辐射损伤小鼠皮肤缺损模型愈合评价

目的建立小鼠不同全身辐射剂量合并皮肤缺损模型,研究全身辐射对皮肤创面愈合的影响,探讨其病理生理学变化。方法采用180只雌性昆明种小鼠,60 Coγ射线一次性均匀照射4、6、8 Gy,照后30 min内,于小鼠背部制作1.5 cm×1.5 cm方形全层皮肤缺损伤口,构建不同全身放射剂量合并皮肤缺损动物模型(n=50),以单纯皮肤缺损作为对照组(n=30),各组动物于伤后3、5、7、10、14 d分别处死6只,取伤口全层皮肤组织,组织病理学检查伤口区炎细胞、成纤维细胞、新生毛细血管数量的变化;应用图像分析系统定量分析未愈伤口残余面积,统计14 d内各组动物存活率及体质量变化。结果 6 Gy放创组7 d和14 d的存活率分别为75%和55%,8 Gy放创组7 d时存活率仅33%,至10 d全部死亡。伤后14 d内,随辐射剂量的增加,放创组体质量较伤前降低程度愈加明显。全身辐射对皮肤创面愈合延迟随辐射剂量增加而加重:6、8Gy放创组2 d与对照组相比残余面积增大(P<0.01),4 Gy放创组伤后8 d与对照组相比残余面积增大,差异有统计学意义(P<0.05)。H-E染色显示:与对照组相比,放创组小鼠伤口早期炎症反应受抑,成纤维细胞和新生毛细血管数量增多明显滞后,肉芽组织形成延迟,上皮覆盖滞后。结论 6 Gy 60Coγ射线全身放射合并皮肤缺损伤的动物模型可为放创复合伤难愈机制的研究和早期的实验治疗提供研究平台。     

电离辐射对伤口中性粒细胞的影响及康复新的促愈作用

目的：研究电离辐射对伤口中性粒细胞数量和部分功能的影响及康复的作用。方法:从置入大鼠背部的海绵中收集中性粒细胞,测定其数量和吞噬、运动功能变化。结果：伤后24－48h,4、6、8Gy全身照射复合创伤组,伤口白细胞和中性粒细胞数量均显著低于单创组,且中性粒细胞吞噬功能和运动功能也降低。康复新对单纯创伤、6Gy放射复合伤组伤口中性粒细胞数量和功能有明显的提高。结论：创伤愈合早期,伤口中性粒细胞数量和功能的下降是全身照射引起愈合延迟的原因之一;康复 新的促愈合作用与提高伤口中性粒细胞数量和功能有关。     

γ射线全身照射降低小鼠切割伤愈合伤口撕裂强度

目的探讨不同放射剂量全身放射对小鼠切割伤口愈合撕裂强度的影响。方法采用60Coγ射线一次性均匀照射4、6或8 Gy,照后30 min内,全层切开小鼠背部正中皮肤,构建不同剂量全身放射+切割复合伤动物模型(n=20),以小鼠单纯切割伤作为对照组(n=10)。各组动物于伤后第10天分别处死,取伤口处全层皮肤组织,利用生物力学方法分析伤口皮肤组织撕裂强度,并结合组织病理学方法综合评价伤口愈合情况。结果复合伤组小鼠伤口随照射剂量增加,撕裂强度降低明显。10 d时,4 Gy组伤口撕裂强度为(114.26±0.29)g,与单纯切割伤组[(117.12±1.86)g]相比差异无统计学意义,而6 Gy组[(91.87±1.96)g]和8 Gy组伤口撕裂强度[(55.26±2.64)g]均低于单纯切割伤组(P<0.05)。H-E染色显示,与单纯切割伤组相比,复合伤组小鼠伤口胶原纤维排列无序,组织疏松,成纤维细胞增殖较少。结论放射损伤延缓伤口愈合,全身放射+切割复合伤时伤口撕裂强度随放射剂量增高而降低。     

