不同剂量BMSC尾静脉输注对小鼠肺组织纤维化的影响

目的 研究经尾静脉输注不同剂量的骨髓间充质干细胞（BMSC）对小鼠肺纤维化的影响。方法 体外培养雄性转红色荧光蛋白（RFP）基因FVB小鼠BMSC。将24只FVB雌性受体小鼠随机分为正常组、模型组、BMSC治疗1组（BMSC 1组）和BMSC治疗2组（BMSC 2组）（n=6）。模型组、BMSC 1组和BMSC 2组小鼠分别经气管内注射博莱霉素制备肺纤维化模型。建模24 h后,BMSC 1组和BMSCs 2组小鼠分别经尾静脉注射BMSC 1×106/只和2×106/只。于建模后第21天处死所有小鼠,制备小鼠肺组织标本。光学显微镜观察病理学变化;激光共聚焦显微镜和免疫组织化学法进行RFP(+)BMSC分布观察和RFP定量分析;免疫组织化学法检测肺表面活性物质蛋白A(SP-A)表达;碱水解法测定羟脯氨酸（Hyp）含量;Real-time PCR检测转化生长因子-β（TGF-β）和血小板衍生生长因子（PDGF）mRNA表达。结果 小鼠肺组织纤维化程度,BMSC 1组较模型组显著减轻,而BMSC 2组较模型组明显加重。BMSC 2组在肺间质纤维化活跃区域可见大量RFP(+)BMSC且其形态类似成纤维细胞。SP-A表达,正常组＞BMSC 1组＞BMSC 2组和模型组（均P<0.05）,而BMSC 2组与模型组比较差异无统计学意义（P＞0.05）。Hyp含量,正常组＜BMSC 1组＜模型组＜BMSC 2组（P<0.01,P<0.05）;TGF-β和PDGF mRNA表达,BMSC 2组＞BMSC 1组＞模型组＞正常对照组（均P<0.05）。结论 适量的BMSC尾静脉输注能有效减轻博来霉素诱导的小鼠肺纤维化,而过量的BMSC则可能使其病变加重。     

生存素修饰的骨髓间充质干细胞抑制小鼠肺纤维化

目的 研究经尾静脉移植携带生存素(survivin)基因的骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cell,BMSC)对小鼠肺纤维化的影响.方法体 外构建培养经慢病毒转染绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)及生存素基因的C57BL/6小鼠BMSC-survivin以及经慢病毒转染GFP的C57BL/6小鼠BMSC,并应用流式细胞术比较2种细胞的体外凋亡率.6～8周龄C57BL/6小鼠48只,博莱霉素5 mg/kg气管内灌注制备小鼠肺纤维化模型.随机分为3组:BMSC-survivin组、BMSC组、模型组；造模24 h后,3组分别经尾静脉注射BMSC-survivin、BMSC和生理盐水.每组于第7、28天各处死8只小鼠.肺组织作病理学检查,免疫组织化学法检测肺表面蛋白A的表达；ELISA法测定血清中羟脯氨酸(Hyp)的含量；PCR法检测TGF-31和MMP-9 mRNA表达情况.结果 BMSC及BMSC-survivin细胞凋亡率分别为(14.466±1.953)％和(7.718±0.493)％,给予BMSC干预的小鼠肺病理改变较对照组轻,BMSC-survivin组、BMSC组、模型组肺组织羟脯氨酸含量第7天分别为(0.106 ±0.012)、(0.245±0.009) μg/mL和(0.324 ±0.002) μg/mL,第28天分别为(0.457 ±0.006) 、(0.752 ±0.012) μg/mL和(1.372±0.035) μg/mL;BMSC-survivin组、BMSC组、模型组肺组织SP-A含量第7天分别为(0.718 ±0.018)、(0.669 ±0.013)和(0.581±0.027),第28天分别为(0.433±0.012)、(0.372±0.039)和(0.277±0.013)；各时间点,BMSC-survivin组TGF-β1 mRNA、MMP-9 mRNA含量较BMSC组和模型组低,BMSC组较模型组低(P＜0.05).结论 外源性的BMSC可以减轻肺纤维化,生存素基因能够抑制BMSC的凋亡,延长BMSC减轻肺纤维化的作用.     

