益气强心饮对慢性心衰大鼠心肌细胞凋亡及Bax、Bcl-2基因蛋白表达影响的实验研究

[目的]本实验旨在通过动物实验观测中药益气强心饮对慢性心衰大鼠心肌细胞凋亡及Bax、Bcl-2基因蛋白表达的影响。[方法]采用腹主动脉缩窄法结合皮质激素造模法建立慢性心衰阳虚水泛证大鼠模型,随机分为模型组、西药对照组、中药对照组、中药低剂量组、中药中剂量组、中药高剂量组、假手术组,用药8周后,观察各组大鼠的心肌细胞凋亡及Bax、Bcl-2基因蛋白表达。[结果]益气强心饮能明显下调慢性心衰大鼠心肌组织Bax基因蛋白表达、上调Bcl-2基因蛋白表达,疗效等同西药对照组。[结论]益气强心饮可调控慢性心衰大鼠的心肌细胞凋亡,具有治疗及延缓心衰发展等作用。     

滋阴益气、息风活血通络法对糖尿病大鼠坐骨神经雪旺细胞凋亡影响的实验研究

目的 观察滋阴益气、息风活血通络法对糖尿病大鼠坐骨神经雪旺细胞凋亡的影响.方法 将60只SD雄性大鼠随机分为正常组、模型组、西药组、中药(降糖舒络方)高、中、低剂量组,采用STZ腹腔注射,建立糖尿病大鼠模型.以实验大鼠精化血红蛋白、血清胰岛素、坐骨神经雪旺细胞凋亡及介导细胞凋亡的caspase-3和调控细胞凋亡的基因蛋白Bcl-2、Bax的表达为观察指标,以达美康加弥可保为对照进行观察.结果 模型组大鼠坐骨神经雪旺细胞凋亡、caspase-3、Bax基因蛋白表达较正常组明显增强,Bcl-2明显下降.中药组和西药组对雪旺细胞凋亡、caspase-3、Bax和Bcl-2基因蛋白的影响与模型组相比均有显著差异;中药中剂量组和大剂量组对雪旺细胞凋亡、caspase-3、Bax和Bcl-2的影响优于西药组.中药组间比较以大剂量组疗效为佳.结论 滋阴益气、息风活血通络法可以改善糖尿病大鼠血清胰岛素水平,降低糖化血红蛋白水平,抑制雪旺细胞凋亡.其作用机制与抑制caspase-3活性和Bax蛋白表达及促进Bcl-2蚩白表达有关,并且对各观察指标的影响基本呈剂量依赖性.     

补肾活血丹对脑梗塞大鼠神经细胞凋亡的影响

目的：研究脑梗塞模型大鼠海马、皮质凋亡相关基因bcl-2、hax及Bax、Bel-2蛋白表达，探讨补肾活血丹对上述基因及蛋白表达的影响。方法：应用流式细胞仪测定模型小鼠细胞群中细胞凋亡基因bcl-2、bax的比例和Bax、Bel-2蛋白含量。结果：补肾活血丹高、中、低3个剂量组和尼莫地平组均可见海马区及皮层区bel-2免疫表达增强明显，而bax的免疫表达则与用药剂量及区域有关，其高剂量组可显著降低海马区和皮层区bax的表达，中剂量组和尼莫地平组仅降低皮层区bax的表达。模型组小鼠海马、皮质Bax、Bcl-2蛋白含量较正常对照组明显升高；Bcl-2蛋白水平在补肾活血丹高、中、低3个剂量组和尼莫地平组均有显著下调；Bax蛋白水平除补肾活血丹低剂量组外，其余组都有显著下调。结论：脑梗塞与神经细胞凋亡有关，补肾活血丹可能有一定的治疗作用。     

川芎嗪注射液对高眼压大鼠视网膜Bcl-2、Bax蛋白表达和视网膜神经节细胞凋亡的影响

目的观察川芎嗪注射液对高眼压大鼠模型视网膜Bcl-2、Bax蛋白表达和视网膜神经节细胞凋亡的影响并探讨其机制。方法应用前房注射羟丙基甲基纤维素的方法建立高眼压大鼠模型,随机分为模型组、川芎嗪组,并设立空白对照组,每组10只。造模成功3 d后开始给药,川芎嗪组给予盐酸川芎嗪注射液7.2 mg/kg腹腔注射。模型组和空白对照组每天用等体积的0.9%氯化钠注射液腹腔注射。每日1次,共2周。观察川芎嗪注射液对高眼压模型大鼠Bcl-2、Bax蛋白表达和视网膜神经节细胞凋亡的影响。结果川芎嗪组视网膜Bcl-2蛋白的表达增高,与模型组和空白对照组比较其间差别有统计学意义(P0.01);川芎嗪组视网膜Bax蛋白的表达低于模型组,两组间的差异有统计学意义(P0.01)。川芎嗪组的Bcl-2/Bax比值最高,与模型组和空白对照组比较其间差别有统计学意义(P0.01)。川芎嗪组视网膜神经节细胞凋亡指数低于模型组,两组间的差异有统计学意义(P0.01)。结论川芎嗪注射液能够减少高眼压大鼠模型视网膜神经节细胞的凋亡,其机制可能是通过升高视网膜Bcl-2蛋白的表达、降低Bax蛋白的表达、改变Bcl-2/Bax的比值而实现的。     

