哮喘患者外周血CD4~+和CD25~+调节性T细胞的变化及意义

目的探讨CD4+、CD25+调节性T细胞在哮喘发病机制中的作用,为哮喘的临床治疗提供新方法和新思路。方法分离哮喘患者和正常人外周血单个核细胞(PBMC),用流式细胞仪分析CD4+、CD25+调节性T细胞表型及其在外周血单个核细胞中的比例。结果哮喘组外周血CD4+、CD25+调节性T细胞占T淋巴细胞的百分比为(4.2±1.5)%,对照组(8.5±2.6)%,哮喘组明显低于对照组(P<0.05),两组CD4+、CD25+调节性T细胞表面表达的活化表型CTLA-4和CD69无显著性学差异(P>0.05)。结论CD04+和CD25+调节性T细胞参与了哮喘的发生。     

CD4~+ CD25~+ Foxp3~+调节性T细胞在成人过敏性哮喘急性发作期和缓解期外周血中的表达

目的:探讨成人过敏性哮喘急性发作期和缓解期外周血中CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞的表达情况及与病情的相关性。方法:收集健康人、过敏性哮喘急性发作期和缓解期患者外周血,流式细胞术测定CD4+CD25+Foxp3+Treg的比例。结果:CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞在三组间的差异有统计学意义。哮喘缓解期组、哮喘急性期组较健康对照组该细胞比例均明显下降,哮喘急性期组较哮喘缓解期组更低。CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞数量与哮喘病情严重程度呈负相关。结论:CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞可能在过敏性哮喘的发病过程中起重要作用,它的降低导致的免疫缺陷可能与哮喘的发生相关。     

乳腺癌患者外周血CD4~+CD25~+与CD8~+CD122~+调节性T细胞水平变化及临床意义

目的 探讨乳腺癌患者外周血中CD4+ CD25+ 与CD8+ CD122+ 调节性T细胞(Tregs)的分布情况及临床意义.方法 采用流式细胞仪测定65例乳腺癌患者外周血中的CD4+ CD25+ 与CD8+ CD122+ 调节性T细胞水平,结果与18例正常健康人(正常对照组)对比.结果 乳腺癌患者外周血中的CD4+CD25+与CD8+CD122+调节性T细胞均显著高于对照组(P<0.01);且与乳腺癌的分期呈正相关.结论 乳腺癌患者外周血中具有免疫负调控功能的CD4+ CD25+ 与CD8+ CD122+ 调节性T细胞水平较高,可能与乳腺癌的病情及预后相关.     

自身免疫性溶血性贫血患者CD4~+CD25~+调节性T细胞的研究

目的探讨CD4+CD25+调节性T细胞与自身免疫性溶血性贫血发病的关系。方法应用流式细胞术检测自身免疫性溶血性贫血初发病患者及正常对照者的外周血CD4+CD25+调节性T细胞。结果自身免疫性溶血性贫血初发病患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞的比例及CD4+CD25+调节性T细胞在总CD4+T细胞中所占比例均明显低于正常对照组。结论自身免疫性溶血性贫血患者CD4+CD25+调节性T细胞的降低致细胞免疫功能受损,可能是自身免疫性溶血性贫血发病的一个重要因素。     

哮喘患者外周血CD_4~+CD_(25)~+调节性T细胞的表达及临床意义

目的探讨哮喘患者外周血中CD_4~+CD_(25)~+调节性T细胞的变化及意义。方法采用流式细胞技术检测40例哮喘患者和40例健康对照者外周血中CD_4~+CD_(25)~+调节性T细胞的表达水平,同时测定20例急性发作期哮喘患者肺功能。结果哮喘患者外周血中CD_4~+CD_(25)~+调节性T细胞占CD4+T细胞的百分比为3.02±1.85%,明显低于健康对照组(P<0.01);急性发作期哮喘患者外周血中CD_4~+CD_(25)~+调节性T细胞明显低于非急性发作期(P<0.01);急性发作期患者外周血CD_4~+CD_(25)~+T细胞百分率与FEV1呈显著正相关(r=0.5874,P<0.01)。结论CD_4~+CD_(25)~+调节性T细胞在哮喘的疾病活动中起着重要作用,是导致哮喘患者细胞免疫失调的重要原因。     

