5-FU联合人参黄芪复方对人胃癌MGC-803细胞生物学行为的影响

目的探讨中药人参黄芪复方联合5-氟尿嘧啶（5-Fu）,在体外对人胃癌MGC-803细胞的增殖、克隆、凋亡、迁移等生物学行为的影响。方法采用MTT方法检测细胞的增殖抑制率;并计算其中效浓度;流式细胞仪检测观察细胞的周期及凋亡;Giemsa染色检测细胞的克隆形成;细胞划痕实验检测药物对细胞迁移的抑制作用。结果人参黄芪复方和5-Fu均能抑制人胃癌MGC-803细胞生长,并随着药物浓度的增加而增强,5-Fu联合人参黄芪复方对细胞生长的抑制率明显高于单用人参黄芪复方或5-Fu组（P〈0．05）,并随着浓度的增加而增强;人参黄芪复方和5-Fu均能诱导胃癌细胞凋亡、抑制细胞克隆形成、阻滞细胞于G0／G1期、并抑制细胞迁移,而两药联用时细胞凋亡率、G0／G1期细胞均明显高于两药单用（P〈0．05）,并阻滞细胞于G0／G1期;人参黄芪复方与5-FU联合应用时细胞克隆形成、细胞迁移面积均明显低于两药单用（P〈0．05）,且联合用药的中效浓度小于两药单用时的中效浓度之和。结论人参黄芪复方和5-Fu联合应用与两药单用比较,能更好的抑制人胃癌MGC-803细胞增殖、抑制细胞克隆形成、促进细胞凋亡、阻滞细胞期于G0／G1期,并抑制细胞迁移。     

姜黄素与5-FU联用对胃癌MGC-803细胞的生长抑制与凋亡诱导作用的研究

目的：探索姜黄素与中低剂量化疗药5-氟尿嘧啶（5-FU）联用对胃癌MGC-803细胞生长、细胞凋亡和细胞周期的影响,为临床上应用姜黄素作为胃癌化疗药5-FU的增效剂,以减少5-FU使用剂量、降低其毒副作用提供实验依据。方法：应用MTT检测法检测药物作用对MGC-803细胞的抑制作用;应用基于AO/EB双染的荧光显微观察法和FITC/PI双染的流式细胞技术检测药物作用对MGC-803细胞凋亡的影响;应用基于PI单染的流式细胞技术检测药物作用对MGC-803细胞周期的影响。结果：姜黄素（25 μmol·L^-1）分别与低剂量（2.4 μmol·L^-1）和中剂量（4.8 μmol·L^-1）的5-FU联合作用能有效地抑制MGC-803细胞的生长,诱导细胞凋亡并将细胞周期阻滞在S期,并呈剂量-时间的依赖关系。姜黄素与低剂量5-FU联用组的效果显著优于中剂量（4.8 μmol·L^-1）5-FU单用组（P < 0.01）,而姜黄素与中剂量5-FU联用组的效果显著优于高剂量（9.6 μmol·L^-1）5-FU单用组（P< 0.01）,提示姜黄素能显著增强5-FU抗胃癌MGC-803细胞的作用,并呈剂量-时间的依赖关系。结论：本研究为临床上应用姜黄素作为5-FU治疗胃癌的辅助用药,以减少5-FU的使用剂量,从而降低其毒副作用提供了初步的实验依据。     

夏星汤对人胃癌MGC-803细胞生长抑制作用的研究

目的研究夏星汤对胃癌MGC-803细胞生长的影响。方法采用MTT法、直接观察法观察不同浓度药液及服用不同剂量药物后的大鼠血清对胃癌MGC-803细胞体外增殖的影响。结果在作用24 h、48 h后,≥20 g/L浓度的夏星汤药液对胃癌MGC-803细胞均出现生长抑制现象,抑制作用与给药浓度成正比;药物血清各组均未出现明显生长抑制现象。结论夏星汤药液对胃癌MGC-803细胞生长增殖具有抑制作用,而药物血清无明显抑制作用。     