补肾开窍祛痰方对缺氧缺血性脑损伤新生大鼠海马神经元凋亡基因Bcl-2、Bax及Bcl-2/Bax比例变化的影响

目的观察补肾开窍祛痰方对缺氧缺血性脑损伤新生大鼠海马CA1区神经元凋亡基因Bcl-2、Bax表达及Bcl-2/Bax比例变化的影响。方法结扎并剪断左侧颈总动脉后缺氧1小时制作缺氧缺血性脑损伤新生大鼠模型,随机分组后药物干预6天。检测海马CA1区神经元凋亡基因Bcl-2和Bax蛋白表达水平,计算Bcl-2/Bax比例。结果 (1)Bcl-2阳性表达的比较:与模型组相比,正常组、假手术组、中药大、中、小剂量组Bcl-2的表达均明显增高(P0.05),平均光密度值低剂量组中剂量组高剂量组,差异有统计学意义(P0.05)。(2)Bax阳性表达的比较:与模型组较,正常组、假手术组、中药大、中、小剂量组Bax的表达均明显降低(P0.05);(3)Bcl-2/Bax比例结果:与模型组相比,正常组、假手术组、中药大、中、小剂量组Bcl-2/Bax比例均升高。结论补肾开窍祛痰方药可促进缺氧缺血性脑损伤新生大鼠脑组织Bcl-2蛋白的表达,抑制Bax蛋白的表达,升高Bcl-2/Bax比例,抑制神经细胞凋亡,这可能是其治疗缺氧缺血性脑损伤的作用机制之一。     

补肾活血方对免疫性卵巢早衰小鼠卵泡凋亡调控基因（Bcl-2/Bax）蛋白的影响

目的：研究补肾活血方对卵巢早衰（POF）小鼠卵泡凋亡调控相关基因的表达,为临床中医药预防和治疗卵巢早衰提供思路。方法：以小鼠透明带3为抗原,皮下多点注射免疫BALB/c雌性小鼠建立免疫性POF模型。以补肾活血方低、中、高剂量进行治疗,设倍美力为对照,免疫组化SABC法检测卵泡凋亡调控基因（Bcl-2/Bax）蛋白表达变化。结果：Bcl-2蛋白质表达空白对照组、补肾活血方各剂量组、倍美力组明显高于模型组（P〈0.05）,Bax蛋白质表达空白对照组、补肾活血方各剂量组、倍美力组均明显低于模型组（P〈0.05）。结论：补肾活血方可能通过影响凋亡调控基因（Bcl-2/Bax）蛋白表达变化,调节免疫反应,抑制抗体聚集,阻抑卵泡异常凋亡,从而改善卵巢功能。     

茯苓杏仁甘草汤合橘枳姜汤对急性心肌缺血大鼠心肌细胞凋亡的影响

目的:探讨茯苓杏仁甘草汤合橘枳姜汤对急性心肌缺血大鼠心肌细胞凋亡的影响。方法:SD大鼠50只,随机分为正常对照组、急性心肌缺血模型组、中药低剂量组、中药高剂量组及欣康组,每组10只。采用异丙肾上腺素腹腔注射制备大鼠急性心肌缺血模型。分别采用DNA-末端标记法及免疫组化法观察心肌细胞凋亡及凋亡相关基因Bax、Bcl-2蛋白的表达。结果:与空白组比较,模型组细胞凋亡数量、Bax及Bcl-2蛋白表达明显增多(P0.01);与模型组比较,各药物组细胞凋亡数量及Bax蛋白表达均明显减少(P0.05),Bcl-2蛋白表达明显增多(P0.05);其中中药高剂量组抑制细胞凋亡作用明显,与中药低剂量组及欣康组差异具有统计学意义(P0.05),中药低剂量组与欣康组差异无统计学意义(P0.05)。结论:茯苓杏仁甘草汤合橘枳姜汤能通过上调Bcl-2蛋白和下调Bax蛋白的表达,降低细胞凋亡率,达到抑制心肌细胞凋亡的目,从而起到抗心肌缺血的作用。     