乙型肝炎患者CD4~+CD25~+调节性T细胞检测及意义

目的探讨CD4+CD25+调节性T细胞在乙型肝炎患者发病机制中的作用。方法利用免疫荧光法检测20例携带者、10例慢性乙型肝炎5、例慢性重症乙型肝炎患者的CD4+CD25+调节性T细胞水平,分析与HBV基因型的关系。结果①重型乙型肝炎组外周血CD4+CD25+调节性T细胞的百分率为(2.52±0.94)%,较慢性乙型肝炎组的(5.25±2.17)%差异有统计学意义(P<0.05),比乙肝病毒携带者组及健康对照组则差异有统计学意义(P均<0.01);②慢性乙型肝炎组外周血CD4+CD25+调节性T细胞的百分率与无症状乙肝病毒携带者组及健康对照组相比,差异具有统计学意义(P<0.05);③乙肝病毒携带者组外周血CD4+CD25+调节性T细胞的百分率为(8.51±2.82)%,与健康对照组的(8.51±2.82)%比较差异无统计学意义(P>0.05)。④HBV基因型C型组外周血CD4+CD25+调节性T细胞的百分率为(6.42±2.36)%,较HBV基因型B型组的(7.64±2.87)%稍为下降,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论 CD4+CD25+调节性T细胞能抑制T细胞对乙肝病毒的免疫反应,从而抑制乙型肝炎的发生;CD4+CD25+调节性T细胞的水平与病情轻重有一定的关系。     

急性冠脉综合征患者体内CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T细胞的变化及阿托伐他汀对其影响

目的:研究急性冠脉综合征患者外周血CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T细胞的变化及阿托伐他汀对其影响。方法:经冠状动脉造影和血管内超声显示病变斑块狭窄率>50%或管腔面积<4 mm2临床诊断急性冠脉综合征患者120例,随机分成两组,即传统治疗组(主要使用行气活血,通脉止痛类中药)和传统治疗加阿托伐他汀治疗组,每组60例,选取健康人群48例作为对照组。比较各研究组外周血中CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T细胞的数目和功能;利用ELISA法检测各组细胞炎性因子浓度。结果:与传统治疗组比较,阿托伐他汀治疗组CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T细胞的数目显著增加(P<0.05),CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T细胞增殖反应下降;上清液中TGF-β和IL-10浓度显著升高,而IFN-γ浓度显著下降。结论:急性冠脉综合征患者循环血调节性T细胞数目及功能下降,阿托伐他汀治疗能增加CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T细胞数目并增强其功能,抑制急性冠脉综合征患者免疫炎性反应。     

人外周血CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T细胞分选及扩增方法的建立

目的建立人外周血CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T细胞(Treg)的免疫磁珠分选法(MACS)及体外扩增方法 ,并对扩增前后Treg细胞纯度及表型进行鉴定。方法流式细胞术检测人外周血Treg细胞占CD4~+T细胞的比例;免疫磁珠法分选CD4~+CD25~+Treg细胞,用CD3/CD28单抗包被的Dynalbeads联合IL2共同刺激CD4~+CD25~+Treg细胞进行体外扩增培养,在扩增培养的第0、7、14、21天分别进行细胞计数及检测细胞的活性,取扩增培养第0天及第14天细胞行流式细胞术检测扩增前后细胞纯度、主要表面标记及Foxp3的表达情况。结果正常人外周血CD4~+CD25~+Foxp3~+Treg水平占CD4~+T细胞(7.94±1.86)%,MACS能够成功分选出CD4~+CD25~+Foxp3~+Treg细胞,分选平均纯度达(95.86±0.65)%,细胞活性95%;以CD3/CD28单抗包被的Dynalbeads联合IL2共同刺激CD4~+CD25~+Treg细胞进行外扩增培养后,细胞有明显扩增。经2周扩增后,细胞扩增倍数达到原细胞数量的(21.33±1.53)倍,扩增后细胞Foxp3的表达由(95.86±0.65)%下降至(93.71±1.30)%,但差异无统计学意义(P0.05)。结论免疫磁珠分选法能够分选出高纯度的CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T细胞,体外成功扩增CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T细胞,扩增前后Treg细胞的纯度及表型无明显变化。     