基于VEGF/PI3K/AKT通路探讨消岩汤联合阿帕替尼抑制胃癌MGC-803细胞增殖的作用机制研究

[目的] 明确消岩汤通过血管内皮生长因子（VEGF）/磷脂酰肌醇3激酶（PI3K）/丝苏氨酸蛋白激酶（AKT）通路治疗胃癌的作用机制。[方法] 通过CCK-8检测消岩汤对MGC-803细胞增殖的影响;通过流式细胞术检测消岩汤对MGC-803细胞凋亡和周期的影响;通过蛋白免疫印迹（Westernblot）检测消岩汤、阿帕替尼及其联合用药作用于MGC-803细胞后VEGF/PI3K/AKT信号通路相关蛋白的表达。[结果] 消岩汤呈剂量依赖性抑制MGC-803细胞的增殖（P<0.05）,其半抑制浓度（IC₅₀）为63.56mg/mL;随着消岩汤浓度的增加,MGC-803细胞的总凋亡率逐渐升高（P<0.05）;随着消岩汤浓度的增加,MGC-803细胞的G0/G1期细胞所占百分比逐渐降低（P<0.05）,S期细胞所占百分比逐渐升高（P<0.05）,G2/M期细胞所占百分比变化不大（P>0.05）;与空白对照组比较,消岩汤组、阿帕替尼组及其联合用药组的p-PI3K、p-AKT、Bcl-2、血管内皮生长因子A（VEGFA）和血管内皮细胞生长因子受体2（VEGFR-2）蛋白的表达量显著下调（P<0.05）,Cleaved Caspase-9和Bax蛋白的表达量显著上调（P<0.05）,相较于单药组,联合用药组对相关蛋白的调控作用更强。[结论] 消岩汤能有效抑制人胃癌MGC-803细胞增殖,诱导凋亡以及S期阻滞,抗胃癌作用机制与其对VEGF/PI3K/AKT信号通路的调控相关。     

没食子酸体外抗胃癌细胞MGC-803机制的研究

目的 探讨没食子酸(gallic acid,GA)体外对胃癌细胞株MGC-803的抑制作用及机制.方法 体外培养人胃癌细胞株MGC-803,MTT法观察细胞生长情况;Hoechst-33258、AnnexinV-FITC/PI检测细胞凋亡情况;RT-PCR方法研究Survivin的mRNA的变化.结果 MTT检测6.25～50μmol/LGA 抑制MGC-803的生长,并呈剂量依赖性.Hoechest-33258显示出明显的细胞凋亡形态.用Annexin V-FITC/PI检测细胞凋亡率有显著的剂量依赖性.同时RT-PCR反映了GA作用后,胃癌细胞中Survivin mRNA表达减少.结论 GA可抑制胃癌细胞MGC-803的增殖,其作用机制可能与下调相关凋亡基因Survivin有关.     

和厚朴酚与青蒿素体外抗人胃癌MGC-803细胞的作用研究

目的考察和厚朴酚、青蒿素抗肿瘤及两者联合用药的效果。方法采用MTT测定和厚朴酚、青蒿素对人胃癌MGC-803细胞、正常肝细胞LO2抑制作用,用IC50评测体外直接抗肿瘤效果,用金氏公式进行联合用药分析。结果 20μg/ml的和厚朴酚对人胃癌MGC-803细胞具有快速而不可逆的杀伤作用;和厚朴酚能抑制人胃癌MGC-803细胞、正常肝细胞LO2的增殖,IC50分别为3.96,8.04μg/ml。青蒿素对其没有明显的抑制作用,IC50分别为64.85、93.92μg/ml。3.5μg/ml的和厚朴酚与12.5,10,7.5μg/ml的青蒿素联合应用对人胃癌MGC-803细胞体外抑制呈相加作用,Q值分别为1.05,1.04,1.12;与30,20,15μg/ml青蒿素联合应用对人胃癌MGC-803细胞体外抑制呈协同作用,Q值分别为1.21,1.31,1.24;2μg/ml和厚朴酚与30,20,15,12.5,10,7.5μg/ml青蒿素联合应用对人胃癌MGC-803细胞体外抑制呈协同作用Q值分别为1.27,1.28,1.32,1.39,1.16,1.25。结论和厚朴酚对MGC-803细胞较强的抑制肿瘤生长的作用;青蒿素对人胃癌MGC-803细胞、正常肝细胞LO2的毒性低,和厚朴酚与青蒿素联合应用对人胃癌MGC-803细胞可产生协同作用或相加作用。     

