基质金属蛋白酶-9及金属蛋白酶组织抑制因子-1和感染引发胎膜早破的关系

目的 探讨感染引发胎膜早破的可能机制.方法 取20例正常择期剖宫产孕妇(无妊娠合并症、并发症,也无临产征兆)的胎膜在体外进行孵育,共分成4组:0 h组(取下后未经孵育的胎膜)、24 h组、48 h组、72 hLPS组.首先评价体外孵育胎膜的存活力,然后应用免疫组织化学方法分别测定4组胎膜的基质金属蛋白酶-9(MMP-9)及金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP-1)在蛋白水平的表达变化,最后分析72 h LPS组MMP-9/TIMP-1比值的变化.结果 体外孵育胎膜的总存活力达到(83±1.9)%,免疫组化染色结果可见0 h组及48 h组的MMP-9表达微弱,24 h组的表达较前2组增强,72 h组的表达最强,各组TIMP-1的表达无明显区别,72 h组MMP-9/TIMP-1比值上升.结论 MMP-9/TIMP-1比值升高可能是感染引发胎膜早破的机制之一.     

人胎膜体外孵育方法研究

目的探讨人胎膜体外孵育的方法,为进一步研究胎膜的结构和功能提供一种新的方法。方法取20例正常选择性剖宫产者的胎膜,在DMEM/F-12培养基中进行孵育,共孵育96 h,每24 h换液并测定胎膜的存活力,48 h后一部分胎膜分别给予细菌内毒素脂多糖(LPS)和LPS+N-乙酰半胱氨酸(NAC)刺激孵育中的胎膜24h。苏木精-伊红染色观察细胞形态,免疫组化方法检测各时间点胎膜中的基质金属酶-9(MMP-9)的表达情况,了解胎膜细胞的功能。结果20例胎膜的平均存活力24 h为87%±1.9%,48 h为85%±1.3%,72 h为83%±1.6%,96 h为37%±1.2%;前三者两两比较无统计学差异(P>0.05),前三者分别与96 h组比较均有统计学差异(P<0.05)。苏木精-伊红染色观察细胞形态变化,0~72 h细胞形态良好、饱满,72 h后细胞开始皱缩,至96 h大部分细胞死亡。免疫组化示0 h及48 h的胎膜MMP-9的表达微弱,24 h的MMP-9表达较前增强,LPS作用后MMP-9的表达明显增强,同时给予LPS+NAC的MMP-9表达又明显下降。结论DMEM/F-12培养基体外孵育胎膜是可行的,且方法简单。     

人血清白蛋白对HK-2细胞col-Ⅳ、TIMP-1、MMP-9 mRNA表达水平的影响

目的 探讨人血清白蛋白对体外培养的HK-2细胞Ⅳ型胶原(Ⅳ collagen,col-Ⅳ)、基质金属蛋白酶组织抑制剂-1(tissue inhibitor of metalloproteinase-1,TIMP-1)、基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)mRNA表达水平的影响.方法 HK-2细胞随机分为4组.A组细胞(空白对照组),未添加刺激物;B组、C组和D组细胞分别与5 mg·mL-1人血清白蛋白培养12、24、48 h.在0、12、24、48 h应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测col-Ⅳ、TIMP-1和MMP-9 mRNA的相对表达量.结果 人血清白蛋白刺激HK-2细胞可上调col-Ⅳ、TIMP-1 mRNA的表达,且随着刺激时间延长,表达水平逐渐增高.B、C、D 3组HK-2细胞col-Ⅳ、TIMP-1 mRNA表达水平均明显高于A组(均P<0.01).人血清白蛋白刺激HK-2细胞,MMP-9 mRNA的表达随着刺激时间的延长,表达水平先增高后下降.B、C 2组HK-2细胞MMP-9 mRNA表达水平均明显高于A组(均P<0.01),D组HK-2细胞MMP-9 mRNA表达水平低于A组(P<0.05).相关性分析结果显示,TIMP-1 mRNA表达与col-Ⅳ mRNA表达呈正相关(r=0.987,P<0.05),MMP-9 mRNA表达与col-Ⅳ mRNA表达无关(r=0.146,P>0.05).结论 人血清白蛋白刺激HK-2细胞可能通过促进col-Ⅳ的合成及上调TIMP-1、下调MMP-9使细胞外基质积聚,参与肾间质纤维化.     