大鼠放创复合伤时皮肤创伤愈合的形态学观察

目的 探讨全身辐射对创伤后皮肤愈合的组织学与超微结构变化特点。方法 用^60Coγ射线照射2、4、6Gy，并在大鼠背部致2．5％体表面积全层皮肤创面2个。于伤后不同时间，用HE染色、透射电镜观察其创面变化及形态学改变。结果 放创复合伤后，创伤愈合速度随照射剂量增加而明显减缓。单创组伤后3d创面底部即见成纤维细胞增生，伤后10～15d，胶原瘢痕形成，可见新生血管网、神经末梢，表皮细胞生长逐渐覆盖伤口，20d时创面已愈合。但6Gy组损伤严重，伤后3d见大量渗出物、血凝块、坏死组织，15d表皮细胞蔓延生长缓慢，仍见胞核异型、扭曲、皱褶。2Gy组影响较轻，伤后7d已有肉芽组织生长，15d见纤维瘢痕形成。结论 放创复合伤时皮肤愈合过程较为复杂，肉芽组织及表皮细胞生长的受抑程度随照射剂量增加而加重。     

LED红光照射对放创复合伤小鼠创面愈合的影响

目的研究LED红光照射对放创复合伤小鼠创面愈合的影响。方法 C57BL/6小鼠分为单纯创伤组(单创组)、放创复合伤组(放创组)和放创复合伤红光照射组(放创红光照射组)。单创组于背部制一全层皮肤切除创面,放创组经60Coγ射线5.0 Gy全身一次性均匀照射后在背部制等大创面,放创红光照射组相同制伤后予LED红光照射。伤后动态观察各组创面愈合情况以及小鼠一般情况、体质量、血常规的变化,同时观测红光照射时照射盒内温度变化。结果各组创面均愈合,放创复合伤红光照射组小鼠比放创复合伤组创面平均愈合时间缩短1～2 d(P<0.05),外周血白细胞计数25 d时比放创复合伤组高出43.41%,第28天时高出37.98%(P<0.05)。放创复合伤红光照射组体质量增长与放创复合伤组比较并无明显差别(P>0.05)。结论放创复合伤创面愈合较单创延迟,LED红光照射对放创复合伤创面愈合具有促愈作用。     

Cyr61在单纯及放创复合伤愈合过程中的表达及其临床意义

目的研究Cyr61在单纯和放创复合伤愈合过程中的表达变化,对伤口愈合和组织改建的影响,及其在创伤实验室诊断中的意义。方法制备单纯及放创复合伤动物模型,采用光镜、免疫组化、RT-PCR等方法,动态观察伤口愈合过程中Cyr61mRNA及蛋白表达变化规律。结果5Gy(γ射线)全身照射后对伤口愈合有明显的损害作用。在伤后第3、6、9、15天,Cyr61表达量均随创伤愈合时间延长而增加;但在同一时间点,放创复合伤组Cyr61蛋白和mRNA的表达量均低于单纯创伤组,第21天放创复合伤组表达继续升高,而单纯创伤组表达下降。Cyr61表达时相拖后与辐射所致伤口愈合延迟一致。结论Cyr61在放创复合伤肉芽组织中表达较单纯创伤组明显降低,影响细胞迁移、新生血管形成和组织改建等重要过程,这可能是辐射所致伤口难愈的重要原因之一,认识Cyr61在创伤愈合过程的表达规律有助于创伤的预后判断和治疗。     

放射损伤,烧伤及复合伤时肝线粒体功能障碍与脂质过氧化作用

本文采用小鼠6 Gyγ射线全身照射和20％Ⅲ度凝固汽油烧伤模型,观察了伤后9 d内单伤和复合伤小鼠肝线粒体脂质过氧化物、维生素E及巯基含量、细胞色素氧化酶活力,呼吸控制率和磷氧比值的变化。结果表明脂质过氧化作用在复合伤组早期增加呈现复合效应。维生素E含量在单伤组下降更明显。巯基含量在各伤组变化总趋势是升高。细胞色素氧化酶活力在单放组第7天显著升高。呼吸控制率和磷氧比值以复合伤组下降更明显。实验结果提示伤后肝线粒体呼吸功能障碍与脂质过氧化损伤有一定关系。     

放射复合烧伤大鼠造血组织的核酸改变

大鼠受15％三度烧伤,同时分别复合2、4、6、8戈瑞(Gy)照射。伤后48小时,骨髓、淋巴结、脾脏及外周血中的DNA和RNA含量随照射剂量增加而明显降低。照射以后上述组织中DNA含量减少的速度较RNA减少更快。造血组织中DNA含量的改变比外周血要明显。2Gy照射的核酸改变比15％三度烧伤更严重。8Gy照射复合烧伤后,上述组织的核酸含量减少部超过50％。在放射和烧伤的复合效应中,放射是起主导作用的。但可明显看出烧伤对辐射的叠加效应。文章讨论了放射复合烧伤时核酸改变的机制。     