姜黄素联合MMC对胃癌MGC-803细胞的生长抑制及细胞周期的影响

目的比较姜黄素分别联合低浓度和中浓度丝裂霉素C(MMC)与高浓度MMC单用对胃癌MGC-803细胞的生长抑制及增殖周期的影响,为临床上应用姜黄素作为化疗药物MMC的增效剂治疗胃癌提供实验依据。方法将姜黄素与低浓度和高浓度MMC联合作用或高浓度MMC单独作用于体外培养的胃癌MGC-803细胞24h,采用MTT方法检测药物作用对MGC-803细胞的生长抑制效应;采用流式细胞技术检测药物作用对MGC-803细胞周期的影响。结果姜黄素联用低剂量MMC对MGC-803细胞的生长抑制作用与中剂量MMC单用时无显著差异(P0.05);姜黄素联用中剂量MMC对MGC-803细胞的抑制作用与高剂量MMC单用时无显著差异(P0.05),提示姜黄素能增强MMC的作用效果。此外,姜黄素单用、MMC单用将MGC-803细胞分别阻滞于G2/M期和S期,姜黄素与MMC联用将MGC-803细胞阻滞于G2/M和S期。结论姜黄素与MMC联用对胃癌细胞MGC-803具有明显的生长抑制作用,其可能的机制之一是姜黄素与MMC联用将MGC-803细胞阻滞于S和G2/M期。     

阿魏酸对人胃癌MGC-803细胞增殖的影响

目的观察阿魏酸对人胃癌MGC-803细胞增殖的影响,探讨其诱导胃癌细胞凋亡的作用机制。方法不同浓度阿魏酸干预体外培养人胃癌MGC-803细胞,作用24、48、72 h后,MTT法检测细胞增殖;不同浓度(0、5、7.5、10 mg/m L)阿魏酸作用MGC-803细胞48 h,Annexin V-FITC/PI法和流式细胞仪检测细胞凋亡,RT-q PCR和Western-blot检测Capase-3、Capase-9、Bax、Bcl-2和Xiap的m RNA和蛋白表达。结果与对照组比较,5、7.5、10、12.5 mg/m L阿魏酸作用MGC-803细胞的OD值明显降低,阿魏酸抑瘤作用明显,阿魏酸作用MGC-803细胞24、48、72 h的IC50分别为12.93、9.73、5.52 mg/m L;5、7.5、10 mg/m L阿魏酸作用MGC-803细胞48 h后均能诱导MGC-803细胞凋亡,5、7.5、10 mg/m L阿魏酸均能上调Capase-3、Capase-9和Bax的m RNA和蛋白表达,下调Bcl-2和Xiap的m RNA和蛋白表达。结论阿魏酸能有效抑制MGC-803细胞增殖,并能诱导MGC-803细胞凋亡,其作用机制与内源性线粒体凋亡途径和下调Xiap的表达有关。     