虾青素对小鼠放射性肺纤维化的防治作用

目的 探讨虾青素对小鼠放射性肺纤维化的防治作用及其机制.方法 60只雌性C57BL/6小鼠随机分为正常组、照射组、照射+虾青素组(25mg/kg),每组20只.除正常组外,其余各组均以60Co γ射线单次16 Gy全胸照射,照射+虾青素组在照射前后每天1次灌胃各7d.照射后1、4、8、16周处死小鼠,取肺组织进行Masson染色,检测肺组织中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性、丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量和羟脯氨酸(hydroxyproline,Hyp)含量,测定血清中转化生长因子β1(transforming growth factor-beta 1,TGF-β1)含量.结果 小鼠受照射后肺纤维化严重程度随照后时间延长而加重,用虾青素处理后可明显减轻小鼠肺纤维化严重程度,提高肺组织SOD活力(P＜0.05或P＜0.01)并减少脂质过氧化产物MDA含量(P＜0.05或P＜0.01);抑制小鼠肺组织Hyp和血清中TGF-β1含量的升高(P＜0.05或P＜0.01).结论 虾青素能够有效地减轻放射性肺纤维化,其机制可能与虾青素能够提高机体的抗氧化能力、下调促纤维化因子TGF-β1表达有关.     

慢肾1号方对IgA肾病小鼠肾组织系膜区PDGF、TGFβ1因子表达的影响

[目的]研究中药慢肾1号方对IgA肾病小鼠肾小球系膜区血小板源性生长因子(PDGF)及转化生长因子β1(TGFβ1)表达的影响.[方法]采用口服小牛血清清蛋白(BSA)及酸化水感染的复合法建立小鼠实验性IgA肾病模型,用免疫组化方法检测慢肾1号方对该模型肾小球系膜区内PDGF、TGFβ1因子的表达.[结果]本实验在IgA肾病小鼠肾组织系膜区内检测到PDGF、TGFβ1表达,且与肾脏系膜区的病理损伤呈正相关,提示PDGF、TGFβ1参与并介导了IgA的发生、发展.肾高治疗组PDGF、TGFβ1的表达及病理损伤弱于模型组,组间差异具有显著性意义(P＜0.01,P＜0.05);其中模型组系膜区PDGF、TGFβ1的表达及病理损伤高于正常对照组,与各组间差异具有显著性意义(P＜0.01);正常组中PDGF、TGFβ1的表达较弱,与其他各组的差异均有显著性意义(P＜0.01);肾高治疗组PDGF、TGFβ1的表达及病理损伤弱于肾低治疗组且具有显著性意义(P＜0.05).[结论]慢肾1号方对IgA肾病小鼠肾小球系膜区PDGF、TGFβ1表达有抑制作用,而抑制系膜区PDGF、TGFβ1的表达可能是慢肾1号方治疗IgA肾病的有效机制之一.     

霉酚酸酯对小鼠肺纤维化的治疗作用

目的 探讨霉酚酸酯(mycophenolate mofetil,MMF)对博莱霉素(bleomycin,BLM)诱导的小鼠肺纤维化模型的治疗作用.方法 将36只C57BL/6小鼠完全随机分为6组:正常对照组、MMF对照组、BLM模型组及MMF干预组(分为低、中、高剂量组),每组6只.实验第1天BLM模型组、MMF干预组经气管注入BLM(6 mg/kg),正常对照组、MMF对照组则注入等量生理盐水.从实验第2天开始MMF干预组分别给予低、中、高剂量(20、60、100 mg/kg)MMF,2周后处死所有小鼠,收集肺脏标本;HE、Masson染色在组织形态学上观察肺纤维化病变情况,Aschcroft法评分;RT-PCR检测COLA1及COLA2的mRNA表达水平;免疫组化法检测肺组织TGF-β1的蛋白表达.结果 BLM诱导的肺纤维化模型构建成功.MMF高剂量干预组较BLM模型组纤维化程度减轻,COLA1、COLA2 mRNA表达及TGF-β1蛋白表达明显降低(P＜0.01);低、中剂量组与BLM模型组间,MMF对照组与正常对照组间差异无统计学意义(P＞0.05).结论 MMF能有效减轻BLM诱导的肺纤维化病变,其机制可能与下调促纤维化细胞因子TGF-β1相关.     

