myc mRNA的表达

目的 研究未成熟细胞缺氧／复氧期间ｃ－ｆｏｓ,ｃ－ｍｙｃ的表达。方法 建立Ｓ大鼠未成熟心肌细胞原代培养及缺氧／复氧模型应用原位分子杂交技术,观察ｃ－ｆｏｓ,ｃ－ｍｙｃ在心肌细胞核内的表达。结果 未成熟心肌细胞在缺氧前ｃ－ｆｏｓ,ｃ－ｍｙｃ,ｍＲＮＡ无表达,对照（１）组和（２组）ｃ－ｆｏｓ,ｃ－ｍｙｃ ｍＲＮＡ在缺氧１２０ｍｉｎ开始表达,复氧６０ｍｉｎ表达程度进一步升高。牛磺酸保护组（Ⅲ）组在缺氧１     

大鼠压力超负荷性心肌肥厚早期c—fos mRNA表达的变化

采用核酸分子杂交观察腹主动脉缩窄大鼠心肌肥厚早期左室ｃ－ｆｏｓ原癌基因表达改变。实验结果显示：正常左室仅有少量ｃ－ｆｏｓｍＲＮＡ表达,腹主动脉缩窄后１ｈｃ－ｆｏｓｍＲＮＡ表达明显增加,３ｈ达高峰,１２ｈ明显下降。从而表明在压力超负荷性心肌肥厚模型中早期有ｃ－ｆｏｓ原癌基因的快速短暂表达。     

大鼠脑损伤时神经细胞c—fos,c—jun和c—myc基因表达变化

目的 观察大鼠脑损伤不同时间皮质神经细胞早期快反应基因ｃ－ｆｏｓ、ｃ－ｊｕｎ、ｃ－ｍｙｃ表达变化。方法 应用 Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交、原位杂交和免疫组织化学方法检测皮质神经细胞中ｃ－ｆｏｓ、ｃ－ｊｕｎ、ｃ－ｍｙｃ的表达。结果 脑损伤后１５ｍｉｎ,伤测皮质神经细胞出现上述３种基因ｍＲＮＡ的表达,随时间的延长,表达逐渐增加,于伤后３ｈ达高峰并持续至伤后２５ｈ伤后,伤后７２ｈ恢复至对照水平ｃ－ｆｏｓ、ｃ－     

卡托普利对肾性高血压心肌肥厚大鼠左心室肌原癌基因c-fos mRNA表达的影响

探讨卡托普利对肾性高血压心肌肥厚大鼠左室肥原癌基因ｃ－ｆｏｓ ｍＲＮＡ表达的影响。方法：采用原位杂交方法检测原癌基因ｃ－ｆｏｓ ｍＲＮＡ的表达。结果经过８周治疗后,卡托普利使高血压心肌肥厚大鼠左室肌原部癌基因ｃ－ｆｏｓ ｍＲＮＡ表达量显著减少。结论卡托普利减少高血压心肌肥厚大鼠左室肥原癌基因ｃ－ｆｏｓ ｍＲＮＡ的表达。     

谷氨酸受体在大鼠c—fos基因的表达及其与癫痫易感性的关系

为探讨Ｎ－甲基－Ｄ－天冬氨酸（ＮＭＤＡ）受体在ｃ－ｆｏｓ基因表达及其与癫痫易感性的关系，我们以Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹杂交法测定结果显示：（１）外源性ＮＭＤＡ可诱导脑细胞ｃ－ｆｏｓ基因的ｍＲＮＡ表达；竞争性或非常竞争性ＮＭＤＡ受体拮抗剂可完全阻断ｃ－ｆｏｓ基因ｍＲＮＡ表达。（２）ＮＭＤＡ诱导脑内ｃ－ｆｏｓ的ｍＲＮＡ表达随神经元发育呈上升趋势，于体外培养２４天达高峰。（３）在发育中，听源性癫痫易感大鼠脑     