三物白散含药血清对胃癌MGC-803细胞增殖、凋亡及survivin基因表达的影响

目的 研究三物白散含药血清对人胃癌MGC-803细胞株的增殖、凋亡及survivin基因表达的影响.方法 体外实验选择MGC-803细胞,以5-氟尿嘧啶为阳性对照,采用MTT比色及吖啶橙、EB染色法检测低、中、高3组三物白散大鼠含药血清对MGC-803细胞增殖、凋亡的影响,运用RT-PCR法检测survivin mRNA的表达.结果 三物白散含药血清作用MGC-803细胞后,随着三物白散含药血清药物浓度的增加及作用时间的延长,细胞增殖率逐渐降低,细胞抑制率、凋亡率逐渐升高,survivin蛋白的表达相应的降低.结论 三物白散含药血清能够抑制人胃癌MGC-803细胞增殖,对细胞有诱导凋亡作用,在凋亡过程中涉及survivin基因表达下降.     

金龙胶囊对胃癌细胞MGC-803和BGC-823侵袭转移能力的影响

目的:探讨金龙胶囊对人胃癌MGC-803,BGC-823细胞侵袭和迁移能力的影响并对其具体机制进行探讨。方法:体外培养胃癌MGC-803,BGC-823细胞,分为金龙胶囊组(0.1,0.2,0.4,0.8 g·L~(-1)),空白组和5-氟尿嘧啶(5-FU)组,采用噻唑蓝(MTT)比色法分别检测金龙胶囊对MGC-803,BGC-823细胞增殖的抑制作用,计算半数抑制率(IC50);采用细胞侵袭(transwell)小室法和划痕实验检测金龙胶囊处理MGC-803和BGC-823细胞24 h后,细胞侵袭和迁移能力发生改变;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测金龙胶囊处理MGC-803,BGC-823细胞24 h后E-钙黏素(E-cadherin),基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)蛋白表达情况。结果:金龙胶囊能明显抑制MGC-803,BGC-823细胞的增殖,呈一定的浓度及时间依赖性;与空白组比较,金龙胶囊能明细减少MGC-803,BGC-823细胞的穿膜细胞数目,可明显影响2种胃癌细胞的侵袭与迁移能力,并呈明显浓度依赖性(P0.05);金龙胶囊组的划痕距离较空白组明显降低,影响MGC-803,BGC-823细胞迁移,并呈浓度依赖性(P0.05);与空白组比较,金龙胶囊组能够提高MGC-803和BGC-823细胞中E-cadherin蛋白表达,降低MMP-2,MMP-9蛋白表达水平,且呈一定的量效关系(P0.05)。结论:金龙胶囊能够抑制人胃癌MGC-803,BGC-823细胞的侵袭和迁移能力,其作用机制可能与上调E-cadherin表达,抑制MMP-2,MMP-9表达水平有关。本研究证实了金龙胶囊对胃癌MGC-803,BGC-823细胞抗侵袭转移的部分机制。     

独角莲乙醇提取物体外抗肿瘤实验研究

目的：通过独角莲20%乙醇提取物对人胃腺癌MGC-803、肝癌Hep-2、肺癌A549、乳腺癌MCF-7细胞杀伤率、半数抑制浓度的测定,确定对独角莲20%乙醇提取物的最佳敏感瘤株并通过透射电镜观察药物作用后该肿瘤细胞形态的变化。方法：1.采用体外细胞培养技术用MTT法,检测药物对各肿瘤细胞的生长抑制作用。2.透射电镜观察药物作用96h的肿瘤细胞形态。结果：独角莲20%乙醇提取物对胃癌MGC-803、肝癌Hep-2、肺癌A549、乳腺癌MCF-7细胞的生长有抑制作用,与细胞作用72h时的IC50分别为（74.14±5.29）mg/mL、（81.61±6.14）mg/mL、（128.26±11.43）mg/mL、（120.26±9.46）mg/mL,与细胞作用48h时的IC50分别为（94.55±6.85）mg/mL、（108.94±8.69）mg/mL、（187.78±9.87）mg/mL、（280.54±14.51）mg/mL;透射电镜观察结果表明独角莲20%乙醇提取物能使MGC-803细胞发生凋亡。结论：独角莲20%乙醇提取物对胃癌MGC-803瘤株最敏感且可使该瘤细胞发生凋亡。     