EGFR信号通路调控结肠癌Caco-2细胞侵袭转移的分子机制

目的探讨EGFR信号通路与人结肠癌Caco-2细胞增殖和侵袭转移的关系及其调控分子机制。方法采用MTT法和Boyden小室体外侵袭实验检测Caco-2细胞增殖和体外侵袭能力;采用RT-PCR方法检测MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2基因转录水平;采用W estern b lot法检测P-EGFR和P-ERK蛋白表达。结果外源性EGF(10μg/L)增加P-EGFR和P-ERK蛋白表达同时使24 h细胞生长率提高了23.35%(P<0.01),使过膜细胞数由(208±3)上升到(241±5)(P<0.01)。当用AG1478(20μmol/L)和PD98059(40μmol/L)分别阻断EGFR和ERK/MAPK后,EGF作用消失,Caco-2细胞生长明显抑制(P<0.01),但无时间效应关系;Caco-2细胞体外侵袭力明显减弱(P<0.01)。RT-PCR测定显示,EGF能增加Caco-2细胞MMP-2、MMP-9 mRNA的表达和减少TIMP-1和TIMP-2 mRNA的表达;而AG1478能逆转EGF的作用,使MMP-2、MMP-9 mRNA的表达下降,TIMP-1和TIMP-2 mRNA的表达上升,结果MMP-2/TIMP-2比值和MMP-9/TIMP-1比值均下降(P<0.01)。结论EGFR-ERK/MAPK信号通路通过改变基质金属蛋白酶和其抑制剂mRNA比值调控人结肠癌细胞侵袭转移能力。     

鳖甲煎丸对人肾小球系膜细胞基质金属蛋白酶-9及其抑制因子表达的影响

目的探讨鳖甲煎丸对人肾小球系膜细胞(HMC)基质金属蛋白酶系统的影响。方法应用细胞培养技术,进行HMC培养,采取血清药理学方法,制备鳖甲煎丸药物血清,利用脂多糖(LPS)为刺激因子,应用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测基质金属蛋白酶-9(MMP-9)及其抑制物金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP-1)的表达。结果各组MMP-9的含量比较无明显差异(P>0.05);LPS组TIMP-1的含量与空白组比较明显升高(P<0.01);鳖甲煎丸组与空白组比较,TIMP-1含量明显降低(P<0.05);脂甲组、脂坦组与LPS组比较,TIMP-1表达明显降低(P<0.01)。结论LPS具有促进TIMP-1表达的作用,对MCsMMP-9作用较小。鳖甲煎丸及缬沙坦药物血清具有抑制正常培养条件及LPS刺激条件下TIMP-1表达的作用,这可能是其延缓肾小球硬化的部分作用机制。     

水蛭对糖尿病肾病大鼠尿微量白蛋白影响的机制

目的 通过研究水蛭对糖尿病大鼠尿微量白蛋白及肾脏血清转化生长因子-β1(TGF-β1)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP-1)表达的影响,探讨水蛭对糖尿病肾病大鼠肾脏早期病变的防治作用及可能机制.方法 清洁级SD雄性大鼠40只随机分成A(正常)组、B(模型)组、C(水蛭)组、D(替米沙坦)组.所有组别灌胃8周后处死.观察肾脏指数(KI)、血糖(BG)、血肌酐(Scr)、血尿素氮(BUN)、24 h尿微量白蛋白(24 h mAlb),免疫组化检测TGF-β1、MMP-9、TIMP-1的表达,电镜下观察肾脏超微结构.结果 C组、D组与B组比较KI降低(P<0.01),BG略有下降但无统计学意义,Scr降低(P<0.01),BUN降低(P<0.01), 24 h mAlb显著减少(P<0.01);C组、D组与B组比较,MMP-9的表达显著增多(P<0.01),TGF-β1、TIMP-1的表达显著减少(P<0.01).C组、D组与B组比较,电镜观察显示B组大鼠肾小球毛细血管基底膜明显增厚,上皮细胞足突部分融合,系膜区明显增宽并有细胞增生.C组和D组基底膜增厚不明显,上皮细胞足突融合不明显,系膜区轻度增宽细胞增生不明显.结论 水蛭可显著减轻糖尿病肾病大鼠早期微量白蛋白尿,可能与下调TGF-β1的表达及调整MMP9/TIMP-1的平衡有关.     