成骨细胞中NO及c-fos对流体剪切力的响应

目的：研究NO及c—fos对不同流体剪切力作用时间的生理响应。方法：分离新生SD大鼠颅盖骨中的成骨细胞并分成三组，分别使用含10％FBS、0．3mmol／L L—NMMA和0．1mmol／L SNP的DMEM培养液预处理24h，加载大小为1．2Pa的剪切力。每组在加载剪切力0min、10min、15min、30min、60min后分别测试c—fos mRNA、NOS的表达。结果：c—fos mRNA表达在水平剪切力加载15min时明显增高（P〈0．05），在使用L—NMMA后明显降低（P〈0．05），而使用SNP后明显升高（P〈0．05）。结论：c—fos和NO参与了力学刺激引发细胞响应的过程，特别是在外界信号刺激引起的信息传递级联反应中起重要的偶联作用。     

异体垂体移植大鼠E2诱致催乳素瘤的实验研究

目的 探讨催乳素瘤的发病机理,验证其原发于腺垂体的假说。方法 应用雄性Ｓ．Ｄ大鼠进行异体垂体移植,并通过背部埋植１７－β－雌二醇（Ｅ２）药泵,观察Ｅ２对大鼠原位垂体,异体移植于肾囊的垂体及血浆催乳素（ｐｒｏｌａｃｔｉｎ,ＰＲＬ）水平的影响。并利用上述垂体细胞原代培养及原位杂交组化方法,研究经Ｅ２作用１２０ｄ后的原位及移植垂体细胞中ＰＲＬ基因表达水平的改变。结果 经Ｅ２作用６０ｄ及１２０ｄ后,大鼠体     

生长因子和雌激素对大鼠垂体前叶细胞增殖活性及催乳素？…

目的 观察外源性生长因子和雌激素对离体正常大鼠垂体前叶细胞增殖活性及催乳素基因表达的影响,并探讨生长因子与雌激素作用的关系。方法 应用无血清原代培养的大鼠垂体前叶细胞,分别采用荧光染色细胞ＤＮＡ的激光扫描共聚焦显策镜扫描,以及原位杂交方法,观察了１７β－雌二醇,表皮生长因子及转化生长因子β１对大鼠垂有叶细胞增殖活性和催乳素基因表达的影响。结果 生长因子或雌激叶细胞增殖活性和催乳素基因表达的影响。结     

17-β-雌二醇诱发大鼠原位和移植垂体形成催乳素瘤过程中垂体催乳素基因调控序列突变差异性

目的观察17-β-雌二醇(E2)诱发大鼠原位和移植于肾囊的异体垂体形成催乳素瘤的过程及原位和移植垂体催乳素(PRL)基因调控序列突变的差异性。方法应用雄性Sprague-Dawley同胞大鼠进行异体垂体移植,并通过背部埋置E2药泵,观察E2对原位和移植垂体的作用。应用RT-PCR方法检测PRL基因的表达,同时克隆PRL基因5'上游调控序列-1206~-1966bp片段,采用DNA直接测序方法检测该序列的突变情况。结果经E2作用120d后,大鼠体重下降至对照组的42·90%(P<0·01),加药组原位及移植垂体的重量分别较对照组增加3倍以上(P<0·01)。E2作用120d后,原位和移植垂体PRL瘤中PRLmRNA表达量均显著高于对照组(P<0·01)。测序结果表明原位垂体PRL瘤中PRL基因-1206~-1966bp间出现7处突变,移植垂体PRL瘤中相应序列的突变相对减少,有些突变位点消失,个别突变虽仍然存在,但突变程度明显减弱。结论E2的长期作用不仅能够诱发大鼠原位垂体形成PRL瘤,也能使移植于肾囊、远离下丘脑的异体垂体同时形成PRL瘤,但两种瘤形成的分子机制不完全一样。     

大鼠脑损伤时神经细胞c-fos 、c-jun和c-myc基因表达变化

目的观察大鼠脑损伤后不同时间皮质神经细胞早期快反应基因c-fos 、c-jun和c-myc表达变化.方法应用Northern杂交、原位杂交和免疫组织化学方法检测皮质神经细胞中c-fos、c-jun和c-myc的表达.结果脑损伤后15 min,伤侧皮质神经细胞出现上述3种基因mRNA的表达,随时间的延长,表达逐渐增加,于伤后3 h达高峰并持续至伤后24 h,伤后72 h恢复至对照水平.c-fos和c-jun蛋白表达亦于伤后15 min出现,c-myc蛋白表达于伤后30 min出现,并均于伤后3 h达高峰,持续至伤后6 h,伤后24 h表达消失.结论脑损伤后上述3种基因表达特点与其它脑损害不同,可能与损伤机制和继发性神经细胞损害有关.     