骨髓间充质干细胞对合并局部放射损伤创面促愈作用及机理研究

目的 探讨骨髓间充质干细胞（mesenchymal stem cells,MSC)对合并局部放射损伤难愈性创面的作用及其机理研究。方法 成年健康贵州小香猪8只,3%戊巴比妥钠静脉麻醉,电子线照射脊柱两旁皮肤,深度1cm,立即在受照射创面打孔,直径2cm,每侧8-10个,一侧为对照组,局部注射生理盐水,一侧为MSC组,局部注射自体MSC,采用早期贴壁法分离小香猪骨髓MSC,将自体的MSC移植到局部合并20Gy的放射损伤创面,采用激素共聚焦,胶原定量EISA,细胞划痕实验,RT-PCR等方法,观察了MSC对合并放射损伤创面,采用激光共聚焦,胶原定量,ELISA,细胞划痕实验,RT-PCR等方法,观察了MSC对合并放射损伤创面的促愈作用及其促愈的机理。结果 将自体的MSC移植到局部合并20Gy创面后能加快创面愈拿 速度,使愈合的时间比对照组提前了3-4d,肉芽组织形成丰富,胶原合成增加,其促愈的机理与MSC分泌IL-8,IL-6,G-CSF等细胞因子吸引和趋化炎症细胞和修复细胞向创面迁移,启动修复,增加伤口中修复细胞（成纤维细胞,血管内皮细胞）的数量有关,同时MSC在创伤局部微环境的作用下,基因和蛋白表达发生变化,尤其是I型胶原基因表达和蛋白合成增加,提示在局部微环境作用下,MSC可分泌细胞外基质或/和直接分化为成纤维细胞参与组织的修复。结论 MSC对局部合并放射损伤的创面有明显有效的促愈效应,MSC的促愈作用是在干细胞与创伤局部微环境相互作用下实现。     

基质金属蛋白酶3在创伤愈合中作用的实验研究

目的探讨基质金属蛋白酶3在创伤愈合过程中的变化及其意义。方法取伤后1d伤口液作为创伤修复启动微环境，刺激真皮多能干细胞，24h后检测细胞表达MMP3含量的变化。同时制作单纯创伤和难愈创伤动物模型．通过免疫组化和图像分析方法观察伤后不同时相伤口组织MMP3含量变化。结果创伤早期伤口液作用真皮多能干细胞后表达MMP3显著增加。正常大鼠皮肤组织成分可见一定量的MMP3表达，阳性细胞主要为表皮细胞、毛囊外根鞘细胞、真皮成纤维细胞、血管内皮细胞等。单纯创伤大鼠伤后各时相点MMP3表达均显著增加，特别是以真皮组织增加更为明显．其峰值在伤后5，7d。难愈创伤组大鼠伤I：I局部MMP3含量在伤后各时相点亦显著增加，但与单纯创伤组相比，其含量在伤后3、5、7d均显著减少，尤以真皮组织表达减少更为明显，并且MMP3表达峰值延迟，为伤后10d。结论MMP3是一种重要的创伤愈合调节分子；通过高表达MMP3可能是真皮多能干细胞参与创伤修复的途径之一。     

Dose-effect relationships in total body irradiation on the healing of cutaneous wounds

Objective To study the effects of dosages of total body irradiation on the healing process of cutaneous wounds and to observe the changes of wound area at different periods after injury.Methods The entire body irradiation from a ^60Co γ-ray source was performed on Wistar rats. The single dosage varied from 1 to 8 Gy. Within 1 h after irradiation, two whole thickness circular cutaneous wounds corresponding to 2. 5% of total body surface area (φ=22 mm) were produced on the back of the animals (combined injury groups ). Same wounds were produced on rats with noirradiation (single wound group). Wound healing was observed at different points after injury.Results After total body irradiation with the dose of 1,2,3,4,5,6, 7 or 8 Gy, the wound healing was obviously retarded as the dosages increased. The wound area remained was larger in the large dosage groups than in the small dosage groups. Seven days after injury, there was 33. 5% wound surface left unhealed in the single wound group, whereas in the combined injury groups, 35. 4%,38. 1%, 41.6%, 48. 8%, 53. 9%, 63. 7%, 69.2% and 73. 9% of the wound surfaces remained unhealed, respectively. Statistical analysis showed marked correlations between the various times after total body irradiation and various dosages to the percentage of unhealed wound surface. Nine dose-effect relation formulae were deduced according to the statistical results.Conclusions In soft tissue trauma combined with radiation injury, the delay of wound healing is related to the dose of radiation inflicted. It is also related to the time between iniurv and time of observation.     