格列卫对肺纤维化小鼠的干预机制

目的 探讨格列卫对小鼠肺纤维化的干预机制.方法 120只C57BL/6小鼠随机分为对照组、模型组、地塞米松组和格列卫组,每组30只.采用气管内注射博莱霉素构建肺纤维化小鼠模型,分别于7、14、21 d随机处死10只动物.免疫组化检测各组肺组织转化生长因子β1(TGF-β1)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的蛋白表达,RT-PCR检测肺组织TGF-β1mRNA含量.结果 模型组各时间点TGF-β1和α-SMA的表达均较对照组显著增加,地塞米松和格列卫处理组各时间点TGF-β1和α-SMA的表达均较模型组显著降低,而地塞米松组和格列卫组的表达水平无显著差异.TGF-β1,与α-SMA表达水平呈直线正相关(r=0.251,P<0.05).结论 格列卫对博莱霉素诱导肺纤维化的抑制作用与其抑制TGF-β1和α-SMA的表达有关.     

卡托普利对博莱霉素致小鼠肺纤维化的防治作用及其机制探讨

目的 研究血管紧张素转化酶抑制剂卡托普利对博莱霉素致小鼠肺纤维化的防治作用.方法 7～10周龄雄性ICR小鼠45只分3组,分别为模型组、卡托普利组与正常对照组.模型组与卡托普利组经尾静脉注射博莱霉素10mg/(kg·d)14 d建立稳定的肺问质纤维化模型,卡托普利治疗组于注射博莱霉素前24 h予卡托普利(12.5 mg/kg·d)灌胃,并与正常ICR小鼠进行对照.第28天收获肺组织,左肺行HE和Masson染色,右肺组织应用Real-time PCR检测Collagen Ⅰ、Collagen Ⅲ、TGFβ1及结缔组织生长因子CTGF mRNA表达,行Western-blot检测CTGF蛋白表达.结果 卡托普利治疗组与模型组比较,小鼠肺泡炎、纤维化程度有所改善,但无统计学意义.卡托普利能显著下调模型组肺组织中升高的Collagen Ⅰ、TGFβ1的mRNA水平及CTGF的mRNA与蛋白水平.但Collagen Ⅲ的mRNA水平并无明显改变.结论 卡托普利有减轻BLM诱导的肺泡炎及肺纤维化程度的趋势,提示卡托普利有一定的抗肺间质纤雏化作用;抑制TGF-β1及CTGF在肺组织中的表达,可能是其作用机制之一.     

瓜蒌薤白汤对肺纤维化大鼠肺组织中转化生长因子β1表达的影响

目的探讨瓜蒌薤白汤防治肺纤维化作用及机理.方法用平阳霉素复制大鼠肺纤维化模型后,用药组每天灌胃瓜蒌薤白汤,28d后处死,观察、比较各组大鼠肺部病理组织学改变及肺组织中转化生长因子(TGF-β1)表达.结果模型组大鼠肺泡炎及纤维化程度、肺组织中TGF-β1表达均明显高于正常对照组及用药组(P＜0.05).结论瓜蒌薤白汤能明显减轻平阳霉素所致的大鼠肺泡炎及纤维化程度,抑制肺组织中TGF-β1过度表达.     

雾化吸入布地奈德对博莱霉素致大鼠肺纤维化的干预作用

目的:观察雾化吸入布地奈德对大鼠肺纤维化的干预作用并探讨其作用机制.方法:45只Wistar雌性大鼠随机分为生理盐水对照组、肺纤维化模型组、布地奈德干预组,每组15只.利用博菜霉素建立肺纤维化模型,24h后给予布地奈德干预,并分别于7、14、28天处死动物,观察其肺组织病理变化、肺系数、肺组织胶原含量及支气管肺泡灌洗液(BALF)转化生长因子-β1(TGF-β1)的表达.结果:与模型组比较,布地奈德组的肺泡炎和肺纤维化程度明显减轻,肺组织胶原含量、BALF中TGF-β1表达水平均降低(P<0.05).结论:雾化吸入布地奈德能够抑制致肺纤维化因素导致的肺部正常组织结构的破坏及肺组织胶原的沉积,从而有效阻止肺纤维化的进展.     