中药降乳散对大鼠催乳素瘤c-fos表达的抑制作用

[目的]研究中药降乳散对大鼠催乳素瘤表达癌基因c-fos的抑制作用.[方法]用皮下植入雌激素的方法制备大鼠催乳素瘤模型,将成功诱发出催乳素瘤的大鼠随机分2组,分别给予安慰剂和降乳散灌胃,用药治疗4周后处死动物,垂体称重,用放免法测定血清催乳素(prolactin,PRL)水平.用反转录-PCR方法分析原癌基因c-fos mRNA水平.[结果]降乳散组血清PRL水平为(67.9±9.6)ng/ml,垂体重量为(33.7±5.0)mg均明显低于安慰剂组[血清PRL水平为(5 667.1±860)ng/ml,垂体重量为(67.1±3.5)mg(P＜0.001),降乳散组c-fos mRNA水平为(2.1±0.6)较安慰剂组(6.2±0.5)明显降低(P＜0.001).[结论]降乳散具有抗高PRL血症和抑制PRL瘤生长的作用,降低原癌基因c-fos的表达水平可能是降乳散抗PRL瘤的重要机制之一.     

即刻早期基因c-fos,c-jun在缺血再灌注大鼠肝脏中的表达

目的研究即刻早期基因家族中c-fos、c-jun基因在缺血再灌注肝脏中的表达情况,探讨其与缺血再灌注损伤发生的关系。方法 SD大鼠随机分为假手术组、缺血再灌注后30min组和缺血再灌注后120min组。全自动生化分析仪测定血清ALT、AST水平,光镜观察肝组织形态学改变,TUNEL法测定肝细胞凋亡指数。实时荧光定量PCR（realtimePCR）法测定组织中c-fos及c-jun的表达情况。结果肝脏缺血再灌注损伤后血清ALT、AST逐步上升（P〈0.05）。病理改变显著,细胞凋亡现象逐步显现。c-fos及c-jun的表达水平,在再灌注后30min明显升高（P〈0.05）,再灌注2h后表达水平有所回落,但仍显著高于假手术组（P〈0.05）。结论 c-fos及c-jun基因参与肝脏缺血再灌注损伤的发生,并可能与肝细胞凋亡与再生的过程相关。     

参附注射液对大鼠缺血再灌注心肌Bcl-2、Bax与c-fos基因蛋白表达的影响

目的 观察大鼠急性缺血再灌注损伤与凋亡相关基因Bcl-2、c-fos和Bax蛋白表达的关系及参附注射液(SF)的影响.方法 采用整体缺血再灌注(ischemia-reperfusion,IR)模型,35只大鼠分为假手术组(C组)、生理盐水30 min对照组(IR 30)、生理盐水120 min对照组(IR 120)、SF 30 min组(SF 30)和SF 120 min组(SF 120),心肌缺血40 min再灌注30 min或120 min后,用免疫组化法检测Bcl-2、Bax和c-fos在心肌中的表达量.结果 与C组比较,IR组心肌Bcl-2、Bax和c-fos蛋白表达显著升高(P＜0.01),Bcl-2/Bax比值显著下降(P＜0.01);与IR组比较,SF组Bcl-2蛋白表达显著升高(P＜0.01),Bax和c-fos蛋白表达显著降低(P＜0.01),Bcl-2/Bax比值显著升高(P＜0.01).结论 SF对IR心肌保护效应可能与其促进Bcl-2蛋白高表达、抑制Bax与c-fos蛋白表达、增加Bcl-2/Bax比值,从而抑制心肌细胞凋亡有关.