增殖细胞核抗原在各级胃粘膜病变中的表达

目的：探讨增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）在不同胃粘膜病变中的表达状况。方法：采用免疫组化ＡＢＣ法，检测１３５例不同胃粘膜病变组织和１５例正常胃粘膜，增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）的表达，并对其进行定量分析。结果：ＰＣＮＡ免疫阳性细胞数随病变发展呈上升趋势，其定量分析数据除浅表性胃炎与正常胃粘膜无明显差异外，其余各组间差异显著（Ｐ＜００５），癌组织中，ＰＣＮＡ表达变化与胃癌生物学行为密切相关。结论：ＰＣＮＡ不仅反映细胞增生状况，而且对胃粘膜病变监测和胃癌患者预后判断具有指导意义。     

胃粘膜细胞线粒体DNA核内整合及其与幽门螺杆菌感染的关系

目的 探讨胃粘膜细胞核内mtDNA整合与幽门螺杆菌（Hp)感染的关系。方法 采用PCR、免疫组化和Giemsa染色法检测Hp;采用原位杂交方法对胃粘膜细胞核内mtDNA序列进行检测。结果 胃癌细胞核内mtDNA序列的检出率为20％、癌旁粘膜为16．7％、异性增生为20％、肠上皮化生粘膜为10％、萎缩性胃炎为10％,浅表性胃炎未发现有mtDNA序列整合。胃粘膜细胞核内mtDNA序列的检出率在Hp^ 组为21．1％显著高于Hp^-组（5．3％）;在cagA^ Hp感染组（24．4％）显著高于cagA^-Hp感染组（7．4％）。结论 ①胃粘膜细胞mtDNA序列核内整合可能参与了胃癌的发生;②胃粘膜mtDNA序列整合可能与Hp感染有关。     

HCaRG在人体胃癌组织中的表达

目的研究HCaRG在胃癌中的表达,探索胃癌发生的可能机制。方法采用荧光定量PCR及免疫组化技术检测16例胃癌及15例正常胃粘膜组织中HCaRG的表达情况。结果胃癌组织中HCaRG mRNA明显低于正常胃粘膜组织（P〈0．05）者;免疫组化结果显示HCaRG蛋白在正常胃粘膜上皮细胞及间质细胞中明显表达,细胞核与细胞浆均有表达,而胃癌组织中无明显HCaRG蛋白表达。结论胃癌组织中HCaRG表达下调,HCaRG基因可能在胃癌的发生发展过程中表达缺失。     

红毛五加多糖对体外人胃癌细胞的抑制作用

目的 研究红毛五加多糖对人胃癌细胞、人胚腱细胞及正常人外周血淋巴细胞的选择性抑制作用特点。方法 采用细胞形态学方法和ＭＴＴ法。结果 该多糖选择性地抑制了胃癌细胞的活性和功能状态，而对人胚腱细胞影响甚微，对正常人外周血淋巴细胞无影响。结论 多糖选择性地抑制了人胃癌细胞，用于肿瘤的防治可能较为安全。     

胃粘膜线粒体DNA核内整合与IL-8活性的关系

目的 评价胃粘膜线粒体DNA核内整合与组织IL—8活性的关系。方法 采用原位杂交方法检测线粒体DNA核内整合；组织IL—8含量到定采用ELISA方法。结果 胃癌细胞核内mtDNA序列的检出率为20％(6／30)、异性增生为10％(1／10)、肠上皮化生粘膜为6．7％(1／15)、萎缩性胃炎为10％(1／10)，浅表性胃炎未发现有mtDNA序列整合。胃粘膜细胞IL—8活性在mtDNA序列的检出组显著高于mtDNA序列非检出组(P＜0．05)。结论 胃粘膜细胞mtDNA序列整合可能参与了胃癌的发生；胃粘膜细胞mtDNA序列核内整合可能与IL—8活性有关。     

