基于数据分析的NFASC与胃癌预后的关系及相关机制

目的:探讨NFASC在胃癌中的预后意义及相关机制。方法:从人类肿瘤相关基因表达汇编（Gene Expression Omibus，GEO）数据库中下载GSE62254胃癌数据集，分析NFASC表达与胃癌临床病理学参数的相关性及对预后的影响；利用Cox模型分析影响胃癌患者总生存期的因素并建立预后预测列线图模型；采用基因集富集分析(GSEA)方法预测NFASC参与的信号通路。结果: NFASC高表达的胃癌患者总生存时间（overall survival，OS）更短（P<0.05），NFASC表达与患者年龄、T分期及Lauren分型相关（P均<0.05）。NFASC高表达富集了TGF-β信号通路、mTOR信号通路、MAPK信号通路和Wnt信号通路等与肿瘤细胞增殖密切相关的通路（P<0.05，FDR<0.25）。结论: NFASC是胃癌的不良预后因素，其表达可能成为胃癌预后预测生物标志物。     

携带靶向沉默LSD1基因表达shRNA慢病毒载体的构建与鉴定

目的:构建慢病毒干扰LSD1表达的载体并鉴定。方法:设计并合成3对针对LSD1基因的shRNA链,退火形成双链,与酶切的质粒连接,转化DH5a菌株,提取质粒,进行酶切鉴定和测序分析。脂质体法转染人胃癌MKN-28细胞,通过荧光倒置显微镜判定转染效率,并通过real time-PCR法检测细胞中LSD1基因的表达水平。结果:经酶切鉴定筛选出的重组质粒测序结果与目的序列相同,重组质粒构建成功;转染胃癌MKN-28细胞后,LSD1基因在mRNA水平的表达降低。结论:成功构建了靶向LSD1基因的shRNA慢病毒载体,并筛选出1种对LSD1基因有显著抑制作用的shRNA。     

miR-103与胃癌多药耐药作用机制探讨

目的 既往研究肿瘤耐药均集中在DNA水平,而DNA又影响mRNA及蛋白质表达.但是mRNA与编码蛋白质的表达并不成比例,而非编码RNA恰好能解释两者之间的不平衡.非编码RNA即微小RNA(microRNA,miRNA),是一类内源性短链非编码小分子核糖核苷酸,长度约18~25个核糖核苷酸,是转录后基因表达调节的关键分子,参与胃癌的发生发展.本研究旨在探讨miR-103在胃癌多药耐药中作用及其分子机制.方法 miRNA芯片筛选SGC7901/ADR及SGC7901细胞差异表达miRNA,应用qRT-PCR验证miR-103表达;将miR-103的拟似物及抑制物分别转染SGC7901/ADR及SGC7901细胞,MTT法检测转染前后对多柔比星敏感性变化;蛋白质印迹法检测miR-103对caveolin-1表达的影响.结果 miR-103在SGC7901/ADR细胞中表达(0.32±0.04)显著低于SGC7901细胞.miR-103拟似物转染SGC7901/ADR细胞后对多柔比星的敏感性较对照组显著提高,IC50由(18.83±0.32) μg/mL下降到(4.54±0.29) μg/mL,t=1.04,P<0.05;而miR-103抑制物转染SGC7901细胞后对多柔比星的敏感性显著降低,IC50由(1.65±0.03) μg/mL上升到(15.27±0.26) μg/mL,t=1.25,P<0.05.miR-103靶向作用于caveolin-1的3'-UTR,并在转录后水平负向调控caveolin-1表达.结论 miR-103通过靶向负调控caveolin-1表达,增加SGC7901/ADR细胞对多柔比星敏感性,从而逆转胃癌多药耐药.     

PI3K/Akt抑制剂LY294002对胃癌细胞化疗增敏作用的探讨

目的 探讨PI3K/Akt特异性抑制剂LY294002与化疗药物5-Fu及奥沙利铂联合使用对3种胃癌细胞系(MGC803、BGC823和SGC7901)化疗效果的影响.方法 将PI3K/Akt特异性抑制剂LY294002联合化疗药物5-Fu及奥沙利铂作用于3种胃癌细胞系,MTT法检测单独使用5-Fu、奥沙利铂及联合LY294002对体外培养的3种胃癌细胞系的增殖抑制作用,流式细胞术检测细胞凋亡.结果 联合LY294002作用后,5-Fu、奥沙利铂对3种胃癌细胞系的增殖抑制作用明显增强(P<0.05),且凋亡率显著提高(P<0.05).结论结果 LY294002能有效提高化疗药物5-Fu、奥沙利铂体外对胃癌细胞的增殖抑制作用,抑制PI3K/Akt信号转导通路可显著提高胃癌的化疗疗效.     

