和厚朴酚联合青蒿素对CNE-2细胞增殖和凋亡的作用

目的:研究和厚朴酚、青蒿素及二者联合应用在体外能否抑制人鼻咽癌CNE-2细胞的生长以及对其细胞凋亡的影响。方法:MTT法检测和厚朴酚、青蒿素单独或联合对细胞生长的抑制作用,以IC50评判抗肿瘤的效果,应用金氏公式进行联合用药的结果分析;DAPI染色观察细胞的凋亡形态,流式细胞仪检测和厚朴酚、青蒿素单独或联合作用对CNE-2凋亡率的影响。结果:和厚朴酚能显著抑制CNE-2细胞的增殖,并呈剂量依赖关系,其半数抑制浓度(IC50)为8.58 mg.L-1;青蒿素对CNE-2细胞生长没有明显的抑制作用,半数抑制浓度(IC50)为62.24 mg.L-1;和厚朴酚与青蒿素联合应用对CNE-2细胞的增殖抑制作用优于各单药组,q>1.15。DAPI染色可观察到和厚朴酚与青蒿素联合组核碎裂、凋亡小体,而单药组则不明显;凋亡分析显示联合用药组作用48 h细胞凋亡率显著高于各单药组。结论:和厚朴酚单独能够杀伤CNE-2细胞,并呈量-效关系,青蒿素单独作用不杀伤CNE-2细胞,两者联合应用对CNE-2细胞具有协同杀伤作用。     

肿节风注射液抗肿瘤及与阿霉素联合用药的实验研究

目的了解肿节风注射液抗肿瘤及与阿霉素联合用药的效果。方法采用四氮唑盐法(MTT法)测定药物的体外抑制作用,用IC50评测直接抗肿瘤效果,用金氏公式进行联合用药分析。结果肿节风注射液能抑制人肝癌细胞Bel7402、人结肠癌细胞HCT-8的增殖,其IC50分别为33.13,52.39mg/mL。3.125,6.25,12.5mg/mL的肿节风注射液与阿霉素联合对HCT-8细胞体外抑制呈相加作用;25,50mg/mL的肿节风注射液与阿霉素联合对HCT-8细胞体外抑制呈协同作用。结论肿节风注射液对Bel7402、HCT-8细胞有一定的抑制肿瘤生长的作用,它与阿霉素联合应用对HCT-8细胞可产生相加或增强的协同抑制效果,尤其是高浓度的肿节风注射液与阿霉素的协同作用更为显著。     

金正均Q值法评价苦参碱联合阿霉素对人乳腺癌细胞的协同作用

目的利用金正均Q值法评价苦参碱联合阿霉素对人乳腺癌细胞是否存在协同增效作用。方法 MTT法检测各组对MCF-7细胞的生长抑制率,确定苦参碱及阿霉素的IC50,采用金正均Q值法计算联合用药各组的Q值;克隆形成实验检测各组对人乳腺癌细胞的克隆抑制能力;免疫蛋白印迹法检测各组对人乳腺癌细胞bax蛋白的表达。结果苦参碱、阿霉素及联合用药对MCF-7细胞的抑制作用呈浓度依赖性,经苦参碱联合阿霉素处理后的细胞生长抑制作用,与单用苦参碱或阿霉素相比,细胞抑制率明显增高,其中,苦参碱0.5mg/ml联合阿霉素0.5μg/ml组的抑制率明显增高,为(75.50±1.55)%,Q值为1.16,表现为协同作用,其余组Q值为0.96~1.10,表现为相加作用;苦参碱和阿霉素对MCF-7细胞的抑制作用呈浓度依赖性,其对MCF-7细胞的IC50值分别为(2.00±0.17)mg/ml和(0.36±0.03)μg/ml。经苦参碱0.5mg/ml联合阿霉素0.5μg/ml处理后的细胞克隆形成率,与单用苦参碱或阿霉素相比,细胞克隆形成率明显降低,为(13.68±1.76)%。经苦参碱0.5mg/ml联合阿霉素0.5μg/ml处理后的bax蛋白的表达,与单用苦参碱或阿霉素相比bax蛋白表达水平明显升高,为(60.85±2.34)%。结论苦参碱联合阿霉素对MCF-7在抑制生长、抑制增殖以及诱导凋亡方面起协同作用,其原因可能与协同上调bax蛋白的表达有关,具体原因有待进一步研究。     