蛴螬提取物体外对人MGC-803胃癌细胞株凋亡相关基因作用的研究

目的:探讨蛴螬提取物体外对MGC-803胃癌细胞株的诱导凋亡作用的分子生物学机制.方法:通过倒置显微镜、HE染色、吖啶橙(A0)/溴化乙锭(EB)荧光染色方法检测蛴螬提取物对MGC-803胃癌细胞诱导凋亡和抑制作用的方式;应用免疫组织化学技术(S-P法)检测用药前后凋亡相关基因bcl-2、bax表达的改变,探讨蛴螬提取物在体外对MGC-803胃癌细胞株的抗增殖及诱导凋亡作用的可能机制.结果:光镜结果表明,蛴螬(终浓度为4mg/ml)作用于MGC-803胃癌细胞24h后,可见胞核固缩、胞核碎裂、凋亡小体形成等凋亡形态学变化;经AO/EB荧光染色观察结果表明,当终浓度为4mg/ml的蛴螬作用于MGC-803细胞24h后,其凋亡率和破膜率与自然凋亡率和破膜率相比均有显著性差异,其凋亡率为86.3%(P＜0.001),破膜率为41.9%(P＜0.001).免疫组化结果表明,用药前后凋亡相关基因bcl-2、bax均有显著性改变(P＜0.001).结论:蛴螬提取物在体外对人MGC-803胃癌细胞株有显著性抗增殖及诱导凋亡作用,其诱导肿瘤细胞凋亡的可能机制与凋亡相关基因bcl-2、bas的表达改变有关.     

益气复元汤联合化疗药含药血清对大肠癌Lovo细胞Bcl-2,Bax表达的影响

目的:观察益气复元汤是否增加化疗药诱导大肠癌Lovo细胞凋亡的影响以及其分子水平作用机制。方法:试验分为益气复原汤、化疗药、益气复原汤+化疗药各自含药血清、血清对照组、空白对照组等5组,人吖啶橙/溴乙啶(AO/EB)双荧光染色法、Annexin V-FITC(FITC,异硫氰酸荧光素)单染法检测各组对大肠癌Lovo细胞凋亡诱导作用,Western blot(蛋白免疫印迹)法检测Lovo细胞凋亡蛋白B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2),多肽抗原(Bax)的表达。结果:细胞形态学及流式细胞检测都表明益气复原汤含药血清对大肠癌Lovo细胞有诱导凋亡作用,并增强化疗药诱导癌细胞凋亡效应;Western blot法检测显示①血清对照组与空白对照组中Bcl-2,Bax蛋白表达无明显差异;②益气复元汤联合化疗组、化疗组、益气复元汤组、血清对照组各组Bcl-2,Bax蛋白表达组间两两比较具有显著差异,P0.01;益气复元汤联合化疗组Bcl-2表达最弱,其次是化疗组,再次是益气复元汤组,血清对照组最强。③益气复元汤联合化疗组Bax表达最强,其次是化疗组,再次是益气复元汤组,血清对照组最弱。结论:益气复元汤对Lovo肠癌细胞有诱导细胞凋亡作用,并增强化疗药诱导癌细胞凋亡效应;下调Bcl-2蛋白及上调Bax蛋白的表达是诱导Lovo肠癌细胞凋亡的主要机制之一。     

