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目的:构建iASPP真核表达载体,稳定转染小鼠成纤维细胞(NIH3T3)并检测其表达,观察其对NIH3T3细胞增殖的影响。方法:设计引物以源克隆PCMV-iASPP为模板PCR扩增其中的CDS区,亚克隆入FLAG-pcDNA3.0,将该重组质粒转化DH5α感受态大肠埃希菌,筛选阳性克隆,经酶切、测序鉴定后,用脂质体介导转染NIH3T3细胞,G418加压筛选28 d,RT-PCR、West-ern blotting检测基因、蛋白表达;MTT法观察细胞增殖能力。结果:重组质粒鉴定正确,筛选所得阳性克隆中可以检测到iASPP基因的转录和表达,且该iASPP阳性表达细胞株增殖能力明显增强。结论:成功构建iASPP真核表达载体并成功构建稳定表达iASPP的NIH3T3细胞株,证明该基因的稳定表达在体外能显著增强NIH3T3细胞增殖能力。 相似文献
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p53凋亡刺激蛋白(ASPP)是p53的重要调节蛋白,其成员有ASPP1、ASPP2、iASPP.它们与p53形成复合物后,ASPP1和ASPP2特异性促进p53的细胞凋亡功能,而iASPP则同ASPP1和ASPP2竞争性地与p53结合位点结合,从而抑制p53的抑癌功能.ASPP家族尤其是iASPP有望成为肿瘤治疗的新靶点. 相似文献
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大黄是临床常用中药,近年来有关大黄导致不良反应的报道日益增多,现代研究显示其有效成分中含有肝毒性成分。本文从大黄导致肝毒性的机制及减毒方法两方面讨论临床如何安全运用大黄,并得出大黄临床运用的注意事项,以期提高大黄临床使用的安全性,减少不良事件的发生。 相似文献
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胃癌是世界范围内常见的消化道恶性肿瘤之一,其中人表皮生长因子受体2(human epidermal growth factor receptor 2,HER2)阳性胃癌患者占胃癌总人群的15%~20%。HER2阳性胃癌患者的恶性程度高且预后较差,其目前的治疗方案仍以内科治疗为主但疗效有限。抗体偶联药物(antibody-drug conjugate,ADC)是一类由单克隆抗体和小分子细胞毒性载荷通过连接子偶联而成的新型高效抗肿瘤药物,兼具单抗药物高度的靶向性和小分子细胞毒药物强大的杀伤作用,在HER2阳性胃癌的临床研究中具有广阔的应用前景。目前,已有多个ADC在临床中被广泛应用于治疗HER2阳性胃癌,本文重点对现阶段ADC在HER2阳性胃癌中的研究进展进行综述。 相似文献
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