补肾活血中药对大鼠慢性高眼压模型多焦视网膜电图的影响

目的：观察补肾活血中药对大鼠慢性高眼压（elevated intraocular pressure，EIOp）模型视功能损害的干预作用。方法：采用烙闭上巩膜静脉的方法诱导产生慢性EIOP大鼠模型，将52只SD大鼠随机分为补肾活血高、中、低剂量组、模型组、空白组。连续灌胃8周，于8周末进行多焦视网膜电图（mulfifocal electroretinogram，mfERG）检测。结果：通过对大鼠mfERG-阶函数核（first older kernel，FOK）的观察发现，补肾活血中药有助于总波及1、2、3、4环P1波反应密度、总波P1波峰潜时、2环及3环N1波反应密度，3环、4环N1波峰潜时的恢复。结论：补肾活血中药可以改善大鼠慢性EIOP模型的视功能，有助于mfERG反应密度和波峰潜时的恢复。     

燧心胶囊对慢性心力衰竭大鼠凋亡相关基因Bcl-2和Bax表达的影响

目的:以慢性心力衰竭大鼠为研究对象,测定心肌组织Bcl-2、Bax mRNA水平及其蛋白表达,以探究燧心胶囊干预心室重塑的作用机制。方法:将60只大鼠随机分为假手术组、模型对照组、地高辛组、卡托普利组、燧心胶囊低剂量组、燧心胶囊高剂量组。采用腹主动脉缩窄术建立大鼠慢性心力衰竭模型,连续给药12周。Real time PCR检测心肌细胞凋亡基因Bcl-2 mRNA、Bax mRNA水平;免疫组化法观察大鼠心肌细胞凋亡蛋白Bcl-2、Bax的表达。结果:与模型对照组比较,卡托普利组、燧心胶囊低、高剂量组大鼠Bcl-2 mRNA水平及其蛋白表达增高,Bax mRNA水平及其蛋白表达降低,Bcl-2/Bax则显著性增高,差异具有统计学意义(P0.05或P0.01)。其中燧心胶囊高剂量组对Bcl-2和Bax mRNA及其蛋白的调控程度较低剂量组显著(P0.05)。结论:高剂量燧心胶囊能够调控凋亡基因Bcl-2和Bax mRNA水平及其蛋白表达,抑制心肌细胞程序性死亡,延缓心力衰竭的进程。     

黄芪注射液对重症肺炎大鼠胸腺细胞凋亡相关蛋白表达的影响

目的:探讨黄芪注射液对重症肺炎大鼠胸腺细胞凋亡相关蛋白表达的影响。方法:将40只Sprague-Dawley(SD)大鼠随机分为对照组、模型组、黄芪高剂量组、黄芪中剂量组和黄芪低剂量组,每组8只。采用气管穿刺注入感染法制作大鼠重症肺炎模型。分别采用原位末端转移酶标记法(Terminal deoxynucleotidyl transfer-ase dUTP nick end labeling,TUNEL)检测各组大鼠胸腺细胞凋亡及Western blot检测凋亡相关蛋白cleaved caspase-3、Bcl-2和Bax的表达。结果:与对照组比较,模型组和黄芪治疗各组胸腺细胞凋亡增加,凋亡相关蛋白cleaved caspase-3和Bax表达增强,除黄芪高剂量组外Bcl-2表达均减弱,Bcl-2/Bax比值降低(P<0.05);与模型组比较,黄芪高剂量组胸腺细胞凋亡减轻,Bcl-2表达增强,cleaved caspase-3和Bax表达减弱(P<0.05),Bcl-2/Bax比值增加。结论:黄芪注射液能减轻重症肺炎时胸腺细胞凋亡,其机制与促进Bcl-2表达,减轻Bax表达,增加Bcl-2/Bax比值有关。     

肺复康合剂对肺纤维化大鼠血清变化的影响

目的观察肺复康合剂对肺纤维化大鼠血清的影响。方法选择Wistar大白鼠随机分为正常组、模型组、中药Ⅰ组、中药Ⅱ组、西药组，除正常组外，其余四组均复制肺纤维化动物模型；模型组用生理盐水灌胃，中药Ⅰ、Ⅱ组分别用高、低剂量肺复康合剂灌胃，西药组用强的松灌胃；各组分别检测血清相关指标。结果模型组大鼠血清透明质酸（HA）、层粘连蛋白（LN）和Ⅳ型胶原（CⅣ）显著高于正常组，各治疗组均显著低于模型组，中药Ⅰ、Ⅱ两组CIV显著低于西药组。结论肺复康合剂可抑制成纤维细胞活化和增殖，减少胶原纤维及非胶原糖蛋白的合成和分泌，阻抑肺纤维化的发展。     