CD4~+CD25~+调节性T细胞对哮喘大鼠免疫功能影响

目的:观察CD4+CD25+调节性T细胞(CD4+CD25+Treg)对CD4+CD25-T细胞增殖和Th1/Th2细胞因子分泌的影响,探讨其在哮喘气道炎症中的作用机制。方法:将哮喘大鼠CD4+CD25-T细胞分别与卵白蛋白(OVA)免疫耐受大鼠CD4+CD25+Treg细胞和哮喘大鼠CD4+CD25+Treg细胞联合培养,3H胸腺嘧啶核苷(3H-TdR)掺入法测量细胞增殖情况,ELISA检测细胞IL-4、IL-5和IFN-γ含量。结果:OVA耐受大鼠CD4+CD25+Treg细胞能抑制CD4+CD25-T细胞增殖和Th2细胞因子分泌(P<0.05);哮喘大鼠CD4+CD25+Treg细胞可明显抑制IFN-γ的分泌(P<0.05)。结论:OVA免疫耐受大鼠CD4+CD25+Treg细胞可能通过抑制哮喘大鼠CD4+CD25-T细胞增殖和影响Th1/Th2平衡发挥作用,哮喘大鼠CD4+CD25+Treg细胞存在功能异常,可能与哮喘的发病有关。     

哮喘患儿CD4+CD25+调节性T细胞及FOXP3的表达

目的:研究CD4+CD25+调节性T细胞在哮喘儿童外周血中的比例改变,并探讨其临床意义.方法:采用细胞内染色的流式细胞术检测急性发作期哮喘患儿外周血CD4+CD25+Treg及其调控基因FOXP3的表达,并与健康对照组进行比较.结果:急性发作期哮喘患儿外周血CD4和CD25双阳性细胞所占比例与健康对照组无明显差异(P>0.05),而CD4+CD25+FOXP3调节性T细胞在外周血中的比例明显低于健康对照组(P<0.01).结论:哮喘患儿外周血CD4+CD25+FOXP3调节性T细胞在外周血中的比例明显减少,可能与哮喘的发病机制有关.     

磁激活分选法双重分离大鼠外周血单个核细胞CD4~+CD25~+调节性T细胞

目的:应用磁激活细胞分选(MASC)技术从卵白蛋白(OVA)免疫耐受大鼠外周血单个核细胞(PBMCs)中分选出大量高纯度CD4+CD25+调节性T细胞(CD4+CD25+Treg),以研究其在支气管哮喘中的作用。方法:从OVA免疫耐受大鼠外周血中分离出PBMCs,应用MASC技术阴性分选CD4+T细胞,再阳性分选出CD4+CD25+Treg;流式细胞仪检测。结果:分选前的CD4+CD25+Treg细胞占CD4+T细胞数的11.07%,CD4+T细胞占总数的21.88%;CD4阴性分选后,CD4+CD25+Treg细胞占CD4+T细胞数的10.95%,CD4+T细胞占总数的89.28%;CD25阳性分选后,CD4+T细胞超过总数的95%,而CD4+CD25+Treg细胞占总数的90.92%,CD4+CD25+Treg细胞纯度大于90%。结论:应用MASC技术成功从OVA免疫耐受大鼠的PBMCs中分选出了高纯度的CD4+CD25+Treg细胞。     

哮喘患者外周血Rho激酶及CD4+CD25+调节性T细胞测定

目的：比较不同研究对象外周血Rho激酶及CD4+CD25+调节性T细胞的表达规律，探讨Rho激酶和CD4+CD25+调节性T细胞在哮喘患者中的变化和相关性。方法：选取中、重度哮喘患者16例，健康对照组14例，通过年龄、性别配对，ELISA测定所有研究对象血清Rho激酶水平，流式细胞仪测定CD4+CD25+调节性T细胞水平，所有研究对象经肺功能仪测定肺功能。结果：哮喘组外周血Rho激酶表达水平高于对照组(P<0.05)，外周血CD4+CD25+调节性T细胞水平低于对照组(P<0.05)；两组外周血Rho激酶与肺功能第1秒用力呼气容积(forced expiratory volume in one second，FEV1)占预计值百分比(FEV1%)无相关关系(r=-0.491，P>0.05)；两组外周血CD4+CD25+调节性T细胞水平与肺功能FEV1%呈轻度正相关关系(r=0.380，P=0.038)；两组外周血Rho激酶与CD4+CD25+调节性T细胞水平无相关关系(r=-0.438，P>0.05)。结论：哮喘患者外周血Rho激酶水平升高，CD4+CD25+调节性T细胞水平降低，可能在哮喘发病过程中起一定的作用。     