急性白血病血清与白细胞内乳酸脱氢酶及同工酶的检测意义

急性白血病(急白)患者血清乳酸脱氢酶(SLDH)高于健康人,LDH 同工酶谱异常,国内外均有报道。但是,白血病白细胞内LDH 同工酶国外报告较少,国内未见报道。本文作者在检测急白SLDH 及     

老年急性白血病Survivin、Cox-2蛋白的表达

目的 探讨老年急性白血病(AL)骨髓细胞中Survivin、Cox-2蛋白的表达及其相关性.方法 采用免疫组化S-P法检测35例老年AL患者治疗前后骨髓细胞中Survivin、Cox-2蛋白的表达情况.结果 病例组、急性非淋巴细胞白血病(ANLL)组、急性淋巴细胞白血病(ALL)组Survivin、Cox-2蛋白阳性表达率均明显高于对照组,差异有显著性(均P＜0.01);完全缓解(CR)者Survivin、Cox-2蛋白阳性表达率低于部分缓解(PR)、未缓解(NR)者,差异有显著性(P＜0.01);Spearman秩和相关分析显示Survivin、Cox-2蛋白表达呈显著正相关(rs=0.495,P＜0.01).结论 Survivin、Cox-2均与老年AL的发生、发展、疗效及预后密切相关,且两者有一定的协同作用.     

Grb2-相关蛋白2参与RANKL诱导的乳腺癌细胞MDA-MB-231迁移的机制研究

目的探讨Grb2-相关蛋白2(Gab2)在核因子-κB受体活化因子配体(RANKL)诱导的乳腺癌细胞MDA-MB-213迁移中的作用。方法流式细胞术检测MDA-MB-231细胞表面RANK的表达。Transwell法测定RANKL刺激后细胞迁移能力的改变。免疫沉降及Western-blot检测RANKL刺激后p-Tyr-Gab2和Gab2的表达。结果 MDA-MB-231细胞表达RANK蛋白,RANKL诱导MDA-MB-231细胞迁移能力增强。RANKL刺激后MDA-MB-231细胞p-Tyr-Gab2表达一过性升高。结论 Gab2参与RANKL诱导的乳腺癌细胞MDA-MB-231迁移。     

局部复发直肠癌综合治疗的时机及合理选择

随着原发性直肠癌治疗手段的不断改进,尤其是全直肠系膜切除和新辅助治疗的出现,直肠癌局部复发率显著降低。但由于受到病人曾经接受过的相关治疗的限制,局部复发直肠癌(locally recurrent rectal cancer,LRRC)的治疗一直以来是备受争议的问题。手术是其主要的治疗手段,但仅有少数病人可以获得根治。因此,针对不同治疗史的病人采取合理有效的多学科综合治疗模式是LRRC治疗的重要原则,而综合治疗时机及合理选择已成为目前研究的热点。     

P13K／Akt信号传导通路在大鼠骨髓来源内皮祖细胞分化中作用的研究

目的探讨P13K／Akt在内皮祖细胞（EPC）分化中的作用。方法密度梯度离心法分离大鼠骨髓EPC,经差速法接种2次贴壁细胞：采用激光共聚焦显微镜鉴定培养5dEPC;Westemblot检测第O、3、7、10、14天EPC中AC133、vWF、P13K、Akt蛋白表达水平;并在第3、7、10天加入LY294002作用12h,用RT—PCR检测AC133、vWFmRNA水平,Westernb10t检测p—Akt水平。结果经Westemblot检测,AC133在0d表达最强,第3天有弱表达,第7、10、14天几乎无表达（P〈0．05）：vWF表达强度没有明显变化（P〉0．05）;P13K和Akt在0d表达最强,第3天表达稍弱,随培养时间的延长表达逐渐减弱：LY294002作用12h后,第7天和第10天AC133mRNA表达水平低于第3天的水平（P〈0．05）;vWF的表达没有明显变化（P〉0．05）;p—Akt蛋白表达逐渐下降,第10天与第3天相比差异有统计学意义（P〈0．05）。结论EPC分化为内皮细胞过程中．可能有P13K／Akt的参与,