没食子酸体外抗胃癌细胞MGC-803机制的研究

目的 探讨没食子酸(gallic acid,GA)体外对胃癌细胞株MGC-803的抑制作用及机制.方法 体外培养人胃癌细胞株MGC-803,MTT法观察细胞生长情况;Hoechst-33258、AnnexinV-FITC/PI检测细胞凋亡情况;RT-PCR方法研究Survivin的mRNA的变化.结果 MTT检测6.25～50μmol/LGA 抑制MGC-803的生长,并呈剂量依赖性.Hoechest-33258显示出明显的细胞凋亡形态.用Annexin V-FITC/PI检测细胞凋亡率有显著的剂量依赖性.同时RT-PCR反映了GA作用后,胃癌细胞中Survivin mRNA表达减少.结论 GA可抑制胃癌细胞MGC-803的增殖,其作用机制可能与下调相关凋亡基因Survivin有关.     

灵芝抗肿瘤组分的分离

目的 从具有直接抑制肿瘤生长的灵芝ZL83子实体中分离具有抗肿瘤作用的活性组分.方法 采用石油醚、醋酸乙酯、正丁醇萃取灵芝水提液浸膏,并将这3个萃取部位进行体内外抗肿瘤实验,将筛选得到的具有较好抗肿瘤活性的部位进行硅胶柱层析分离,并采用MTT法对各个分离获得组分的体外抗肿瘤活性进行比较.结果 通过体内抗S180和体外抗LoVo及MGC - 803肿瘤细胞实验表明,正丁醇萃取部位具有较好抗肿瘤活性.通过硅胶柱分离,获得6个组分,通过MTT法发现这6个组分中,甲酸乙酯与乙醇混合洗脱及乙醇单独洗脱所得到的2个组分具有体外抗肿瘤活性,其中甲酸乙酯与乙醇洗脱组分具有更好杀伤作用,对LoVo细胞及MGC-803细胞的IC50分别为53.225μg/ml和94.078μg/ml.结论 从具有直接抑制肿瘤生长的灵芝ZL83中分离得到两种具有抗肿瘤作用的活性组分.     

青蒿素类药对A549和Hela细胞体外抗肿瘤活性的研究

目的：研究青蒿素类药物对非小细胞肺癌A549和宫颈癌Hela细胞的体外抗肿瘤活性。方法：采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法测定青蒿素、双氢青蒿素及青蒿琥酯体外抑制人肺癌细胞和宫颈癌细胞的活性。结果：双氢青蒿素及青蒿琥酯对A549细胞72h的IC50为27．971μg／mL、43．90μg／mL；青蒿素、双氢青蒿素及青蒿琥酯对Hela细胞72h的Ic50分别为48．10μg／mL、15．94μg/mL、34．60μg／mL。结论：青蒿素、双氢青蒿素及青蒿琥酯对2株肿瘤细胞有选择性抑制作用。青蒿素类药物中，双氢青蒿素和青蒿琥酯抗肿瘤作用较好。     

夏星汤对人胃癌MGC-803细胞生长抑制作用的研究

目的研究夏星汤对胃癌MGC-803细胞生长的影响。方法采用MTT法、直接观察法观察不同浓度药液及服用不同剂量药物后的大鼠血清对胃癌MGC-803细胞体外增殖的影响。结果在作用24 h、48 h后,≥20 g/L浓度的夏星汤药液对胃癌MGC-803细胞均出现生长抑制现象,抑制作用与给药浓度成正比;药物血清各组均未出现明显生长抑制现象。结论夏星汤药液对胃癌MGC-803细胞生长增殖具有抑制作用,而药物血清无明显抑制作用。     