基于Hedgehog信号通路探析白头翁汤抗结直肠癌HCT116细胞机制

目的：探讨白头翁汤水煎液通过调控经典Hedgehog(Hh)信号通路诱导人结直肠癌细胞HCT116凋亡的作用及其机制。方法：用白头翁汤(25、50、100、200、500、750、1 000 mg·L^-1)处理HCT116细胞24 h,然后用噻唑蓝(MTT)比色法检测白头翁汤对细胞增殖的影响;分别设置空白组、白头翁汤组(125、250、500 mg·L^-1)和五氟尿嘧啶(5-FU)组(40 mmol·L^-1),显微镜观察细胞给药前后形态变化;划痕实验检测白头翁汤对细胞迁移的影响;Hoechest 33324/碘化丙锭(PI)染色法评价白头翁汤对细胞凋亡的影响;流式细胞术检测白头翁汤对HCT116细胞凋亡的影响;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测细胞凋亡相关B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)的表达水平及Hh信号通路关键因子音猬因子(SHh)、GLI家族锌指蛋白1(Gli1)、G蛋白偶联受体蛋白Smoothened(Smo)、苏氨酸蛋白激酶Fused抑制因子(SuFu)、c-核蛋白类基...     

多伞阿魏体外抗胃癌活性筛选、细胞凋亡及周期阻滞机制

目的:研究确定新疆特色维族药多伞阿魏体外抗胃癌活性部位及其敏感胃癌细胞系,并探讨多伞阿魏诱导胃癌细胞凋亡和细胞周期阻滞情况,为其进一步在抗胃癌方面的研究、开发与应用提供实验依据。方法:采用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测不同质量浓度多伞阿魏不同提取物(挥发油,95%乙醇提取物,及其石油醚部位,三氯甲烷部位,乙酸乙酯部位,正丁醇部位,水部位)分别对5种胃癌细胞系(AGS,MKN-45,BGC-823,MGC-803,SGC-7901)的增殖抑制作用;采用Hoechst33258荧光染色法观察多伞阿魏挥发油和三氯甲烷部位对胃癌细胞AGS和SGC-7901的影响情况;并应用细胞流式仪检测多伞阿魏不同提取部位作用胃癌细胞AGS和SGC-7901的凋亡和周期阻滞影响情况。结果:与空白组比较,多伞阿魏挥发油,95%乙醇提取物,石油醚部位,三氯甲烷部位,乙酸乙酯部位对5种胃癌细胞均有不同程度的增殖抑制作用(P0.05),并呈现浓度依赖关系。挥发油对胃癌细胞AGS呈现出较强的增殖抑制作用,其半数抑制浓度(IC50)为(7.98±2.62)mg·L~(-1),三氯甲烷部位对5种胃癌细胞系均具有较好的敏感性,对胃癌细胞SGC-7901最为敏感,其IC50为(8.73±0.55)mg·L~(-1),而正丁醇部位和水部位未呈现出明显的细胞增殖抑制作用;多伞阿魏挥发油和三氯甲烷部位作用胃癌细胞AGS和SGC-7901后,细胞核被Hoechst33258染色呈亮蓝色,且随着药物浓度的增加蓝色荧光越强;流式细胞凋亡检测结果显示,多伞阿魏不同提取部位诱导胃癌细胞AGS和SGC-7901发生不同程度的凋亡(P0.05),且随着药物浓度的增加,细胞总凋亡率明显增高;流式细胞周期检测结果显示,与空白组比较,多伞阿魏挥发油使胃癌细胞AGS的周期发生明显改变,细胞休眠期/DNA复制前期(G0/G1期)细胞比例增高,DNA复制期(S期)细胞比例降低,DNA复制后期/有丝分裂期(G2/M期)比例降低(P0.05);与空白组比较,多伞阿魏三氯甲烷部位使胃癌细胞SGC-7901的周期也发生显著改变,G0/G1期细胞比例降低,S期细胞比例增高,G2/M期比例降低(P0.05)。结论:多伞阿魏挥发油对胃癌细胞AGS呈现出较强的细胞毒活性,三氯甲烷部位对5种胃癌细胞均具有较好的增殖抑制作用,尤其对胃癌细胞SGC-7901最为敏感;多伞阿魏各提取部位诱导胃癌细胞AGS和SGC-7901主要发生晚期凋亡,而多伞阿魏乙酸乙酯部位诱导胃癌细胞AGS主要发生细胞早期凋亡;多伞阿魏挥发油能够将胃癌细胞AGS阻滞于G0/G1期,阻止细胞进入S期及G2/M期;伞阿魏三氯甲烷部位将胃癌SGC-7901细胞周期阻滞于S期。研究表明多伞阿魏挥发油和三氯甲烷部位具有较好的抗胃癌活性作用,具有潜在的研究价值和开发利用空间,并为多伞阿魏体内抗胃癌及其抗胃癌机制研究提供了一定的科学依据。     