Smad4蛋白在胃癌组织中表达的研究

目的 了解Smad4蛋白在胃癌组织中的表达情况及其意义。方法 应用免疫组织化学方法,对10例正常胃粘膜组织和61例胃癌组织（高中分化 腺癌22例,低分化腺癌29例,粘液腺瘤3例,印戒细胞癌7例）中的Smad4的表达进行检测。结果 在正常胃粘膜组织,Smad4蛋白主要存在于腺体体底部细胞胞浆中。在胃癌组织,Smad4表达于胞浆及少量细胞核中,它在低分化胃癌组织中的表达明显减少（与正常胃粘膜和高分化腺癌相比,P＜0．01,P＜0．05）,而且分化越差的胃癌组织,其表达减少。提示在胃癌发生、发展中起了重要作用。结论 Smad4在低分化胃癌组织中表达明显减少,可能在胃癌的发生发展过程中起了一定作用。     

NF-κB途径在舒林酸促人胃癌SGC-7901细胞凋亡中的作用

目的探讨核因子κB（NF-κB）途径在舒林酸促人胃癌SGC-7901细胞凋亡中的作用。方法体外培养人胃癌SGC-7901细胞,舒林酸（0.1、0.3、0.6、1.2、2.4 mmol/L）作用后,苏木精-伊红染色、电镜观察药物作用后细胞形态学变化,免疫组化、Western-blot方法检测药物对人胃癌SGC-7901细胞核因子κB（NF-κB）、bcl-2、bax蛋白表达的影响。结果苏木精-伊红染色检测结果显示舒林酸抑制肿瘤细胞生长,肿瘤细胞出现核固缩、核碎裂、染色质边集等凋亡及坏死的形态学表现;电镜下可看到染色质边集、凋亡小体;免疫组化、West-ern-blot结果显示舒林酸作用48 h后人胃癌SGC-7901细胞NF-κB、bcl-2表达逐渐下降,bax表达逐渐上升,具有剂量依赖性。NF-κB与bcl-2蛋白表达率之间具有相关性（r=0.846 5,P〈0.01）。结论舒林酸可以促进人胃癌SGC-7901细胞凋亡,NF-κB途径在舒林酸促进胃癌SGC-7901细胞凋亡中发挥部分作用。     

免疫组化与粘液组化套染技术的应用

建立免疫组化与粘液组化套染技术，同步显示细胞核抗原与粘液成份，研究胃粘膜肠上皮化生与胃癌的关系。结果显示ＰＣＮＡ和Ｐ５３阳性均定位于细胞核内，杯状细胞胞浆中硫酸化粘液物质呈蓝色。４６例胃腺癌癌旁组织中，２７例含硫酸化粘液肠化生上皮细胞的ＰＣＮＡ阳性率（６６．７％）显著高于无硫酸化粘液的肠化生细胞（３１．６％）。２１例Ｐ５３阳性的胃癌中癌旁组织含硫酸化粘液肠化生的伴随着率高于Ｐ５３阴性胃癌。实验结果     

胃癌及癌前病变细胞的凋亡与增殖

目的 了解胃癌及癌前病变中细胞凋亡和增殖状态的变化,探讨其在胃癌发生中的作用。方法 采用脱氧核糖核酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记（TUNEL）技术和增殖细胞核抗原（PCNA）免疫组织化学染色法观察58例胃癌、27例癌前病变和15例正常胃粘膜组织中细胞凋亡和增殖状态。结果 胃癌组织中细胞凋亡指数显著低于胃正常粘膜和胃癌前病变组织（2．8％,6．3％,12％,P＜0．05）;胃癌前病变细胞凋亡指数明显上升,显著高于正常胃粘膜（P＜0．05）;在正常胃粘膜、癌前病变及胃癌组织中凋亡／增殖比率呈递减趋势而细胞增殖指数则呈递增趋势（P＜0．05）;细胞凋亡指数与肿瘤组织类型、分化程度、浸润深度和转移状况无关（P＞0．05）,细胞增殖指数与肿瘤浸润深度和转移状况无关（P＜0．05）。结论 细胞凋亡和增殖的失衡可能是胃粘膜组织恶性转化的重要因素之一。     