和厚朴酚联合青蒿素体外抗肿瘤的实验研究

 目的 研究和厚朴酚、青蒿素及二者联合应用对人肺腺癌SPC-A-1细胞生长的抑制作用。方法 MTT法测定和厚朴酚、青蒿素单独或联合对细胞生长的抑制作用,以IC₅₀评判抗肿瘤的效果,应用金氏公式进行联合用药分析的结果;流式细胞仪检测和厚朴酚、青蒿素单独或联合作用对SPC-A-1细胞周期分布的影响。结果 和厚朴酚能显著抑制SPC-A-1细胞的增殖,并呈剂量依赖关系,其半数抑制浓度(IC₅₀)为8.20 μg·mL-1;青蒿素对SPC-A-1细胞生长没有明显的抑制作用,半数抑制浓度(IC₅₀)为53.52 μg·mL-1;和厚朴酚与青蒿素联合应用对SPC-A-1细胞的增殖抑制作用优于各单药组,Q>1.15。细胞周期分布显示联合用药组将细胞阻滞于G₁期,显著高于各单药组。结论 和厚朴酚单独能够杀伤SPC-A-1细胞,并呈量-效关系,青蒿素单独作用不杀伤SPC-A-1细胞,两者青蒿素联合应用对SPC-A-1细胞具有协同作用。     

玉米提取物的抗肿瘤作用研究

研究玉米乙醇提取物(YM-J)和玉米多糖(YM-S)的体外和体内抗肿瘤活性.方法　采用MTT法测定YMJ,YM-S对人肿瘤细胞株BGC-823和SMMC-7721的体外抑制作用,计算IC50;分别采用人胃癌BGC803裸鼠移植瘤模型和H22小鼠肝癌移植瘤模型,ig YM-J,YM-S,剂量400,200 mg· kg-1,1次/d(胃癌BGC803连续19d,小鼠肝癌连续10 d,检测其体内抗肿瘤作用.结果　YM-J和YM-S对人胃癌细胞BGC-823细胞有较强的抑制作用,IC50分别为24.16,12.61 μg·mL-1;YM-J和YM-S对人肝癌细胞SMMC-7721的抑制作用较弱,IC50分别为127.42,1352.72 μg·mL-1.在人胃癌BGC803裸鼠移植瘤模型和H22肝癌模型,YM-J均可明显抑制肿瘤生长,抑瘤率最高分别为40.27％和44.69％.YM-S对H22肝癌有一定抑瘤作用,抑瘤率38.89％,但对人胃癌BGC803裸鼠移植瘤的抑瘤率最高为25.96％.结论　玉米乙醇提取物YM-J和玉米多糖YM-S在体外和体内均具有一定的抗肿瘤活性,其中乙醇提取物对肝癌和胃癌的抑制作用较强.     

瑞香狼毒药效组分诱导人肝癌细胞凋亡及对细胞周期依赖性蛋白激酶CDK2的影响

目的:探讨瑞香狼毒药效组分Zp1111对人肝癌细胞的增殖抑制与诱导凋亡作用及机制。方法:MTT法比较瑞香狼毒药效组分Zp1111对体外培养的人来源肝癌细胞与正常肝细胞LO2抑制作用,采用流式细胞术检测用药前后BEL-7402细胞凋亡的变化并分析Zp1111对DNA周期分布的影响,荧光共振能量转移法检测Zp1111对细胞周期依赖性蛋白激酶CDK2的抑制作用。结果:Zp1111对体外培养的肝癌细胞HepG2、BEL-7402、SMMC-7721均有较好的抑制作用,IC50分别为37.75μg/ml、28.60μg/ml、29.22μg/ml,而对正常肝细胞LO2抑制作用不明显,在25μg/ml及以下的浓度对LO2细胞反而有一定促进作用。Zp1111能诱导BEL-7402细胞发生凋亡,一定药物浓度范围内凋亡率具有药物浓度依赖关系;Zp1111还能调控体外培养的BEL-7402细胞周期分布,显著下调S期的细胞比例,并且对CDK2具有较好的抑制作用。结论:瑞香狼毒药效组分Zp1111具有一定诱导凋亡作用,可使BEL-7402细胞周期阻滞在G1期,其作用机制可能与抑制CDK2有关。     

红芪多糖HPS-3体外诱导人胃癌MGC-803细胞凋亡研究

目的:研究红芪多糖均一组分HPS-3体外对人胃腺癌MGC-803细胞增殖及凋亡的作用。方法:应用MTT法、显微荧光术和流式细胞术测定HPS-3对MGC-803细胞的增殖、细胞周期和诱导凋亡的影响,应用流式细胞术测定对Bc1-2和Bax蛋白表达的影响。结果:HPS-3对MGC-803细胞具有抑制增殖、G2/M期阻滞和诱导凋亡作用;HPS-3降低bcl-2蛋白表达,对Bax蛋白表达无明显作用。结论:HPS-3可通过抑制人胃腺癌MGC-803细胞的生长增殖、G2/M期阻滞、诱导细胞凋亡,降低bcl-2蛋白等作用机制发挥肿瘤作用。     