用RT—PCR方法动态分析博莱霉素致肺纤维化大鼠TGF—β1的基因表达

目的：探讨转化生长因子β1（TGF－β1）在肺纤维化中的作用。方法：采用博莱霉素（BLM）致肺纤维化大鼠模型,分离纯化肺泡巨噬细胞（alveolar macrophage,AM）,用RT－PCR及图像分析方法,对不同时期AM以及肺组织释放的TGF－β1进行动态观察。结果：BLM组AM和肺组织中TGF－β1 mRNA第3天即明显增加（P＜0.05和P＞0.05）,第7天达到高峰（P＜0.01）,第14－28天逐渐下降,便仍高于对照组（P＞0.05）。结论：TGF－β1 mRNA在正常大鼠及肺纤维化大鼠中均有表达,后者表达明显高于前者,肺纤维化大鼠肺内TGF－β1 mRNA可能主要来源于AM。     

生长相关蛋白43在宫内发育迟缓胎鼠脑组织中表达的研究

目的:探讨生长相关蛋白43(GAP-43)在胎儿宫内发育迟缓(IUGR)鼠脑发育过程中的表达情况.方法:钳夹一侧供应子宫的血管30 min,制成IUGR模型,不钳夹侧为对照组.通过免疫组化方法检测GAP-43在两组鼠脑中顶叶皮质分子层及海马CA1区的表达水平.结果:IUGR组胎鼠大脑顶叶皮质分子层GAP-43的表达水平显著低于对照组(P＜0.05),海马CA1区GAP-43的表达在IUGR组与对照组相比无显著差异.结论:慢性宫内缺血在导致IUGR的同时可引起胎鼠大脑顶叶皮质分子层中GAP-43的表达显著减低,间接反应出IUGR胎鼠有宫内神经系统损伤存在.     

生长相关蛋白免疫反应神经纤维在大鼠垂体前叶的分布

目的：生长相关蛋白（ＧＡＰ－４３）是神经生长再生的一种标志蛋白，研究大鼠垂体前叶ＧＡＰ－４３的阳性分布为进一步研究垂体前叶内神经可塑性创造条件。方法：免疫组织化学ＡＢＣ染色法，结果：在大鼠垂体前叶有一定数量的ＧＡＰ－４３阳性神经纤维，其分布为周边较中央多，两侧较内侧部多。结论：垂体前叶内有ＧＡＰ－４３阳性神经纤维，表明其具有再生发芽的能力。     

胰岛素样生长因子结合蛋白-3在子宫肌瘤组织中的表达及意义

目的探讨胰岛素样生长因子结合蛋白-3（IGFBP-3）与子宫肌瘤生长的关系。方法采用免疫组化法检测60例患者子宫肌层和子宫肌瘤组织IGFBP-3的表达强度。结果IGFBP-3在子宫肌瘤组织中的表达较在正常肌层中的表达减弱,在多发肌瘤的肌层中的表达较单发肌瘤者减弱。结论IGFBP-3与子宫肌瘤的发生呈负相关,测定IGFBP-3在肌瘤组织中的含量对预测肌瘤的发生、发展有重要的意义。     

大黄(庶虫)丸对肝硬化患者血清胰岛素样生长因子的影响

目的:探讨大黄■虫丸对肝硬化患者血清IGF-Ⅰ、IGF-Ⅱ、IGFBP-3的影响。方法:将100例肝炎肝硬化患者随机分为两组,对照组常规护肝对症治疗,治疗组在此基础上加用大黄■虫丸,1次3g,每天2次,疗程2个月。观察治疗前后血清ALT、AST、TBiL及IGF-Ⅰ、IGF-Ⅱ、IGFBP-3水平的变化。结果:治疗结束后治疗组血清ALT、AST、TBiL水平明显下降(P<0.05),IGF-Ⅰ、IGF-Ⅱ、IGFBP-3水平明显提高。结论:大黄■虫丸是治疗肝硬化的有效药物,可明显改善肝功能,同时改善IGF-Ⅰ、IGF-Ⅱ、IGFBP-3水平。IGF-Ⅰ、IGF-Ⅱ、IGFBP-3是有价值的肝功能测评指标。     