央芪汤对胃癌细胞凋亡影响的实验研究

目的：观察央芪汤对胃癌细胞凋亡的影响。方法：培养人胃癌细胞SGC-7901细胞株，用MTT法评价央芪汤对胃癌细胞增殖的抑制作用，确定央芪汤对胃癌细胞的IC50值，采用流式细胞术检测央芪汤对胃癌细胞凋亡的诱导作用，免疫细胞化学法检最4胃癌细胞中bel-2及caspase-3蛋白的表达情况。结果：央芪汤可以显著促进胃癌细胞SGC-7901的凋亡（P〈0．01）。明显增加胃癌细胞SGC-7901凋亡蛋白caspase-3的表达（P〈0．01），并可明显抑制抗凋亡蛋白bel-2的表达（P〈0．01）。结论：央芪汤可以通过促进胃癌细胞的凋亡，达到抗肿瘤的目的。     

复方蜥蜴散含药大鼠血清对人胃癌细胞MGC-803增殖、凋亡及周期的影响

目的研究复方蜥蜴散含药大鼠血清对人胃癌细胞MGC-803增殖、凋亡及周期的影响,探讨其对胃癌的干预作用。方法 160只SPF级SD雄性大鼠随机分成8组:生理盐水组(A组)、5-FU组(B组),华蟾素组(C组)、复方蜥蜴散80目组(D组)、复方蜥蜴散100目组(E组),80与100目混合低剂量组(F组)、中剂量组(G组)和高剂量组(H组),每组共20只。各组给予相应干预,1次/d,持续1周。末次给药后1 h,腹腔麻醉,无菌条件下腹主动脉取血、离心,制备各组含药血清,分别干预人胃癌MGC-803细胞24 h,采用MTT法检测细胞的增殖变化; TUNEL检测细胞凋亡情况;流式细胞法检测细胞的周期变化。结果 (1)与A组相比,各处理组含药大鼠血清均能抑制人胃癌细胞MGC-803的增殖、诱导其凋亡,并且将细胞阻滞于G1期,P <0. 05。(2)复方蜥蜴散各组OD均值小于B、C组,P <0. 05;复方蜥蜴散各组细胞总凋亡率大于B、C组,P <0. 05;复方蜥蜴散各组G1期细胞比例大于B、C组,P <0. 05。(3)F、G、H各组OD均值小于D、E组,P <0. 05; F、G、H各组细胞总凋亡率大于D、E组,P <0. 05; F、G、H各组G1期细胞比例大于D、E组,P <0. 05。(4)F、G、H组比较,以H组对人胃癌细胞MGC-803的影响最为明显P <0. 05;其中F、G、H组呈浓度-效应依赖性。结论复方蜥蜴散含药大鼠血清对体外培养MGC-803细胞有抑制增殖、诱导凋亡、使其发生周期阻滞的作用,表现出对胃癌较好的干预作用。     

