X-J心脏保存液对离体心脏不同保存时限ATP及超微结构的影响

目的 :探讨XIJING (X J)超极化保存液对离体兔心低温下不同保存时间再灌注 3 0min后心肌细胞ATP含量及心肌超微结构的影响。方法 :健康大白兔 3 2只 ,随机分成 4组 ,每组 8只 ,Ⅰ组 :低温保存 4h ;Ⅱ组 :低温保存 6h ;Ⅲ组 :低温保存 8h ;Ⅳ组 :低温保存 10h。每组供心均用X J超极化心肌保存液进行低温保存。测定再灌注 3 0min心肌细胞ATP含量及心室肌超微结构 ,比较不同保存时间再灌注后心肌细胞ATP及心肌超微结构的变化。结果 :随着低温保存时间的延长再灌注 3 0min后心肌细胞内ATP的含量无明显的差异 (P >0 0 5 )。从电镜观察来看 ,兔心保存 4～ 6h时心肌纤维排列尚整齐 ,线粒体轻度肿胀 ;在保存 8h后心肌纤维排列紊乱 ,线粒体嵴肿胀 ,个别线粒体出现空泡化 ;10h时心肌组织出现部分心肌细胞坏死 ,细胞器散在于细胞间。结论 :X J超极化心脏保存液在低温保存供心 4～ 6h心肌超微结构变化不明显 ,心脏保存 10h后心肌超微结构改变较 8h明显。     

猪主动脉瓣去细胞基质的制备

目的完全去除猪主动脉瓣细胞,取得良好的去细胞支架材料。方法用5 g/L胰酶对标本中的某些基质和细胞加以消化后,再应用不同去垢剂（十二烷基硫酸钠、脱氧胆脂酸钠、Triton X-100）加以洗脱,结合溶液渗透压改变等去除猪主动脉瓣细胞;标本进行大体、光镜、电镜观察和热皱缩温度的检测。结果胆脂酸钠无法完全脱除猪主动脉瓣细胞,十二烷基硫酸钠和曲拉通均可完全去除猪主动脉瓣细胞,Triton X-100组的主动脉瓣胶原纤维和弹性纤维得以较好保持。结论Triton X-100可以成功脱除猪主动脉瓣细胞,为组织工程瓣膜的研究提供材料。     

风湿性心脏病二尖瓣狭窄伴左房血栓的诊治

风湿性心脏病二尖瓣狭窄(RMS)伴左房血栓的患者，在术前诊断、治疗处理等方面有别于单纯二尖瓣狭窄患者，1997-12～2003-09，作者对59例RMS伴左房血栓的患者进行了手术治疗。     

bFGF对犬隐静脉间质细胞体外培养细胞内钙及钙化的影响

目的:观察碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）对作为组织工程瓣间质种子细胞的犬隐静脉间质细胞（SVICs）,体外培养细胞内钙及钙化的影响。方法:分离培养犬隐静脉间质细胞,以免疫组织化学方法鉴定其特征。将36代传代细胞分为2组:对照组,细胞在正常标准条件下培养;bFGF组,细胞在含5μg/L浓度bFGF条件下培养。2周后激光共聚焦显微镜检测细胞内钙,流式细胞仪检测细胞凋亡率,原子吸收法测定细胞层钙沉积及von kossa染色。结果:犬隐静脉间质细胞主要由平滑肌细胞、肌纤维母细胞和成纤维细胞组成。培养2周后,对照组有细胞结节形成,bFGF组细胞呈极性密集生长,无明显细胞结节形成。对照组von kossa染色呈弱阳性,bFGF组阴性。对照组细胞内游离钙浓度相对比值高于bFGF组（45±3vs19±7,P<0.01）,bFGF组细胞凋亡率及细胞层钙沉积显著低于对照组[（7.6%±0.88%vs25.4%±1.68%,P<0.01;0.192±0.024μmol/gvs2.198±0.173μmol/g,P<0.01）]。结论:bFGF具有维持犬隐静脉间质细胞内游离钙的平衡,抑制细胞凋亡及钙化的作用。     

不同试剂脱除猪胸主动脉壁细胞的对比研究

目的:用不同方法去除猪胸主动脉壁细胞,并比较去细胞效果,为组织工程瓣膜或带瓣管道提供良好的实验材料。方法:采用十二烷基硫酸钠、胆脂酸钠、曲拉通（TritonX100）制备猪胸主动脉脱细胞基质。将实验分为十二烷基硫酸钠组、胆脂酸钠、曲拉通组和空白对照组。标本进行大体、光镜、电镜观察,力学性能的检测并做比较。结果:胆脂酸钠无法完全脱除主动脉壁内细胞,十二烷基硫酸钠和曲拉通都能完全脱除猪胸主动脉细胞,曲拉通较好地保持了胶原纤维和弹性纤维的原有排列和分布,并有较好的力学性能。后两者脱细胞时间无显著差别。结论:曲拉通可以成功用于制备大血管脱细胞基质,为组织工程瓣膜或带瓣管道的研究提供材料。     