血管加压素对大鼠胃粘膜影响的超微结构观察

目的：观察体内血管加压素增高后大鼠胃粘膜的超微结构变化。方法：实验组静脉注射垂体后叶素，对照组静脉注射０．９％氯化钠溶液，第４日取胃体标本，电镜观察。结果：实验组大鼠胃粘膜的主细胞核染色质增多，染色加深。粗面内质网异常发达，酶原颗粒增多。壁细胞线粒体出现大批皱缩，线粒体基质染色加深，线粒体嵴分辨不清。分泌小管结构不良，而且找不到微绒毛。为细胞缺血、坏死的早期改变。结论：血管加压素增高可能导致应激性溃疡的发生     

Ku70与hTERT在胃癌组织中的表达及其意义

目的探讨Ku70和人端粒酶逆转录酶(h TERT)蛋白表达与胃癌发生发展的关系及两者之间的联系。方法应用免疫组织化学方法检测Ku70和h TERT蛋白在10例正常胃黏膜、15例胃癌前病变黏膜和20例胃癌组织中的表达。结果 Ku70蛋白阳性表达定位于正常胃黏膜和胃癌组织的细胞核,胃癌前病变黏膜的细胞浆,其阳性表达率分别为90%、100%和80%;h TERT蛋白在正常胃黏膜几乎不表达,在胃癌前病变黏膜和胃癌组织中均定位于细胞浆,其阳性表达率分别为30%、100%和100%。胃癌组织中Ku70和h TERT蛋白的表达强度明显高于正常胃黏膜和胃癌前病变黏膜。Ku70和h TERT蛋白的表达显著相关。结论 Ku70和h TERT蛋白可能与胃癌的发生发展过程相关。     

桦褐孔菌提取物对人胃癌BGC-823细胞株的抑制增殖及诱导凋亡作用

[目的]观察桦褐孔菌提取物对人胃癌BGC-823细胞株的抑制增殖及诱导凋亡作用.[方法]选用人胃癌细胞株BGC-823进行体外培养,用MTT法测定桦褐孔菌提取物对BGC-823细胞株的增殖抑制率,应用倒置显微镜、HE染色光学显微镜、AO/EB双染色荧光显微镜及透射电子显微镜等仪器观察桦褐孔菌提取物对肿瘤细胞形态结构的影响.[结果]10,20,40,80 mg/L桦褐孔菌提取物对胃癌BGC-823细胞株有抑制增殖作用,且表现出浓度依赖关系.HE染色在光学显微镜下可见桦褐孔菌组肿瘤细胞体积变小、变圆,核染色质浓缩或形成块,部分细胞膜形成凋亡小体;在倒置显微镜下可见桦褐孔菌组肿瘤细胞体积变小、变圆,核染色质凝集,细胞间连接疏松,贴壁能力明显减弱;在AO/EB双染色荧光显微镜下可见桦褐孔菌组肿瘤细胞胞核染色质呈橘红色,胞质内的橘红色或橘黄色荧光消失,细胞周围有呈亮绿色的荧光凋亡小体;在透射电子显微镜下可见80 mg/L桦褐孔菌提取物组肿瘤细胞核染色质固缩边集,胞质内可见有空泡,凋亡小体凸出于细胞表面.[结论]桦褐孔菌提取物可抑制人胃癌BGC-823细胞株的增殖,诱导肿瘤细胞凋亡.     

Histological Effect of Certain Pickles on the Human Gastric Mucos: A Preliminary Report

The histological effects of several types of pickles and control substances were assessed by repeated suction (per os) biopsies of the gastric antrum in three healthy men. The ingestion of 30 ounces of fukujinzuke (assorted vegetables pickled in soy sauce) or of vinegared gherkins over a three-day period caused marked changes in the surface epithelium and gastric pits in all three subjects. The abnormalities consisted of loss of cellular mucus, nuclear enlargement, prominent nuclear chromatin and an increased number of mitotic figures. All control biopsies were normal, as were biopsies after the ingestion of 30 ounces of raw carrots or cucumbers over a three-day period. This study shows that eating a sufficient quantity of certain types of pickles causes marked changes in the human stomach. Peroral suction biopsy of the gastric antrum appears to be a practical method for testing the effect of various foods on the human gastric mucosa.     