哮喘豚鼠MMP-9、TIMP-1的表达及与气道炎症、重塑的关系

目的:观察实验性哮喘豚鼠BALF中基质金属蛋白酶-9(MMP-9)及其抑制剂(TIMP-1)的表达;观察哮喘豚鼠气道平滑肌MMP-9、TIMP-1的表达及气道平滑肌面积的变化。方法:用免疫组化方法结合显微图像分析测定气道平滑肌MMP-9、TIMP-1免疫反应的变化及气道平滑肌厚度;BALF中细胞总数;MMP-9、TIMP-1阳性细胞百分比。结果:MMP-9、TIMP-1广泛分布于气道平滑肌;哮喘组MMP-9平均灰度值明显低于对照组(P<0.01);哮喘组TIMP-1平均灰度值明显低于对照组(P<0.01);哮喘组气道平滑肌厚度明显高于对照组(P<0.05);BALF中哮喘组嗜酸粒细胞明显高于对照组(P<0.05);巨噬细胞、淋巴细胞、嗜酸粒细胞、中性粒细胞MMP-9、TIMP-1均呈阳性;且哮喘组MMP-9及TIMP-1阳性细胞百分比比对照组MMP-9及TIMP-1明显增高(P<0.01)。结论:MMP-9、TIMP-1可能与哮喘气道炎症及气道重塑有关。     

维甲酸对弹性蛋白酶诱导的大鼠肺气肿的干预作用及其与MMP-9和TIMP-1变化之间的关系

目的 观察维甲酸对弹性蛋白酶诱导的大鼠肺气肿的干预作用及其与MMP-9和TIMP-1变化之间的关系,探讨维甲酸可能的作用机制.方法 雄性Wistar大鼠21只,随机分为3组:对照组、模型组和维甲酸组,每组7只.模型组及RA组大鼠气管内滴入弹性蛋白酶复制肺气肿模型,RA组同时给予RA腹腔注射进行干预.25d后,光镜观察各组大鼠肺组织的病理改变,计算机辅助图像分析系统测量肺组织石蜡切片中平均肺泡数、平均肺泡面积、平均内衬间隔,免疫组化方法观察各组大鼠肺组织基质金属蛋白酶(MMP-9)及其组织抑制因子(TIMP-1)的蛋白表达情况.结果 模型组与对照组比较,平均内衬间隔(MLI)、平均肺泡面积(MAA)增加(P<0.01),平均肺泡数(MAN)减少(P<0.01).模型组MMP-9和TIMP-1的表达与对照组比较明显增强(P<0.01),且MMP-9/TIMP-1比值失衡;RA组与模型组比较.平均内衬间隔(MLI)、平均肺泡面积(MAA)减少(P<0.01)、平均肺泡数(MAN)增加(P<0.01).维甲酸组MMP-9和TIMP-1的表达与模型组比较明显减少(P<0.01).结论 维甲酸能够抑制弹性蛋白酶诱导的肺气肿的发生和发展,可使肺气肿时增多的MMP-9、TIMP-1下降,使其比值趋于平衡.     

