新型伊立替康衍生物ZBH-1208的体外抗肿瘤活性及机制研究

目的研究新型伊立替康衍生物ZBH-1208体外对肿瘤细胞的生长抑制作用并初步探讨其作用机制。方法采用四甲基偶氮唑盐比色(MTT)法检测分析ZBH-1208对人宫颈癌HeLa细胞、人非小细胞肺癌A549细胞、人小细胞肺癌NCI-H446细胞、人乳腺癌MCF-7细胞、人结肠癌SW1116细胞、人胃腺癌SGC-7901细胞、人肝癌SMMC-7721细胞及人胚肾293细胞的生长抑制作用,计算IC50值;流式细胞术检测ZBH-1208对肿瘤细胞周期及活化Caspase-3表达的影响。结果 ZBH-1208对肿瘤细胞的生长具有抑制作用,呈剂量-时间依赖关系。ZBH-1208作用各肿瘤细胞后IC50值在0.002μmol/L-0.265μmol/L之间,而对照组伊立替康(CPT-11)的IC50值在0.464μmol/L-52.111μmol/L之间,两者相比较差异均有统计学意义(P0.05)。流式细胞术检测结果显示,ZBH-1208诱导肿瘤细胞发生G2/M期阻滞,百分比到达90%以上;并且诱导活化形式Caspase-3表达增加。结论与CPT-11相比,新型化合物ZBH-1208具有高效低毒、起效快的特点,可使肿瘤细胞发生细胞周期阻滞,并诱导肿瘤细胞凋亡,具有进一步研究开发的价值。     

上调HCCR-2基因表达对乳腺癌细胞增殖与凋亡的影响

目的利用细胞转基因技术探讨人宫颈癌癌基因-2(HCCR-2)对人乳腺癌细胞增殖、凋亡的影响及其可能的分子机制。方法经脂质体介导将含有HCCR-2真核表达质粒转染人乳腺癌MCF-7细胞株,采用G418筛选阳性细胞克隆及Western blot鉴定;Western blot检测阳性细胞克隆Bcl-2、Bax蛋白表达改变;流式细胞仪检测细胞凋亡率;噻唑盐(MTT)比色法检测阳性细胞克隆的增殖活性。结果成功建立高表达HCCR-2的阳性MCF-7细胞克隆(M-23),并证实其Bcl-2蛋白表达与细胞增殖活性均显著增高,而Bax蛋白表达与细胞凋亡显著降低。结论上调MCF-7细胞HCCR-2基因后,细胞增殖活性增加,细胞凋亡降低,其作用机制与Bcl-2表达增加而Bax表达降低。     

慢性乙型肝炎327例肝组织病理与临床分析

目的 :探讨慢性乙型肝炎患者临床与肝脏组织病理改变关系。方法 :对慢性乙型肝炎327例患者行肝脏穿刺取肝脏组织作病理检查,并对实验室、超声波和临床有关资料进行分析。结果:(1)随着ALT的逐渐升高,肝脏炎症分级和纤维化分期也随之升高;(2)肝组织纤维化分期随着GLB的增高有加重趋势;(3)HBV DNA定量在103~105和105~107两组肝脏纤维化程度较HBV DNA定量<103和>107两组有加重趋势;(4)超声检测脾脏,其脾斜径随着肝组织纤维化程度加重(S1~S4)而增加,各组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:慢性乙型肝炎病情活动度的临床诊断与病理诊断的存在一定差异,故无禁忌证者应行肝活检,特别是对于中、重度的患者,更应该行肝穿活检,以明确诊断评估预后。     

微小RNA-21对宫颈癌HeLa细胞程序性细胞死亡4蛋白表达及细胞增殖的影响

［摘要］目的: 探讨微小RNA-21(miR-21)对宫颈癌HeLa细胞中程序性细胞死亡4(programmed cell death, PDCD4)基因表达及细胞增殖的影响,为应用miR-21对宫颈癌进行基因治疗提供一定的依据。方法: 用脂质体转染的方法,将pre-miR-21、pre-miR-21阴性对照、anti-miR-21、anti-miR-21阴性对照瞬时转染HeLa细胞。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测miR-21相对表达量;MTT法检测宫颈癌HeLa细胞增殖的变化;蛋白质印迹法检测PDCD4蛋白表达情况;荧光素酶报告基因法验证miR-21的靶位点。 结果: pre-miR-21上调miR-21的表达,抑制PDCD4蛋白表达,促进HeLa细胞增殖;而anti-miR-21下调miR-21的表达,增加PDCD4蛋白的表达,抑制HeLa细胞增殖。pMIR-Luc-PDCD4-3′UTR与pre-miR-21共转染后,荧光素酶活性下降,而与anti-miR-21共转染后,荧光素酶活性升高。 结论: PDCD4基因是miR-21的靶基因;miR-21通过调节PDCD4基因的表达调控细胞增殖。     