细胞连续亲和-HPLC测定8种蟾蜍甾烯与MGC-803细胞亲和量及抗肿瘤活性相关分析

目的:采有细胞连续亲和研究蟾蜍甾烯(Bu)与肿瘤细胞的生物亲和作用,分析其与抗肿瘤活性的相关性.方法:将蟾酥氯仿提取物与胃癌细胞MGC-803混合培养,高效液色谱测定上清液和细胞内8种Bu的含量,计算亲和率.结果:亲和后细胞上清液中Bu总减少率、细胞内游离Bu的含量百分率和两者差值(与细胞裂解物的亲和率)、抑制MGC-803活性(1/IC50)相关数r分别是0.82(P<0.05),-0.04,0.83(P<0.05).结论:8种蟾蜍甾烯与MGC-803发生不同程度亲和.其与肿瘤细胞裂解物的亲和率与抗肿瘤活性具有显著相关性.     

肉桂酸和1,25-二羟维生素D_3联用对人胃腺癌细胞的诱导分化作用

目的观察肉桂酸(CINN)和1,25-二羟维生素D3(1,25-(OH)2D3)联合用药对人胃腺癌MGC-803细胞的诱导分化作用。方法 1,25-(OH)2D3和CINN联合用药(2 mmol/L CINN+10-6mmol/L 1,25-(OH)2D3、1 mmol/L CINN+10-5mmol/L 1,25-(OH)2D3)及单独用药作用于MGC-803细胞48 h后,应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定细胞增殖能力,平板克隆试验测定细胞集落形成率,流式细胞仪测定细胞周期,TRAP-银染法测定端粒酶活性。结果 1,25-(OH)2D3和CINN联合用药后胃腺癌细胞生长明显受抑制,细胞周期出现向G0/G1期移行的特征性动力学改变,端粒酶活性明显受到抑制。细胞集落形成率明显下降。结论 CINN和1,25-(OH)2D3联合用药对人胃腺癌细胞的诱导分化具有协同作用。     

红芪多糖HPS-3体外诱导人胃癌MGC-803细胞凋亡的研究

目的:研究红芪多糖均一组分HPS-3体外对人胃腺癌MGC-803细胞增殖及凋亡的作用。方法:应用MTT法、显微荧光术和流式细胞术测定HPS-3对MGC-803细胞的增殖、细胞周期和诱导凋亡的影响,应用流式细胞术测定对Bc1-2和Bax蛋白表达的影响。结果:HPS-3对MGC-803细胞具有抑制增殖、G2/M期阻滞和诱导凋亡作用;HPS-3降低bcl-2蛋白表达,对Bax蛋白表达无明显作用。结论:HPS-3可通过抑制人胃腺癌MGC-803细胞的生长增殖、G2/M期阻滞、诱导细胞凋亡,降低bcl-2蛋白等作用机制发挥肿瘤作用。     

南蛇藤总萜对MGC-803细胞侵袭和迁移能力的影响

目的:探讨南蛇藤总萜对人胃癌MGC-803细胞侵袭和迁移能力的影响,并对其机制进行初步探讨。方法:体外培养MGC-803细胞,分为南蛇藤总萜组(质量浓度分别为20,40,80 mg·L-1)、阴性对照组和阳性对照组,采用MTT法检测南蛇藤总萜对MGC-803细胞增殖的抑制作用;采用Transwell小室法检测南蛇藤总萜处理MGC-803细胞24 h后,细胞侵袭和迁移能力的改变;Western blotting法检测处理24 h后基质金属蛋白酶(MMP)-2和MMP-9的表达情况。结果:南蛇藤总萜能抑制MGC-803细胞的增殖,呈一定的浓度及时间依赖性;南蛇藤总萜40,80 mg·L-1能显著降低MGC-803细胞的穿膜细胞数(P<0.01),并呈浓度依赖性;南蛇藤总萜能降低MGC-803细胞中MMP-2和MMP-9蛋白的表达水平,并有浓度依赖性。结论:南蛇藤总萜能抑制人胃癌MGC-803细胞的侵袭和迁移能力,其机制可能与抑制MMP-2,MMP-9的表达有关。     

