CHD2基因突变相关癫痫临床表型谱研究（附18例报告）

目的　研究CHD2基因突变相关癫痫的临床表型特点。方法　收集2014年1月至2019年3月在北京大学第一医院就诊的18例CHD2基因突变癫痫患儿，总结其临床表型特点。结果　18例患儿癫痫发作中位起病年龄为26.5月龄。病程中出现的发作类型包括全面强直阵挛发作11例，肌阵挛发作7例，局灶性发作5例，失张力发作4例，不典型失神4例，肌阵挛-失张力发作3例，痉挛发作2例。16例患儿发作间期脑电图监测到异常放电，8例监测到临床发作，2例脑电图正常。15例患儿有不同程度的运动、智力发育落后，7例有孤独症样表现。癫痫综合征诊断符合癫痫伴肌阵挛-失张力发作2例，Lennox-Gastaut综合征2例，热性惊厥附加症2例，婴儿痉挛症1例。末次随访年龄为3岁5月龄至18岁，其中10例发作控制半年以上，丙戊酸和左乙拉西坦是治疗CHD2基因突变相关癫痫的有效药物。结论　CHD2基因突变相关癫痫发作类型多样，GTCS和肌阵挛发作常见；多数患儿存在发育落后；半数以上患儿癫痫发作可控制。     

Laurence-Moon-Biedel综合征1例

患儿，男10a，精神运动发育落后伴肥胖10a，视力障碍4a。出生体重39009，3mo抬头，10mo会坐，lasmo会走，4a会讲话．智力明显落后于同龄儿，食欲强，自幼较同龄儿胖。4a前发现患儿视力障碍，拿东西有时呈摸索样动作，走路易摔倒，尤其在光线较暗时明显。Za来有时眼睛斜视时才能看清物品。ga前因双足六趾畸形做多趾切除术时，发现左侧隐星，右侧事丸小，系第2胎第2产，足月顺产，生后无窒息，新生儿期无病理性黄疽。父母体健，非近亲结婚，母妊娠期无感染、用药及接触放射线病史，胎动自觉无异常。查体：身高140cm，体重49kg，头围53．scm．…     

六个佩梅病家系的蛋白脂蛋白1基因突变分析与产前诊断

目的 对6个佩梅病(Pelizaeus-Merzbacher disease,PMD)家系进行蛋白脂蛋白1(proteolipid protein 1,PLP1)基因突变分析,明确基因突变类型,并进行遗传咨询和产前诊断.方法 研究对象为2006年7月至2011年11月期间,在北京大学第一医院儿科就诊的6例佩梅病先证者及其家系.采集外周血提取基因组DNA,应用多重连接依赖的探针扩增(multiplex ligationdependent probe amplification,MLPA)技术检测PLP1重复突变;应用DNA直接测序技术检测PLP1点突变,确定基因突变类型,明确基因诊断.对女性PLP1突变携带者所妊娠的胎儿进行产前诊断,通过绒毛活检或羊膜腔穿刺采集标本,提取胎儿的基因组DNA进行PLP1突变分析.结果 先证者1、2、3、4为PLP1重复突变,4例先证者的母亲和先证者1的姨母均为PLP1重复突变携带者;先证者5和6为PLP1点突变,基因突变的位点分别为c.96C＞G(p.F32L)和c.623G＞T(p.G208V),其母亲均为相应位点基因突变的携带者.7例女性PLP1突变携带者均再次妊娠,共9例胎儿接受了产前诊断,发现PLP1重复突变与点突变患儿各1例(均为男性),PLP1重复突变携带者1例(女性),PLP1野生型6例(男性3例、女性3例).1例男性PLP1野生型胎儿存在X染色体部分交换. 结论 对佩梅病患儿及其家系成员进行PLP1突变分析,可明确基因诊断,检出家系中的女性PLP1突变携带者,提供准确的遗传咨询并进一步实施产前诊断,对于预防患儿出生具有重要意义.     

大鼠Mecp2基因的RNA干扰有效序列筛选

目的:以RNAi技术寻找抑制大鼠Mecp2基因表达的有效序列.方法:首先构建大鼠Mecp2基因与红色荧光蛋白(RFP)的融合基因表达质粒,然后分别与针对大鼠Mecp2基因的4个备选小干扰RNA(siRNA, small interference RNA)共转染HEK293T细胞,构成外源基因系统,以此对于4个备选的siRNA对大鼠Mecp2基因的抑制有效性进行筛选.然后将筛选到的有效序列siRNA转染自身表达大鼠Mecp2基因的PC12细胞,以免疫荧光染色显示大鼠Mecp2蛋白的表达情况,通过内源大鼠Mecp2基因表达被抑制的情况验证所筛选序列的RNA干扰有效性.结果:针对大鼠Mecp2基因mRNA 918～936位核苷酸的siRNA(序列:5′-GCUGUGAAGGAAUCUUCUA-3′)是对大鼠Mecp2基因进行RNA干扰的有效序列.此有效siRNA序列所在的位置相当于大鼠Mecp2基因第4外显子,推测可同时抑制大鼠Mecp2α和大鼠Mecp2β的表达.且此靶序列位于大鼠Mecp2基因编码区,推测可同时抑制1.9 kb和10 kb的大鼠Mecp2基因mRNA的表达.结论:本研究为建立稳定的大鼠神经元Mecp2基因表达敲低的神经细胞模型和研究脑发育过程中Mecp2基因的功能打下了基础.     