卡维地洛对心肌梗死大鼠心肌基质金属蛋白酶及其组织抑制因子表达的影响

目的:明确卡维地洛对心肌梗死(心梗)后大鼠心肌基质金属蛋白酶(MMP)及其组织抑制因子表达的影响.方法:建立大鼠急性心梗模型,成模后用药组(n=12)予卡维地洛(10 mg·kg-1·d-1)灌胃,用药42 d.未用药组(n=12)予等量生理盐水灌胃.另设假手术组(n=9)为对照.检测各组大鼠心功能和血流动力学参数,酶谱法测定心室肌MMP-2、MMP-9活性,免疫组化和荧光定量PCR检测心室肌MMP-2、MMP-9、金属蛋白酶组织抑制因子(TIMP-2)蛋白和mRNA表达以及TIMP-1、IL-1β、TNF-α mRNA表达.结果:与假手术组比较,心梗组左室舒张末压(LVEDP)升高、左室压最大上升速率( dp/dtmax)和最大下降速率(-dp/dtmax)均降低(P<0.01),MMP-2、MMP-9活性增强(P<0.01),MMP-2、MMP-9、TIMP-2蛋白表达增多,MMP-2、MMP-9、TIMP-2、IL-1β mRNA升高(P<0.05),TIMP-1、TNF-α mRNA升高(P<0.01);与心梗未用药组比较,用药组LVEDP降低(P<0.01), dp/dtmax、-dp/dtmax升高(P<0.05),MMP-2、 MMP-9的活性降低(P<0.01).MMP-2、MMP-9、TIMP-2蛋白和mRNA表达减少以及TIMP-1、IL-1β、TNF-α mRNA表达减少.结论:卡维地洛在显著降低MMP-2、MMP-9活性的同时也轻度降低了TIMPs表达;它还可以通过减少IL-1β和TNF-α基因表达,起到降低MMPs分泌的作用,从而预防和逆转心梗后心室重构,改善心功能.     

子宫内膜异位症合并不孕患者血清中基质金属蛋白酶-9、基质金属蛋白酶抑制剂-1、血管内皮生长因子可溶性受体、胰岛素生长因子-1、单核细胞趋化蛋白-1表达水平及临床意义

目的:探讨子宫内膜异位症(EM)合并不孕患者血清中基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)、血管内皮生长因子可溶性受体(sflt-1)、胰岛素生长因子-1(IGF-1)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)表达水平及临床意义。方法:收集50例单纯EM患者(单纯EM组)、35例EM合并不孕患者(EM合并不孕组)和30例健康体检(对照组)的育龄期女性作为受试对象。测定对比各组受试者血清MMP-9、TIMP-1、sflt-1、IGF-1、MCP-1水平及MMP-9/TIMP-1值,Pearson分析法分析各指标与EM合并不孕患者r-AFS分期相关性。结果:三组受试者排卵期血清MMP-9、TIMP-1、sflt-1、IGF-1、MCP-1水平及MMP-9/TIMP-1值间比较差异均具有统计学意义(P<0.05)。组间比较,单纯EM组MMP-9、IGF-1、MCP-1水平及MMP-9/TIMP-1值明显高于对照组,TIMP-1、sflt-1水平明显低于对照组(P<0.05);EM合并不孕组MMP-9、IGF-1、MCP-1水平及MMP-9/TIMP-1值明显高于单纯EM组和对照组,TIMP-1、sflt-1水平明显低于单纯EM组和对照组(P<0.05)。血清MMP-9、IGF-1、MCP-1水平及MMP-9/TIMP-1值与EM合并不孕患者r-AFS分期呈显著正相关(P<0.01),TIMP-1、sflt-1水平与r-AFS分期呈显著负相关(P<0.01)。结论:女性排卵期血清MMP-9、TIMP-1、sflt-1、IGF-1、MCP-1水平及MMP-9/TIMP-1值变化与EM及EM所致不孕发病有密切关系,临床可结合排卵期血清MMP-9、TIMP-1、sflt-1、IGF-1、MCP-1表达水平测定,更好的诊断EM合并不孕病情及评价预后。     