转化生长因子β1促风湿性心脏病心肌细胞胶原合成的调控机制

目的揭示转化生长因子β1(TGF-β1)促风湿性心脏病(风心病)心肌细胞胶原合成的信号转导机制.方法应用风心病患者心肌细胞体外培养模型,反转录-聚合酶链反应和Western蛋白印迹方法检测不同浓度人TGF-β1(5、10、20 μg/L)刺激风心病患者心肌细胞Ⅰ、Ⅲ型前胶原mRNA、Ⅰ型胶原蛋白、c-fos、c-jun和磷酸化c-jun (Phospho-c-jun) 的表达情况;以及蛋白激酶C(PKC)拮抗剂Staurosporine(SP)预处理对其作用的影响.结果人TGF-β1呈浓度依赖性的方式促进风心病患者心肌细胞Ⅰ、Ⅲ型前胶原mRNA、Ⅰ型胶原蛋白以及c-fos、c-jun、Phospho-c-jun的表达;SP预处理不仅抑制其表达,同时部分逆转人TGF-β1上调胶原基因和蛋白表达的效应.结论TGF-β1通过介导PKC的活化,激活核转录因子AP-1,上述信号分子共同参与风心病心肌细胞胶原合成的细胞内信号转导过程.     

加强现代临床医学研究,规范术前风险评估

心脏瓣膜病是一组常见的心血管病,在诊治技术上临床医师已积累了丰富经验,患者寿命和生活质量均获得明显提高。     

去细胞带瓣牛颈静脉管道支架的制备及形态结构观察

目的研究去细胞带瓣牛颈静脉组织工程支架的制备,并观察其形态结构。方法取新鲜牛颈静脉48条,随机分为对照组、实验组,每组24条。对照组为新鲜牛颈静脉;实验组为去细胞牛颈静脉,用40 g/L脱氧胆酸钠+50 m l/L Triton-X-100为主要成分的试剂进行处理,去除内皮细胞及成纤维细胞。HE染色、苦味酸-天狼猩红染色、弹力纤维染色、电子扫描显微镜检查、基因组DNA检测,观察其形态结构,评价去细胞效果。结果实验组瓣膜及血管壁中内皮细胞、成纤维细胞去除完全,无细胞核碎片;瓣膜及血管壁胶原纤维和弹力纤维呈波浪状排列、整齐,结构完整;瓣膜、血管壁基因组DNA含量,分别较对照组下降97.58%、97.25%。结论脱氧胆酸钠+Triton-X-100是一种有效的去除牛颈静脉细胞,制备组织工程带瓣管道支架的方法。     

血管内皮生长因子基因转染骨髓间充质干细胞移植促进缺血心肌血管生成的研究

目的研究血管内皮生长因子(vascularendothelial growth factor,VEGF)基因转染骨髓间充质干细胞(mesenchymalstem cells,MSCs)移植对缺血心肌的血管生成作用。方法于2004年5月至2005年8月取第四军医大学西京医院分离、培养Wistar大鼠的MSCs,用真核表达载体pcDNA3.1(-)/hVEGF165转染MSCs。45只近交系Wistar大鼠随机均分为转染组(MSCs/VEGF组)、对照组(MSCs组)、无血清培养基组(DMEM组),结扎前降支建立急性心肌梗死模型后在梗死区边缘区行5×106细胞移植,DMEM组行等量培养基注射。细胞移植前行CM-DiI标记。移植1个月后行心脏B超测量射血分数值,组织化学染色评价新生血管密度。结果培养的MSCs呈典型贴壁生长成纤维样外观,pcDNA3.1(-)/hVEGF165能有效转染大鼠MSCs,移植1个月后MSCs/VEGF组较其余各组左室射血分数(LVEF),再生血管密度明显增加,差异均有显著性(P<0.01)。结论VEGF基因转染MSCs移植能显著促进缺血心肌血管再生,进而改善心脏功能。     

中国体外循环临床应用50周年回顾与展望

我国体外循环下心脏手术发展历程 20世纪50年代是心血管外科发展中一个重要阶段,1953年Gibbon等应用体外循环成功修补1例房间隔缺损[1]是良好的开端.1957年2月苏鸿熙教授从美国带回一套Lellihei.Dewall人工心肺机,在西安第四军医大学第一附属医院创建心脏外科并成立体外循环研究小组.