发育期大鼠三氟乙醚致反复惊厥后海马NMDA受体亚基表达变化

目的:研究三氟乙醚反复惊厥对发育中大鼠脑内N-甲基-D-门冬氨酸(N-methyl-D-aspartate, NMDA)受体亚基NR1、NR2A、NR2B蛋白表达的影响.方法:三氟乙醚致发育期大鼠惊厥30次,分别于末次惊厥后1、3、7 d灌注固定、断头,采用免疫组化方法观察不同时间点脑内NMDA受体亚基NR1、NR2A、NR2B蛋白表达的变化.结果:在末次惊厥后1 d,海马齿状回、CA1、CA3脑区NR1蛋白表达明显增加,分别为对照组的135.2%、144.7%、146.3%(P值均<0.01),惊厥后3 d,表达有所减弱,但在CA1、CA3区仍高于正常水平, 分别为对照组的133.8%、125.7%(P<0.05),惊厥后7 d,表达恢复接近正常水平.在末次惊厥后1 d,NR2A蛋白表达在上述脑区均明显增加,分别为对照组的135.6%、129.4%、130.5%(P＜0.01),惊厥后3 d,蛋白表达开始下降,虽然仍高于对照组,分别为对照组的113.2%、113.7%、114.3%,但差异无显著性(P值分别为0.11,0.12, 0.17 ),惊厥后7 d,下降接近正常水平(P值均>0.05);NR2B亚基蛋白表达,在末次惊厥后1 d、3 d有轻度增加,但差异无显著性(P值均>0.05).结论:发育期大鼠三氟乙醚致反复惊厥后脑内NR1亚基蛋白表达显著增加,在海马CA1、CA3区可持续至3天,NR2A亚基蛋白表达仅在末次惊厥后1 d显著增加,而NR2B表达无显著改变,提示惊厥后脑内NR亚基的构成可能发生了改变,并且可能进一步对大鼠脑兴奋性及其发育产生较长期影响.     

46,XY,t(5;6)伴猫叫样哭声一例

患儿男，２天，因“皮肤黄染３小时”入院。患儿为足月顺产，出生后无窒息。查体：足月貌，反应尚好。呼吸急促，口周发绀。口小，吸吮无力，哭声低，似猫叫，呼气性喘鸣。心前区喷射性收缩期Ⅲ级杂音。超声心动图检查示房间隔缺损（中央型０．６ｃｍ），动脉导管开放，心...     

大鼠胚胎大脑皮层神经细胞原代分离培养方法

在1983年建立小鼠胚胎大脑皮层神经细胞原代培养方法的基础上,为了研究遗传因素及中枢神经递质在小儿癫痫发病机制中的作用,1985年,我们又着手建立大鼠胚胎大脑皮层神经细胞原代培养方法。选择北京医科大学药理教研室裴印权等建立的遗传性惊厥易感大鼠种系P_(77)PMC及普通WISTAR非惊厥易感大鼠为研究对象。目的是从细胞水平上观察比较该两系动物从胚胎至生后的发育过程中,脑内抑制性中枢神经递质的变化特点,以期找出某些促成遗传性惊厥易感的因素。大鼠与小鼠神经细胞原代培养方法有所不同,目前该方法已用于研究上述两系动物脑内抑制性中枢神经递质在发育中的变化。实验尚在进行中,现     

遗传性惊厥易感大鼠(P_(77) PMC)脑神经细胞培养中γ-氨基丁酸的高亲和摄取

γ-氨基丁酸(GABA)是脑内主要的抑制性神经递质,在大脑皮层神经细胞培养中已得到证实。大量研究结果证明,任何导致脑内GABA系统不足的因素,均使动物惊厥阈值下降。我们既往的工作发现,北京医科大学裴印权等培育的遗传性惊厥易感大鼠P_(77)PMC,在生后20～30天时对人工高温诱发惊厥的易感     

P_(77)PMC癫痫大鼠胆囊收缩素基因剂量的研究

胆囊收缩素(CCK)是一种脑肠肽,它在哺乳动物中枢神经系统的含量比任何一种已知的其它调节性激素的含量都高。我们曾发现P_(77)PMC癫痫大鼠脑中CCK含量比正常大鼠低。CCK的降低可能是由于该基因缺失或重排等异常改变造成的;也可能是该基因表达调控失常造成的。为此,我们利用从国外引进的,克隆有CCK cDNA的质粒pCCK作探针,应用Sou-     

癫遗传学的研究进展

多年来 ,国际国内神经科学工作者对癫的发病机制及遗传基础进行了大量研究 ,但迄今为止对于连接癫基因型与表型的分子机制仍不甚清楚。我国人群癫患病率为3 .3‰～ 5 .8‰ ,其中半数以上在 10岁以内起病[1 ] 。在小儿神经科病房与门诊 ,惊厥性疾病患儿可占全部患儿的 40 %以上。特发性癫占全部癫的 40 %～ 5 0 % ,是癫遗传学研究的主要对象。近年通过神经分子生物学实验研究 ,不仅对癫发生发展相关因素 (诸如脑兴奋与抑制性神经递质及其受体、离子通道等 )的细胞分子机制认识更为深入 ,而且在此基础上 ,通过对癫的遗传学研…