CD4~+CD25~+调节性T细胞及TGF-β1、IL-10在结肠癌肺转移患者外周血中的表达

目的探讨结肠癌肺转移患者外周血CD4~+CD25~+调节性T细胞和血清TGF-β1、IL-10的临床意义。方法分别应用流式细胞仪(FCM)、逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)、酶联免疫吸附测定(ELISA)方法检测结肠癌肺转移患者、健康人外周血CD4~+CD25~+调节性T细胞占总CD4~+调节性T细胞的比例、叉头状螺旋转录因子(Foxp3)表达水平和血清转化生长因子β1(TGF-β1)、白细胞介素10(IL-10)含量。结果结肠癌肺转移患者外周血CD4~+CD25~+调节性T细胞占总CD4~+的比例、Foxp3表达水平及TGF-β1及IL-10的浓度均明显高于健康人(P<0.001或P<0.05)。结论结肠癌肺转移患者外周血CD4~+CD25~+调节性T细胞占总CD4+调节性T细胞的比例明显升高,可能是通过Foxp3基因控制的抑制性细胞因子TGF-β1和IL-10而参与结肠癌肺转移的免疫耐受。     

CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T细胞与肺癌患者预后的关系

目的分析CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T(Treg)细胞与肺癌患者预后的关系。方法选取2017年4月至2018年6月驻马店市中心医院收治的肺癌患者78例(肺癌组)及同期健康体检者35例(对照组),以流式细胞仪测定所有入组对象外周血CD4~+CD25~+Foxp3~+Treg细胞、CD4~+CD25~+Treg细胞、CD4~+T细胞、CD4~+CTLA-4~+T细胞,分析肺癌组上述指标与临床特征的关系,比较肺癌患者化疗前后各指标变化及不同预后(2年生存或死亡)患者各指标差异,分析CD4~+CD25~+Foxp3~+Treg及其他各细胞预测肺癌预后的价值。结果肺癌组外周血CD4~+CD25~+Foxp3~+Treg细胞、CD4~+CD25~+Treg细胞、CD4~+CTLA-4~+T细胞比例均较对照组高,CD4~+T细胞比例较对照组低,差异有统计学意义(P0.01)。肺癌组化疗后CD4~+CD25~+Foxp3~+Treg细胞、CD4~+CD25~+Treg细胞、CD4~+CTLA-4~+T细胞比例低于化疗前,CD4~+T细胞比例高于化疗前,差异有统计学意义(P0.01)。肺癌组中不同年龄、不同肺癌分期、有无淋巴结转移患者CD4~+CD25~+Foxp3~+Treg细胞比例差异有统计学意义(P0.05),而不同性别、病理类型患者CD4~+CD25~+Foxp3~+Treg比例差异无统计学意义(P0.05)。死亡组入院时的外周血CD4~+CD25~+Foxp3~+Treg细胞、CD4~+CD25~+Treg细胞、CD4~+CTLA-4~+T细胞比例均较存活组高,而CD4~+T细胞比例低于存活组(P0.05);CD4~+CD25~+Foxp3~+Treg细胞预测肺癌患者死亡的ROC曲线下面积为0.865,高于CD4~+CD25~+Treg细胞(0.797)、CD4~+T细胞(0.799)、CD4~+CTLA-4~+T细胞(0.752),差异有统计学意义(P0.05)。结论外周血CD4~+CD25~+Foxp3~+Treg细胞与肺癌患者发病、化疗疗效、预后有密切关系,可能与肺癌患者免疫抑制及肿瘤进展相关。     

CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T细胞在炎性疾病中的研究

1调节性T细胞抑制炎症反应维持免疫耐受的理论基础CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞(CD4+CD25+Foxp3+regulatory T cells,简称Tregs)是Sak-aguchi等于1995年首次报道存在于正常人和鼠类外周血及脾脏组织中,具有维持自身免疫耐受功能的一种T细胞亚群[1]。     

Th17及CD4~+CD25~+调节性T细胞在结肠癌患者外周血中的表达

目的检测结肠癌患者外周血Th17及CD4+CD25+调节性T细胞水平及功能状态,探讨其在结肠癌发病过程中的免疫机制。方法应用流式细胞仪测定结肠癌患者及对照组外周血中Th17和CD4+CD25+调节性T细胞占CD4+T细胞的百分比,采用ELISA法测定两组患者外周血IL-17、IL-23、TGF-β1和IL-6的水平。结果结肠癌患者外周血Th17、CD4+CD25+调节性T细胞占CD4+T细胞的百分比及各相关的细胞因子较对照组升高,差异均有统计学意义(P<0.05);中晚期结肠癌组外周血Th17、CD4+CD25+调节性T细胞占CD4+T细胞的百分比及各相关的细胞因子较早期结肠癌组升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 Th17、CD4+CD25+调节性T细胞分化失衡与结肠癌发生、发展密切相关,为结肠癌免疫治疗提供新思路。     