糖尿病大鼠深Ⅱ度烫伤创面成纤维细胞生物学行为的改变

目的研究糖尿病深Ⅱ度烫伤对真皮成纤维细胞(FB)生物学行为的影响。方法以链脲菌素(STZ)诱导糖尿病的深Ⅱ度10%TBSA烫伤大鼠模型,观察创面愈合情况。流式细胞术检测真皮组织中FB细胞周期;TUNEL法检测FB凋亡;伤后0、3、7、21d检测皮肤组织的羟脯氨酸含量。结果糖尿病大鼠深二度烫伤后愈合延迟,糖尿病组烫伤后进入S期的成纤维细胞数量明显低于正常组(P<0.01,P<0.05),创面凋亡细胞数量高于正常组(P<0.01,P<0.05);烫伤前和烫伤后糖尿病组皮肤组织单位面积羟脯氨酸含量均低于正常大鼠(P<0.01,P<0.05)。结论在糖尿病病理状态下,皮肤损伤后主要的修复细胞FB增殖异常,凋亡增多,胶原含量减少,可能是创面修复延迟的原因之一。     

Thermal injuries induce gene expression of endogenous c-fos, c-myc and bFGF in burned tissues

Objective To investigate the expression sequence and distribution characteristics of the protooncogenes cfos,c-myc and endogenous basic fibroblast growth factor(bFGF) genes in burned tissues,and to explore the possible effects of changes in these genes‘ functions on wound healing.Methods Partial-thickness burns of 30% TBSA were esablished on backs of Wistar rats.In situ hybridization and histological methods were used to detect expression of c-fos,c-myc and bFGF genes in normal and burned tissue at 3h,6h,1d,3d,7d and 14 d postburn. Results Although expression of c-fos and c-myc genes and bFGF gene could be found in normal skin,the expression of all three were markedly induced by burn wounds and the expression models in sequence and distribution were quite different.Expression of c-fos gene increased and peaked at 6h.Signals were mainly localized in both nuclei of dermal fibroblasts and monocytes.The expression of bFGF gene increased at 6h and peaked at 1 d postburn,and was distributed in the cytoplasm of fibroblasts.C-myc gene peaked 3 d postburn and was also distributed in the cytoplasm of fibroblasts.Conclusions These results indicated that thermal injury could induce the expression of c-fos.c-myc and bFGF at gene level,showing phasic control and regional distribution.The phasic expression of these genes suggests that there is an interaction between protooncogenes and bFGF,which may play an important role in wound healing.The different expressions of c-fos and c-myc play an inducing role in regulating bFGF,and in turn affect wound healing.     

粉防己碱-胶原复合膜对大鼠单纯切割伤和放射切割复合伤创面愈合的作用

目的:观察粉防己碱-胶原复合膜对大鼠单纯切割伤和放射切割复合伤创面愈合的作用.方法:大鼠双侧同体对照,用药后不同时间测定创面愈合率和肉芽组织中蛋白、DNA、羟脯氢酸的含量.结果:含粉防己碱0.25%～0.50%的外用药膜可有效促进单纯切割伤创面愈合,创面缩小较快,肉芽组织中蛋白、DNA、羟脯氨酸的含量较对照组明显增多.而各剂量组对放射切割复合伤均无效.结论:粉防己碱-胶原复合膜对单纯切割伤具有促进愈合的作用,而对放射切割复合伤无效.     

鸸鹋油对烫伤大鼠创面的抗炎及促愈合作用

目的 从炎症反应的角度探讨外用鸸鹋油对烫伤大鼠创面愈合的影响。方法 建立10%体表面积浅Ⅱ度烫伤大鼠模型,将144只雄性Wistar大鼠随机分为A、B、C组,分别外用生理盐水、碘伏、鸸鹋油治疗,观察创面的大体变化及愈合情况,分别留取不同时相的创面和血液标本,进行组织病理学检查和含水量测定(干湿重法)、ELISA法检测组织和血浆TNFα含量。结果 外用鸸鹋油可使创面肿胀、渗出减轻,创面无感染迹象,未见任何副作用;病理形态学观察发现鸸鹋油可使局部组织炎症反应减轻,与A、B组相比较,以伤后1、3d差异最为明显;C组伤后3d组织含水量及TNF-α含量明显减少(P<0.01),两者之间存在正相关关系(P<0.001);可使创面愈合时间缩短(P<0.01),促进创面再上皮化和表皮各层的分化。结论 在浅Ⅱ度烫伤创面外用鸸鹋油具有抗炎作用,可能与局部组织中促炎细胞因子水平的降低有关;并能促进创面愈合,可能与其抑制局部组织的继发性炎症反应有关。     