5-FU联合人参黄芪复方对人胃癌MGC-803细胞生物学行为的影响

目的探讨中药人参黄芪复方联合5-氟尿嘧啶（5-Fu）,在体外对人胃癌MGC-803细胞的增殖、克隆、凋亡、迁移等生物学行为的影响。方法采用MTT方法检测细胞的增殖抑制率;并计算其中效浓度;流式细胞仪检测观察细胞的周期及凋亡;Giemsa染色检测细胞的克隆形成;细胞划痕实验检测药物对细胞迁移的抑制作用。结果人参黄芪复方和5-Fu均能抑制人胃癌MGC-803细胞生长,并随着药物浓度的增加而增强,5-Fu联合人参黄芪复方对细胞生长的抑制率明显高于单用人参黄芪复方或5-Fu组（P〈0．05）,并随着浓度的增加而增强;人参黄芪复方和5-Fu均能诱导胃癌细胞凋亡、抑制细胞克隆形成、阻滞细胞于G0／G1期、并抑制细胞迁移,而两药联用时细胞凋亡率、G0／G1期细胞均明显高于两药单用（P〈0．05）,并阻滞细胞于G0／G1期;人参黄芪复方与5-FU联合应用时细胞克隆形成、细胞迁移面积均明显低于两药单用（P〈0．05）,且联合用药的中效浓度小于两药单用时的中效浓度之和。结论人参黄芪复方和5-Fu联合应用与两药单用比较,能更好的抑制人胃癌MGC-803细胞增殖、抑制细胞克隆形成、促进细胞凋亡、阻滞细胞期于G0／G1期,并抑制细胞迁移。     

Apoptotic and antihepatofibrotic effect of honokiol via activation of GSK3β and suppression of Wnt/β-catenin pathway in hepatic stellate cells

Though honokiol, derived from the Magnolia tree, was known to suppress renal fibrosis, pulmonary fibrosis, non-alcoholic steatoheptitis, inflammation and cancers, the underlying antifibrotic mechanisms of honokiol are not fully understood in hepatic stellate cells until now. Thus, in the present study, inhibitory mechanism of honokiol on liver fibrosis was elucidated mainly in hepatic stellate cells (HSCs) by 3-(4, 5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT) assay, cell cycle analysis and western-blotting. Honokiol exerted cytotoxicity in LX-2, HSC-T6 and Hep-G2 cells. Honokiol increased sub G1 population and activated caspase 3 and cleaved poly (ADP-ribose) polymerase (PARP) in HSCs. Moreover, honokiol attenuated the expression of alpha smooth muscle actin (α-SMA), transforming growth factor beta 1 (TGF-β1), phospho-Smad3, phospho-AKT, cyclin D1, c-Myc, Wnt3a, β-catenin, and activated phosphorylation of glycogen synthase kinase 3 beta (GSK3β) in HSCs. Conversely, GSK3β inhibitor SB216763 reversed the effect of honokiol on PARP, α-SMA, phospho-GSK3β, β-catenin and sub G1 population in LX-2 cells. Overall, honokiol exerts apoptotic and antifibrotic effects via activation of GSK3β and inhibition of Wnt3a/β-catenin signalling pathway.     

海绵提取物S1～S3抑制肝癌细胞和肺腺癌细胞增殖作用的实验研究

目的:用体外培养法研究海绵提取物S1～S3对肝癌7402细胞、肺腺癌GLC-82细胞和胃癌MCG-803细胞增殖的抑制作用.方法:采用MTT法进行研究.结果:海绵提取物S1、S2和S3分别处理肿瘤细胞48 h后,S3呈剂量依赖性抑制肺腺癌GLC-82和肝癌7402细胞增殖,测得IC50分别为2.714 μg/ml和2.598 μg/ml,而对胃癌MCG-803细胞增殖无明显抑制作用;S1和S2对3种肿瘤细胞增殖均无抑制作用.结论:海绵提取物S3对肝癌7402细胞和肺腺癌GLC-82细胞的增殖有抑制作用.