Dynamin对HGF-cMet内化作用的影响

目的:了解细胞信号转导过程中,内化作用如何调节HGF-cM et的信号转导,Dynam in蛋白对HGF-cM et内化作用中的影响。方法:以标记的HGF刺激体外培养的HepG2细胞,并在一组细胞中转染无功能的突变Dynam in蛋白,进行细胞摄入的对照实验。结果:突变Dynam in蛋白在37℃时降低了HGF-cM et的内化率约63%,而4℃时内化量一直维持较低水平。结论:HGF所涉及的信号转导由其受体cM et蛋白所介导,与细胞的内吞过程紧密相连,Dynam in蛋白在内化过程中起重要作用。     

胰岛素样生长因子结合蛋白在人类恶性肿瘤中的研究进展

胰岛素样生长因子(insulin—like growth factor，IGF)系统由IGF及其受体和胰岛素样生长因子结合蛋白(insulin-like growth factor binding protein，IGFBP)组成，体内外研究表明，它们调控着细胞的生长和增殖。IGF是一种强力的促细胞分裂素，其作用决定于IGF与其受体的相互作用。IGFBP是由6种与IGF高亲和力结合蛋白组成的家族，不仅具有运载蛋白的功能，而且通过IGF依赖性或非依赖性机制抑制或促进IGF的作用。近年的研究表明，IGFBP与肿瘤的发生、发展密切相关。     

胰岛素样生长因子Ⅰ

胰岛素样生长因子Ⅰ(IGF-Ⅰ)是70个氨基酸的单链多肽,其生物学活性受IGF-Ⅰ受体及胰岛素结合蛋白的调节,它可促进细胞分化,刺激RNA、DNA的合成和细胞的增殖,促进细胞的有丝分裂及分化后功能的表达,促进脂质和糖原及蛋白质的合成等。临床上可用于生长激素不敏感综合征,1型糖尿病、2型糖尿病、极度胰岛素抵抗和慢性肾衰竭、分解代谢疾病、骨质疏松等。     

纤维细胞生长因子结合蛋白在鳞癌组织新生血管形成中的作用

目的　研究鳞癌组织纤维细胞生长因子结合蛋白 ( FGF- BP) m RNA的表达及与癌组织新生血管形成的关系。方法　用 35S标记的 FGF- BP探针 ,原位杂交的方法检测 3 5例原发性鳞癌、8例转移性鳞癌及 7例正常鳞状上皮组织 FGF- BP m RNA的表达。样本组织中微血管采用特异性识别血管内皮细胞的抗 von Willebrand Factor单克隆抗体通过免疫组织化学证实。结果　正常肌肉、喉、舌及淋巴结组织中未发现 FGF- BP m RNA的表达 ,而鳞癌组织中 FGF- BP m RNA的表达明显增高。鳞癌组织浸润边缘的微血管密度明显增高 ,FGF- BP表达阳性的鳞癌组织中平均微血管计数较 FGF- BP阴性的鳞癌显著增高 ( P<0 .0 1)。结论　 FGF- BP的表达与鳞癌微血管密度密切相关 ,提示 FGF- BP可能是鳞癌组织微血管形成的重要分子     

锌与蛋白质对促进幼龄小白鼠生长的复合作用

136只小白鼠分为四组,喂以不同浓度锌与不同质的蛋白质,20～25天后观察结果,喂锌加优质蛋白质的雌鼠10天后体重比喂等量锌伴一般蛋白质雌鼠组重(P<0.05),喂至25天,四组鼠中的游泳至死亡时间,以喂锌加优质蛋白质组鼠最长(P<0.01)。