DHHCs家族成员在小鼠CD4~+CD25~-T细胞和CD4~+CD25~+调节性T细胞活化中的表达及意义

目的观察DHHCs家族成员在小鼠CD4+CD25-T细胞和CD4+CD25+调节性T细胞活化前后的表达情况并探讨其意义。方法磁珠法从小鼠脾脏分选CD4+CD25-T细胞和CD4+CD25+调节性T细胞,流式细胞术检测纯度后,体外用anti-CD3e/CD28抗体分别刺激其活化。TRIzol法提取细胞总RNA,RT-PCR逆转录成cD-NA,分别用24个DHHCs家族成员特异性引物进行PCR反应,对产物进行琼脂糖凝胶电泳分析。结果活化前CD4+CD25-T细胞高表达DHHC5、DHHC14和DHHC18,活化后其上调表达DHHC2、DHHC4、DHHC6、DHHC8、DHHC9、DHHC12、DHHC15和DHHC16;活化前CD4+CD25+调节性T细胞仅表达DHHC9,活化后其上调表达DH-HC18,而下调DHHC9的表达。结论 DHHCs家族成员在CD4+CD25-T细胞和CD4+CD25+调节性T细胞中表达存在差异,活化后表达谱发生显著变化,提示DHHCs家族成员的表达与CD4+T细胞的活化有关,可能参与CD4+T细胞不同亚群活化的调控。     

CD4~+CD25~+调节性T细胞在丙型肝炎中的意义

CD4~+CD25~+调节性T细胞(CD4~+CD25~+Treg)是一个具有独特免疫调节功能的T细胞亚群,它不仅能抑制自身免疫性疾病的发生,并且会对移植耐受、肿瘤与感染免疫的调节产生参与诱导的作用,能够促进人的机体免疫内环境的稳定。本文对CD4~+CD25~+调节性T细胞的特征与调节的机制进行分析探讨,和在丙型肝炎病毒感染免疫发病机制中可能会发生的作用进行阐述。有相关的研究显示:其对自身抗原与非己抗原都会产生较强的免疫抑制效果。临床的相关研究结果,特别是对其在丙型肝炎病毒感染发病机制里进行的作用研究,都有利于对丙型肝炎慢性感染免疫应答机制的掌握和对慢性肝炎发生机制和免疫耐受的认识,并最终为慢性丙型肝炎病毒感染开辟新的免疫治疗途径。     

胃癌患者外周血中 CD4+CD25+ 调节性 T 细胞和 Th17 细胞的表达和临床意义

目的检测CD4~+CD25~+调节性T细胞和Th17细胞在胃癌患者外周血中的表达,探讨两种细胞在胃癌中的临床意义。方法随机选取我院收治的胃癌患者30例,作为胃癌组,另选取同期在我院进行健康体检人员30例作为正常组,对两组外周血中CD4、CD25、Foxp3、IL-17的表达进行检测,分析CD4~+CD25~+调节性T细胞和Th17细胞的数量和比例。结果胃癌组外周血中CD4~+CD25~+调节性T细胞和Th17细胞的表达均高于正常组(P0.05);胃癌组中晚期、T3+T4、有淋巴结转移患者外周血中CD4~+CD25~+调节性T细胞的表达分别高于早期、T1+T2、无淋巴结转移患者(P0.05),但不同肿瘤分期、浸润深度、淋巴结转移患者之间Th17细胞的表达差异均不显著(P0.05)。结论胃癌患者外周血中CD4~+CD25调节性T细胞和Th17细胞的表达均显著升高,且提示肿瘤进展和CD4~+CD25~+调节性T细胞相关,但与Th17细胞无明显统计学相关。     

CD_4~+CD_(25)~+调节性T细胞与支气管哮喘

人体内存在多种调节性T细胞,其中CD4+CD2+5调节性T细胞(CD4+CD2+5Treg)具有独特的作用方式和功能特征。CD4+CD2+5Treg在移植耐受、肿瘤免疫、过敏性疾病及微生物感染方面起着重要作用。支气管哮喘作为一种常见的慢性呼吸道疾病,其发病机制极为复杂,与免疫等多种因素有关。本文就CD4+CD2+5Treg的特性及在哮喘的发病和治疗方面研究进展作一综述。