黑色素和大豆皂甙混合后对大鼠小肠葡萄糖吸收抑制机理的研究

黑色素和大豆皂甙以不同比例混合后 ,经雄性大鼠体外循环实验证实 :此混合物可以抑制大鼠小肠对葡萄糖的吸收 ,进一步通过其量 效关系初步探讨得出 :黑色素和大豆皂甙以 1∶5 0的比例混合时 ,大鼠小肠对葡萄糖的吸收有最好的阻碍作用〔1〕。材料　黑色素、大豆皂甙、缓冲液 (ｐＨ =7 4的Ｈａｎｋ液 )、环流液 (10 0 0 μｍｏｌ/Ｌ葡萄糖液 ,临用现配 )、麻醉剂 (苯巴比妥 )。方法　取雄性大鼠 72只 ,体重 10 0～ 12 0 ｇ,随机分组 ,每组 8只 ,用苯巴比妥麻醉后开腹 ,切掉与胃相连的 3ｃｍ小肠后将其后 15ｃｍ小肠剪下 ,用Ｈａｎｋ冲洗剪下小…     

主诉青霉素过敏患者的临床再验证

目的分析246例主诉青霉素阳性患者的真实性。方法对246例主诉青霉素皮试阳性或有应用过敏史患者运用从斑贴、点刺到不同浓度的皮内实验为患者进行重新测试。结果246例重新青霉素皮试阴性170例,阳性76例,分别占69．11％,30．89％。结论青霉素假阳性率很高,梯度试验安全、可靠,适用于鉴别阳性史患者的真实性。     

胰腺癌组织中Smad4、上皮型钙黏蛋白及β-连环蛋白的表达及临床意义

目的:观察Smad4、上皮型钙黏蛋白(E-cadherin)及β-连环蛋白(β-catenin)在胰腺癌组织中的表达,探讨Smad4在胰腺癌侵袭和转移过程中的作用机制.方法:构建胰腺癌组织芯片,采用免疫组织化学方法检测Smad4、E-cadherin及β-连环蛋白表达情况,并与临床病理资料作对照分析.结果:88例胰腺导...     

非抑制型离于色谱法测定饮用水中的多种离子

在卫生检验工作中,生活饮用水及矿泉水中微量元素的测定是一项重要的工作,以往均采用原子吸收或原子发射方法测定,几种离子之间还产生相互干扰。非抑制型离子色谱法测定阳离子能充分发挥色谱的分离分析功能,各离子间不产生干扰,一次进样可以同时分析多种离子。1 材料与方法1.1 仪器和试剂 液相色谱仪:美国Weters公司432电导检测器,800色谱工作站,1L聚丙烯容量瓶,超声彼脱气装置。1.2 色谱条件 色谱柱:Waters IC Pak·C M/D 3.9×150mm 流动相:0.1mmol/l EDTA/3mmol/1HNO3　1.0ml/min 进样量:50μg;检测器灵敏度0.00021.3 实验方法 用超纯水配制标准溶液和流动相,流动相经0.45μm孔滤膜过滤并超声波脱气。 氢氧化钾、氯化钠、氯化钾、硝酸镁、硝酸钙均为优级纯。分     

转染Smad7基因的大鼠肾系膜细胞uPA及PAI-1表达的改变

目的通过对大鼠肾小球系膜细胞(mesangial cell，MsC)转染Smad7基因，观察转染阳性细胞克隆uPA及PAI-1表达的改变，以进一步阐明Smad7阻断组织纤维化过程的作用机制。方法经脂质体介导将含有Smad7重组表达质粒转染大鼠MsC，用G418筛选及PT-PCR、Western blot法鉴定；又分别采用RT-PCR与Western blot法，检测转染阳性细胞克隆uPA及PAI-1表达改变。结果成功建立高表达Smad7的阳性MsC克隆(S-22、S-26)，并证实其uPA mRNA及蛋白表达明显增加，而PAI-1 mRNA及其蛋白的表达显著下降。结论Smad7可能通过增强组织内uPA酶的生成和减少PAI-1的合成而减轻组织纤维化进展。