大蒜素对5-氟尿嘧啶治疗肝癌的增效作用及机制

目的研究大蒜素增强肝癌细胞SMMC-7721对5-氟尿嘧啶(5-FU)敏感性作用及机制。方法用不同浓度的大蒜素和亚叶酸钙(CF)同时联合5-FU处理肝癌细胞株SMMC-7721。将对数生长的SMMC-7721细胞株随机分为空白对照组、5-FU(100 mg/L)组、低浓度大蒜素(25 mg/L)+5-FU(100 mg/L)组、中浓度大蒜素(50 mg/L)+5-FU(100 mg/L)组、高浓度大蒜素(100 mg/L)+5-FU (100 mg/L)组、低浓度CF(5 mg/L)+5-FU(100 mg/L)组、中浓度CF(10 mg/L)+5-FU(100 mg/L)组、高浓度CF(20 mg/L)+5-FU(100 mg/L)组。采用CCK-8检测细胞增殖抑制率,选择同类药物中抑制率最高的组完成后续实验。采用流式细胞术检测细胞周期。用Hoechst 33258染色观察细胞凋亡。采用Western Blot法检测与耐药相关的P糖蛋白(Pgp)和多药耐药相关蛋白-1(MRP-1)表达。结果与5-FU组比较,低、中、高浓度大蒜素均可协同5-FU抑制SMMC-7721生长,而高浓度大蒜素+5-FU组的增殖抑制作用最明显(P0.05);选择效果较好的高浓度大蒜素+5-FU组和中浓度CF+5-FU组继续完成后续实验。各给药组均能将细胞阻断在S期,高浓度大蒜素+5-FU组的S期阻滞作用较其他组更为明显,并且还具有明显的G2/M期细胞阻滞作用(P0.05)。高浓度大蒜素+5-FU组能更明显地诱导肝癌细胞凋亡,降低Pgp和MRP-1蛋白表达水平(P0.05)。结论大蒜素能够增强5-FU的抗肿瘤效果。其机制可能与大蒜素降低肝癌细胞内Pgp和MRP-1的表达,逆转耐药有关。大蒜素具有G2/M期细胞阻滞作用,可能与5-FU发生协同作用。     

央芪汤对胃癌细胞凋亡影响的实验研究

目的观察央芪汤对胃癌细胞凋亡的影响。方法培养人胃癌细胞SGC-7901细胞株,用MTT法评价央芪汤对胃癌细胞增殖的抑制作用,确定央芪汤对胃癌细胞的IC50值,采用流式细胞术检测央芪汤对胃癌细胞凋亡的诱导作用,免疫细胞化学法检测胃癌细胞中bcl-2及caspase-3蛋白的表达情况。结果央芪汤可以显著促进胃癌细胞SGC-7901的凋亡(P0.01),明显增加胃癌细胞SGC-7901凋亡蛋白caspase-3的表达(P0.01),并可明显抑制抗凋亡蛋白bcl-2的表达(P0.01)。结论央芪汤可以通过促进胃癌细胞的凋亡,达到抗肿瘤的目的。     

雄黄诱导人胃癌MGC -803细胞凋亡

目的 观察雄黄体外抗人胃癌MGC - 803细胞作用及其可能作用机制.方法 采用MTS法和细胞克隆实验法观察雄黄对MGC - 803细胞增殖的影响,应用PI/Hoechest33258双染法和流式细胞仪检测细胞凋亡,荧光分光光度计检测细胞内钙和线粒体膜电位,荧光定量PCR测Bad mRNA的表达.结果 雄黄能剂量依赖性地抑制MGC - 803细胞的生长和克隆形成.雄黄作用后,MGC-803细胞出现凋亡形态学改变如染色质浓缩等;流式细胞仪检测显示,雄黄能剂量依赖性地诱导细胞凋亡,其中,225 μg/ml雄黄引起MGC-803细胞凋亡的百分率为(43.6±5.4)％.雄黄能剂量依赖性的引起MGC-803细胞的细胞内钙升高和线粒体膜电位降低,并上调Bad mRNA的表达.结论 雄黄具有一定的抗肿瘤作用,并能诱导细胞凋亡,可能与钙依赖的凋亡通路有关.