加减补肺汤对COPD“肺气虚证”大鼠血浆SOD活性、MDA含量的影响

[目的]采用动物实验方法,旨在对加减补肺汤治疗慢性阻塞性肺疾病(COPD)"肺气虚证"的作用机制进行研究。[方法]采用烟熏复合木瓜蛋白酶雾化吸入法复制SD大鼠COPD"肺气虚证"模型。给予加减补肺汤高低剂量及桂龙咳喘宁治疗,观察各组大鼠:一般情况、症状体征、支气管及肺组织病理改变,大鼠血浆SOD、MDA含量的变化。[结果]加减补肺汤可以改善COPD"肺气虚证"大鼠全身及呼吸系统症状;能显著改善COPD大鼠支气管、肺组织损伤程度,对组织具有明显的保护作用。与模型组相比,药物治疗的各组血浆SOD活力均明显升高(P<0.05),MDA含量均明显降低(P<0.05)。加减补肺汤高、低剂量组均较桂龙组血浆SOD活力偏高(P<0.05),而MDA含量均较之偏低(P<0.05)。[结论]加减补肺汤在一定程度上有保护气道黏膜,减轻肺损伤的作用。可以显著提高血浆SOD活力,降低MDA含量,具有清除自由基及抗脂质过氧化作用。     

复方水蛭胶囊对实验性高脂血症大鼠的防治研究

目的：观察复方水蛭胶囊对高脂血症大鼠血脂的调节作用。方法：将60只大鼠随机分为6组(除空白组外，其余5组均饲高脂饲料)，即空白组、模型组、阳性药对照组及复方水蛭胶囊高、中、低剂量组，观察28d。结果：用药各组均有明显降低TC、TG、LDL-C及升高HDL-C作用，以复方水蛭胶囊高剂量组为优。结论：复方水蛭胶囊有较好的调节血脂作用。     

养肝熄风方药对帕金森病模型大鼠神经行为的影响

目的：探讨养肝熄风方药对帕金森病（Parkison′s disease,PD)模型大鼠神经行为的影响。方法：运用6-羟基多巴胺（6-OHDA）损毁大鼠中脑黑质致密部（SNc）和腹侧被盖区（VTA）两区多巴胺能神经元，造成PD模型；观察养肝熄风水煎醇提液对该模型阿朴吗啡（apomorphine）诱发旋转实验和阶梯实验的影响。结果：阿朴吗啡诱发旋转实验表明：养肝熄风方药可以降低PD大鼠阿朴吗啡诱发的旋转行为。阶梯实验表明：治疗前PD大鼠比对照组大鼠摄食的食物颗粒数明显减少。治疗后治疗组大鼠摄食的食物颗粒比模型组增多（P<0.05）。结论：养肝熄风方药能够改善PD大鼠的神经行为。     

葛根素与葡萄糖耐量因子分子水平配伍对肥胖大鼠体质量及血脂的影响

目的:中药葛根提取物葛根素与葡萄糖耐量因子(GTF)均参与并调节糖代谢和脂代谢,本实验旨在观察葛根素与GTF分子水平络合物对饮食诱导肥胖大鼠的影响。方法:将肥胖模型大鼠按体质量随机分为5组,每组12只。分为肥胖模型组、阳性药组、葛根素+GTF小、中、大剂量组,另设正常对照组。同时给药4周,测定每周体质量及血脂水平。结果:给予葛根素与GTF分子水平络合物4周后,肥胖大鼠的体质量增长减慢,甘油三酯、总胆固醇水平降低,高密度脂蛋白水平升高,与肥胖模型组比较有差异(P<0.05)。结论:中药葛根提取物葛根素与GTF分子水平配伍后可缓解肥胖大鼠的体质量增长,降低血脂水平。     

补肾益气活血方对宫内生长迟缓胎鼠肝脏C-Jun和C-Fos表达的影响

目的:探讨补肾益气活血方对胎儿宫内生长迟缓(intrauterine growth retardation,IUGR)胎鼠肝脏 C-Jun 和 C-Fos 表达的影响。方法:利用被动吸烟法建立 IUGR 大鼠模型,将动物分成正常组、IUGR 组、IUGR 中药治疗组(中药组)、IUGR 左旋精氨酸治疗组(精氨酸组),采用 Western-blot 方法检测各组肝脏 C-Jun 和 C-Fos 蛋白表达水平。结果:正常组胎鼠肝脏 C-Jun 有一定量表达,C-Fos 有少量表达;IUGR 组 C-Jun与 C-Fos 表达较正常组明显增强(P<0.05);中药组和精氨酸组 C-Jun 和 C-Fos 表达水平较 IUGR 组明显降低(P<0.05),且与正常组比较差异无显著性(P>0.05)。结论:IUGR 的发生与 C-Jun 和 C-Fos 表达改变有关,中药补肾益气活血方可能通过影响 C-Jun 和 C-Fos 表达而调节其他相关基因转录从而防治 IUGR。     