大鼠实验性胃癌的凝集素亲合组织化学研究

本文应用花生凝集素(PNA)对17例正常大鼠胃粘膜以及MNNG诱发的22例大鼠腺胃胃癌和14例异型增生胃粘膜进行了亲合组织化学研究。正常大鼠胃粘膜表面上皮不结合PNA;胃底腺PNA结合阳性率为89.6％;幽门腺PNA结合阳性率是17.6％,弥漫分布于腺上皮胞浆内;从界嵴循胃底腺至胃窦幽门腺的顺序观察,PNA结合反应显示逐渐减弱趋势;胃底腺颈、体和底部细胞的PNA结合反应也显示逐渐减弱,大鼠腺胃幽门部胃癌及异型增生腺体的PNA阳性率比正常胃粘膜的相应部位高,PNA结合反应主要沿癌变腺体的腔膜面分布或定位子细胞核上区。本实验结果表明大鼠正常胃粘膜PNA受体的分布具有一定的规律性,大鼠实验性胃癌模型表现有人类胃癌相似的病理生物学特征。     

COX-2在人胃癌中的表达及与胃癌临床病理特征的关系

目的 探讨环氧合酶-2(COX-2)在胃癌组织中的表达及与胃癌临床病理特征之间的关系.方法 应用免疫组织化学方法检测 43 例胃癌组织和40 例正常胃黏膜中 COX-2的表达,对胃癌中COX-2的表达与胃癌临床病理特征之间的关系进行分析.结果 胃癌组织中COX-2蛋白阳性表达率为76.74%(33/43),正常胃黏膜COX-2蛋白阳性表达率为22.50%(9/40),胃癌组织的COX-2蛋白的表达水平显著高于正常胃黏膜.胃癌中COX-2蛋白表达与患者年龄、性别、肿瘤大小、肿瘤部位及肿瘤的组织学类型无关,与病变的浸润深度、淋巴结转移及远处转移有关.结论 COX-2蛋白的表达与胃癌相关,可作为反映胃癌侵袭转移的生物学指标.     

胃癌患者CD44v6 mRNA的表达

目的探讨CD44v6在胃癌发展、转移中的作用.方法采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测64例胃癌患者胃癌及其正常胃黏膜CD44v6 mRNA表达.结果胃癌患者胃的正常黏膜有少量CD44v6 mRNA表达;胃癌组织CD44v6 mRNA的表达阳性率高于其正常黏膜.胃癌组织CD44v6mRNA表达阳性率在淋巴结转移患者(75.56%)高于无淋巴结转移者(36.84%),有远处转移者(92.86%)高于无远处转移组(41.87%),患者性别、肿瘤长径＜5cm与≥5cm、肿瘤发生部位、大体类型、组织类型、组织学分化程度、浸润深度和TNM分期与CD44v6表达阳性率无关.结论胃的正常黏膜有少量CD44v6表达,胃癌组织CD44v6表达明显增多,CD44v6表达较多提示淋巴结转移和远处转移的可能.     

幽门螺杆菌对胃癌细胞RhoA表达和活性的影响

目的: 研究幽门螺杆菌(Helicobacter pylori, Hp)对胃癌细胞中的RhoA的表达和活性的影响,探讨Hp与胃癌之间的相互关系.方法: Hp由人胃黏膜组织中分离,固体培养,收获后用超声波方法裂解Hp,以裂解液刺激胃癌细胞SGC-7901,用pull-down 方法来获得细胞裂解液中的活性RhoA,用Western blot方法来检测细胞裂解蛋白中的活性RhoA的变化,用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法半定量法测定RhoA mRNA相对量.结果: 用Hp裂解液刺激细胞10 min,总RhoA无明显变化,而活性RhoA升高.结论: Hp裂解液能增加胃癌细胞中活性RhoA的表达,呈剂量-效应关系,但总RhoA无明显变化,它可能是参与胃癌细胞的迁移.     