南京地区冬季蔬菜中NO_2~－、NO_3~－含量及卫生学对策

测定南京地区冬季２８种蔬菜中ＮＯ２－、ＮＯ３－含量的结果表明：腌制蔬莱中ＮＯ２－含量平均为新鲜蔬菜中的１６倍；南京地区居民冬季大量食用的大品种蔬菜中ＮＯ２－、ＮＯ３－含量远高于其它蔬菜；ＮＯ２－的ＡＤＩ超出ＷＨＯ规定。鉴此，本文提出了卫生学对策。     

老老年高血压的特殊性及诊疗新进展

高血压是老老年群体中常见的慢性病,患病率高,并发症多,危害性大,是心血管疾病重要的危险因素。它的临床表现和治疗标准与中青年高血压患者不同,不同个体的治疗方案也不相同。通过对近几年老老年高血压的诊断和治疗新进展的了解,重点探讨了老年高血压的治疗特点,坚持个体化用药,从整体考虑,根据老年人用药的特殊性和复杂性,选择最优化的治疗方案,降低药源性损害,最大程度地降低高血压的危害。     

青少年儿童近视成因及防控进展

众所周知,近视可由遗传、外界环境、不良用眼习惯等综合性因素导致,主要预防措施为定期进行视力筛查,并及时对症治疗,与此同时养成良好用眼习惯,保持充足睡眠,保证一定运动量及营养均衡。若判定为近视,可通过光学镜片、西药治疗及中医治疗等方式延缓度数增加,若以上方式均无效,还可通过手术方式进行矫正。目前,近视给青少年的健康及成长带来的重大影响已成为公论,故我国近视低龄化问题也越发受到社会各界的关注。针对社会人群而言,了解近视成因,对精准预防与有效控制格外重要。本文对近年来文献报道进行总结,从近视形成原因、预防、筛查及控制措施等方面进行综述。     

转型国家和地区的腐败与反腐败现象研究

腐败是一国政治、经济、文化、司法情况的侧面反映.俄罗斯、韩国、台湾等转型国家和地区民主政治发展中腐败放量增加,既有腐败的一般性原因.更有转型期制度约束缺失下政治分权导致腐败切入点分散化、政府主导型市场经济下权力设租和寻租恶性循环、传统政治道德体系解体下公职人员从政心理发生裂变等特定因素的推助.我们必须看到导致腐败的因素会随着问题被暴露以及社会寻求完善的民主与法制而发生改变.民众的民主监督技能也会因民主的教育而大大提高.对于转型国家和地区民主化发展中不断上演的政治腐败和社会动乱,我们不能在一种幸灾乐祸的心态下固步自封,停止民主政治发展的探索,更不能背离民主.需要借鉴当代民主理论的研究成果和民主实践的经验与教训.顺应本国的国情和社会发展的客观需要.正确制定我国民主政治发展的方略.有效遏制权力腐败.     

澳大利亚GMP与我国GMP的比较分析

目的:对澳大利亚和我国GMP管理进行对比分析和探讨.方法:借鉴澳大利亚TGA的药品质量监管经验,对GMP体系、现场检查和跟踪检查进行全面阐述,并与我国情况的比较分析.结果与结论:我国GMP管理体系存在严重缺陷,必须进行改进以适应GMP管理国际一体化的发展趋势,促进我国医药企业进入国际市场.     

昆明小鼠完成放射状水迷宫和嗅觉辨别任务时年龄和性别的差异

目的 探讨昆明鼠的空间和非空间学习记忆能力在年龄和性别上的差异。方法 应用放射状水迷宫试验和嗅觉辨别记忆试验，分别记录小鼠寻找逃生平台的错误数和发现被掩埋巧克力的时间。结果 在放射状水迷宫试验中，成年鼠的空间学习记忆能力较幼鼠好，进入衰老进程后，小鼠空间学习记忆能力逐渐衰退；在嗅觉辨别记忆试验中，幼鼠的嗅觉辨别功能较成年与老年鼠好，其中幼年雄鼠的嗅觉功能最好。成年鼠及老年鼠之间无年龄差异，而有明显的性别差异，表现为雌鼠的嗅觉功能优于雄鼠。结论 在发育和衰老过程中，昆明小鼠的空间性和非空间性学习记忆能力存在非同步性年龄、性别差异。