添加丙氨酰谷氨酰胺胃肠外营养对烫伤大鼠的作用

目的探讨添加丙氨酰谷氨酰胺（Ala-Gln）全胃肠外营养（TPN）对烫伤大鼠的空肠黏膜、蛋白质代谢及创面肉芽组织的影响。方法33只SD大鼠,随机分为非烫伤正常参照组（正常组）、传统TPN组（传统组）和添加Ala-Gln的TPN组（二肽组）,每组各11只。正常组自由饮食,另2组大鼠在颈外静脉插管后行30%体表面积Ⅲ度烫伤,并接受等热量（780 kJ.kg-1.d-1）等氮量（1.8 g氮量.kg-1.d-1）TPN 7天,留取24 h尿测每日氮平衡和累积氮平衡;7天后取血测定总蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、前白蛋白（PAB）、转铁蛋白（TRF）,高效液相法检测肌肉中谷氨酰胺（Gln）的含量;取一段空肠作黏膜形态学观察;光镜下观察烫伤创面肉芽组织的情况。结果二肽组的血清PAB、TRF及肌肉中Gln含量明显高于传统组（P〈0.01）,空肠黏膜绒毛高度、隐窝深度、黏膜厚度、绒毛表面积明显高于传统组（P〈0.01）,创面肉芽组织中的毛细血管和成纤维细胞密度明显高于传统组（P〈0.01）。结论烫伤大鼠应用添加Ala-Gln的胃肠外营养能改善机体氮平衡,促进机体蛋白质合成,减少肌肉中Gln含量的下降,减轻空肠黏膜的萎缩,...     

生肌玉红膏促进慢性体表溃疡愈合的临床研究

目的：探讨生肌玉红膏促进体表慢性溃疡愈合的临床疗效及改善创面微循环的相关作用机制。方法：将30例慢性难愈性体表溃疡患者分为治疗组和对照组,每组各15例。治疗组给予生肌玉红膏覆盖创面,对照组给予凡士林纱布覆盖创面,疗程均为15d。分别于治疗后第3、7、14天切取溃疡中心肉芽,采用MPIAS2500彩色病理图文分析系统检测创面肉芽微血管密度（MVD）,氰化高铁血红蛋白法检测血红蛋白（Hb）含量,722分光光度仪检测羟脯氨酸（Hyp）含量,并采用照相法计算创面愈合率。结果：治疗组MVD、创面肉芽Hb含量、肉芽Hyp含量及创面愈合率均高于对照组,差异有统计学意义（P〈0．05或0．01）。结论：生肌玉红膏能通过改善创面微循环促进体表慢性溃疡愈合。     

盐酸塔斯品碱促进大鼠皮肤创伤愈合及其作用机制的研究

目的:研究盐酸塔斯品碱对皮肤创伤愈合的促进作用及其机制.方法:建立大鼠背部双侧圆形创伤模型,观察创伤创面的愈合时间,测量其面积,检测组织中羟脯氨酸与蛋白质含量的变化,并进行组织形态学观察.结果:盐酸塔斯品碱可明显缩短创面的愈合时间.创伤后第3～14天,盐酸塔斯品碱组大鼠创面愈合率显著高于自身二甲亚砜对照组(P＜0.05或P＜0.01);创伤后第3～7天,大鼠创伤肉芽组织中蛋白质含量在盐酸塔斯品碱2 mg/ml组明显高于模型组(P＜0.05),创伤后第7天蛋白质含量达到峰值,第14～21天逐渐降至正常皮肤组织的含量水平;创伤后第3～21天,大鼠创伤组织中羟脯氨酸的含量,在盐酸塔斯品碱组明显高于模型组(P＜0.05或P＜0.01),创伤后第14天羟脯氨酸的含量达到峰值,第21天接近正常皮肤组织的含量水平.组织形态学结果显示:在大鼠创伤组织修复早期,盐酸塔斯品碱能够促进新生毛细血管的形成.结论:盐酸塔斯品碱具有促进大鼠皮肤创伤愈合的作用,其作用机制可能与促进肉芽组织中新生毛细血管的生成以及蛋白质和胶原的合成有关.