鹅绒藤中的黄酮苷类诱导肿瘤细胞凋亡的研究

目的观察不同浓度的鹅绒藤中黄酮苷类单体化合物山奈酚-7-O-α-L-鼠李糖苷（Monomer Compounds-Ⅴ,MC-Ⅴ）诱导肿瘤细胞凋亡的形态学变化及其凋亡率的检出。方法用浓度50、100和200μg·mL-1的MC-Ⅴ作用人宫颈癌Hela细胞、人胃癌MGC-803细胞和小鼠淋巴瘤YAC-1细胞48h和72h后,采用细胞凋亡荧光Hoechst33342/PI双染方法,在荧光显微镜下观察肿瘤细胞在加MC-Ⅴ后的形态变化过程,并计算三种肿瘤细胞的凋亡率。结果镜下可见正常对照组细胞质染色均匀,形态规则,呈均匀微弱蓝光;所有MC-Ⅴ作用的肿瘤细胞核固缩,染色质凝集,随着浓度的增加和作用时间的延长,细胞膜损坏加剧;在MC-Ⅴ作用的三种肿瘤细胞中,作用于Hela细胞,染色质边集化,部分染色质裂断;作用于MGC-803细胞,染色质部分高度凝集,核碎裂、边集化严重,呈现不均一的荧光显色结构;作用于YAC-1细胞,细胞核固缩凝集成小团块状结构。三种肿瘤细胞的凋亡率均随MC-Ⅴ浓度的增高及作用时间的延长而增大。结论MC-Ⅴ可以诱导不同的肿瘤细胞显示不同的凋亡形态,并呈时间和剂量依赖性,提示其作用于肿瘤细胞的作用机制不同。     

Y染色体性别决定基因相关的高速泳动蛋白家族9和胃动蛋白1在胃癌中的表达及其与预后的关系

目的 探讨Y染色体性别决定基因相关的高速泳动蛋白家族9(SOX9)和胃动蛋白1(GKN1)在胃癌中的表达及其与患者临床病理特征和预后的关系。方法 采用免疫组织化学染色法检测SOX9和GKN1在70例胃癌组织及相应癌旁组织(27例肠上皮化生和43例正常胃黏膜组织)中的表达情况,分析SOX9和GKN1在胃癌中的表达与患者临床病理因素和预后的关系。结果 SOX9在胃癌组织、肠化生组织和正常胃黏膜组织中的高表达率分别为92.9%(65/70)、77.8%(21/27)和55.8%(24/43),差异有统计学意义(χ ²=21.722,P<0.001)。胞核与胞浆均可见阳性染色。单独观察胞核内染色发现,SOX9在胃癌组织细胞核内的高表达率为67.1%,明显高于肠化生组织的37.0%(P=0.007)和正常胃黏膜组织的23.3%(P<0.001);GKN1的染色定位于胞浆,其在正常胃黏膜中的高表达率为76.7%,明显高于肠化生组织的44.4%(P=0.006)和胃癌组织的37.1%(P<0.001)。胃癌组织中,SOX9在胞核内的表达与组织分化程度相关(P=0.007),而GKN1的表达与组织分化程度(P=0.002)和病理类型是否为印戒细胞癌相关(P=0.009)。SOX9在胃癌组织细胞核内的表达与GKN1的表达呈显著负相关(χ ²=15.424,P<0.001)。70例胃癌患者中,SOX9在胞核内高表达组和低表达组的5年生存率(33.8%比67.5%,P=0.016)及GKN1高表达组和低表达组的5年生存率(60.0%比35.6%,P=0.044)差异均有统计学意义。37例SOX9胞核内高表达且GKN1低表达的胃癌患者5年生存率为28.8%。Cox多因素分析结果显示,TNM分期晚(Ⅱ期:HR=7.435,95%CI:1.313~42.096,P=0.023;Ⅲ期:HR=12.214,95%CI:2.677~55.721,P=0.001)和SOX9在细胞核的高表达(HR=3.297,95%CI:1.199~9.065,P=0.021)是影响胃癌患者预后的独立危险因素。结论 SOX9和GKN1的表达变化可能在胃癌的恶性生物学行为中发挥重要作用。SOX9可能是胃癌患者的潜在预后标志物,联合检测SOX9和GKN1的表达情况并进一步研究其分子作用机制可能为胃癌的早期诊断、靶向治疗以及预后评估提供新思路。