赤芍总苷对培养乳鼠心肌细胞损伤后细胞凋亡的影响

目的：通过建立心肌损伤模型探讨赤芍总苷对培养乳鼠心肌细胞损伤后细胞凋亡的影响。方法：以异丙基肾上腺素加入培养乳鼠心肌细胞造成缺血缺氧损伤模型，对比分析正常组、不同剂量赤芍总苷组和辅酶Q10阳性对照组的细胞形态学以及心肌细胞凋亡等角度探讨赤芍总苷对损伤心肌细胞保护作用的机理及其有效剂量，为中药有效成分治疗心血管疾病提供实验及理论依据。结果：损伤组细胞搏动加速，存活率下降，显示出明显的DNA凋亡特征；而辅酶Q10组和赤芍总苷组上述指标都有不同程度的改善，其中高剂量赤芍总苷组的保护作用优于阳性对照组。结论：赤芍总苷对异丙基肾上腺素造成的心肌损伤具有保护作用，并且呈现剂量依赖关系，作用机理与改善心肌缺血缺氧状态，维持细胞正常的能量代谢和收缩功能，抑制细胞凋亡有关。     

三七对恒河猴子宫内膜t-pA及PAI-1mRNA表达的影响

目的:探讨t-pA及PAI-1在炎性子宫出血中的作用及三七复合有效成分的影响.方法:选择月经正常雌性育龄恒河猴,随机分为中药组(三七复合有效成分)、模型组及正常对照组.运用原位杂交法检测细菌感染性子宫出血模型组、三七复合有效成分中药组及正常对照组恒河猴子宫内膜组织中PAI-1mRNA的表达;运用发色底物法检测三组内膜组织中t-pA的活性.结果:三七复合有效成分组子宫内膜间质、子宫血管内皮细胞及平滑肌细胞胞浆中PAI-1mRNA的表达明显高于模型组,差异有显著性(P＜0.05),与正常组相比没有差别(P＞0.05);三七复合有效成分组与模型组比较,t-pA活性明显降低,与正常组比较无显著性差别(P＞0.05).结论:炎症因素导致的子宫出血与t-pA活性增高有关,三七复合有效成分减少炎性子宫出血的作用可能与其调节子宫内膜局部t-pA和PAI-1的平衡有关.     

补肾、健脾、活血法对糖皮质激素诱导骨质疏松症大鼠骨密度、骨骼肌肌钙蛋白影响的比较研究

目的:观察中医不同治法对糖皮质激素诱导骨质疏松症大鼠骨密度、肌钙蛋白的影响,探讨中医防治骨质疏松症的作用机制。方法:将120只雌雄各半的大鼠随机分为正常对照组、模型对照组、补肾中药组、健脾中药组、活血化瘀中药组和骨疏康中药组6个组。用地塞米松肌注造模。实验结束后,腹主动脉取血处死大鼠,用酶联免疫法测定大鼠骨骼肌肌钙蛋白,用双能X线骨密度仪对大鼠离体股骨上1/3骨密度。结果:①与正常组比较,模空组大鼠离体股骨上1/3骨密度显著降低(P<0.01);与模空组比较,各治疗组大鼠股骨上1/3骨密度均有不同程度的升高,其中以补肾中药组升高程度最为显著(P<0.01),其余各治疗组骨密度较模空组升高程度比较无统计学意义。②与正常组比较,其他各组大鼠骨骼肌的肌钙蛋白显著降低(P<0.01);与模空组比较,补肾组大鼠骨骼肌的肌钙蛋白均明显升高(P<0.01);补肾组大鼠骨骼肌的肌钙蛋白升高最为明显,明显高于其他各组,具有显著性差异(P<0.01);活血组大鼠骨骼肌的肌钙蛋白升高程度最低,与正常组、补肾组比较具有显著统计学差异(P<0.01),与模空组、健脾组比较具有统计学意义(P<0.05);健脾组和骨疏康组升高程度也比较明显,但二者比较无统计学意义。结论:补肾、健脾方法对骨质疏松症大鼠的骨密度和肌钙蛋白具有一定调节作用。