Smad4基因对胰腺癌细胞E-cadherin、β-catenin表达及增殖的影响

目的探讨Smad4基因对人胰腺癌细胞BxPC3 E-cadherin、β-catenin表达及细胞增殖的影响,为试图运用Smad4对胰腺癌进行基因治疗提供实验依据。方法经脂质体介导将含有Smad4重组表达质粒转染人胰腺癌细胞Bx-PC3,用G418筛选及RT-PCR、Western blot鉴定;分别采用RT-PCR和Western blot检测转染阳性细胞克隆E-cadherin、β-catenin表达改变;又分别采用噻唑盐（MTT）比色法及5-溴-2-脱氧尿苷（BrdU）掺入法检测阳性细胞克隆的增殖活性。结果成功建立表达Smad4的阳性BxPC3克隆（S4-8,S4-23）,并证实其E-cadherin、β-catenin mRNA及蛋白表达均明显升高。MTT法和BrdU掺入法显示,S4-8与S4-23细胞克隆增殖显著降低。结论 Smad4可增加胰腺癌细胞E-cadherin及β-catenin的表达并抑制其增殖,Smad4可能对胰腺癌具有基因治疗的效果。     

上皮间质转化标记物在大肠癌中的表达及意义

目的:探讨上皮间质转化(EMT)标志物在大肠癌组织中的表达情况及与大肠癌恶性程度的关系.方法:采用免疫组化SP法检测131例大肠癌组织及癌旁组织EMT标志物上皮细胞钙粘蛋白(E-cadherin)、β-连环蛋白(β-catenin)、波形蛋白(Vimentin)的表达情况.结果:大肠癌组织E-cadherin、β-catenin的阳性表达率明显低于癌旁组织,Vimentin的阳性表达率明显高于癌旁组织(P＜0.05).低分化大肠癌组织E-cadherin、β-catenin的阳性表达率明显低于高-中分化,Vimentin的阳性表达率明显高于高-中分化,不同分化程度大肠癌比较差异具有统计学意义(P＜0.05).结论:EMT与大肠癌的发生发展及分化程度有关.     

连环蛋白p120在人胰腺癌组织中的表达及其意义

目的:了解胰腺癌组织中连环蛋白p120(p120ctn)及E-钙黏蛋白(E-cadherin)表达情况,分析它们与胰腺癌临床病理特征及预后的关系.方法:采用免疫组化技术检测53例胰腺癌及癌旁胰腺组织的p120ctn、E-cadherin和CD34表达情况,结合临床资料利用SPSS软件行统计学分析.结果:53例胰腺癌组织...     

TGF-β1对胰腺癌细胞生长的影响及TGF-β1、Smad4和p21waf1在胰腺癌组织中的表达

目的观察TGF-β1通路中TGF-β1、Smad4及p21wafl的表达关系及它们在胰腺癌中的可能作用机制.方法 用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法观察TGF-β1对人胰腺癌细胞系JF-305增殖作用的影响;通过免疫组化技术检测45份人石蜡包埋胰腺癌组织以及20份胰腺良性病变中TGF-β1、Smad4和p211wal蛋白表达.结果 TGF-β1早期抑制胰腺癌细胞系JF-305增殖,作用与剂量成正比.45份胰腺癌组织中TGF-β1、Smad4和p21waf1阳性率分别为66.67%(30/45)、60%(27/45)和37.78%(17/45),与良性对照组阳性率相比差异显著,TGF-β1与肿瘤转移相关(P＜0.05),Smad4与肿瘤分化程度相关(P＜0.05).结论外源TGF-β1早期可以显著抑制胰腺癌细胞系JF-305的生长;胰腺癌组织中Smad4表达降低,其下游基因p21wal基因表达随之降低,二者有相关性,但TGF-β1表达增高.     

β-catenin、Smad4在胰腺癌发生中的作用

目的探讨β-catenin、Smad4在胰腺癌发生、发展、转移、浸润过程中的作用。方法应用免疫组化方法检测β-catenin、Smad4在正常胰腺、胰腺癌组织中的表达。结果β-catenin在胰腺癌中的异常表达率为68.33%,明显高于正常组织(0),异常表达与年龄、性别、病理分化程度无关;与有无淋巴结转移、临床分期相关,有淋巴结转移的异常表达率明显高于无淋巴结转移,Ⅲ+Ⅳ期的异常表达率明显高于Ⅰ+Ⅱ期。Smad4在胰腺癌的阳性表达(33/60)明显低于正常组织(17/20),阳性表达与年龄、性别、病理分化程度、有无淋巴结转移、临床分期无相关性;在胰腺癌中β-catenin的异常表达与Smad4的阳性表达相关。结论β-catenin、Smad4共同参与了胰腺癌的发生,wnt/β-catenin通路和TGF-β/Smad通路可能存在交汇点。     

E-钙黏附素及β-连环蛋白在上皮性卵巢癌中的表达及临床意义

目的: 研究上皮性卵巢癌组织中E-钙黏附素(E-cadherin)、β-连环蛋白(β-catenin)表达情况,探讨其表达与上皮性卵巢癌生物学行为的关系. 方法: 应用免疫组化方法,检测38例正常卵巢组织和80例上皮性卵巢癌组织中E-cadherin及β-catenin蛋白表达的情况,并结合卵巢癌的病理分级、淋巴结转移情况和临床分期对其表达进行分类和统计分析. 结果: 相对于正常卵巢组织,E-cadherin在上皮性卵巢癌组织中表达明显降低(P<0.05),且随细胞分化程度降低而减少(P<0.05),随临床分期的增加而降低(P<0.05),伴有区域性淋巴结转移者,E-cadherin表达明显降低(P<0.05);β-catenin在上皮性卵巢癌组织中表达明显增高(P<0.05),其表达量随临床分期的增加而增加(P<0.05),伴有区域性淋巴结转移者其表达增高(P<0.05),与细胞分化程度无关(P>0.05). 结论: E-cadherin的表达降低及β-catenin的表达增高与上皮性卵巢癌的生物学行为密切相关;两者在上皮性卵巢癌组织中的表达呈负相关;E-cadherin及β-catenin表达水平的高低可作为判断上皮性卵巢恶性肿瘤患者预后的指标.     

胰腺癌组织中Smad7、uPA及PAI-1的表达及临床意义

目的: 研究Smad7、uPA及PAI-1在胰腺癌组织及细胞中的表达水平,以阐明Smad7对胰腺癌侵袭和转移的作用机制.方法: 构建胰腺癌组织芯片,采用免疫组织化学方法检测Smad7、uPA及PAI-1蛋白表达情况,并与临床病理资料作对照分析.结果: 88例胰腺癌组织标本中Smad7、uPA和PAI-1阳性率分别为72.7%,76.1%和71.6%,明显高于正常胰腺组织中的表达水平(P<0.01).Smad7、uPA和PAI-1蛋白的阳性表达与胰腺癌患者的性别、年龄、肿瘤的位置及大小、组织病理学分级均无关(P>0.05),而与胰腺癌的临床TNM分期及淋巴结转移密切相关(P<0.01).Smad7、uPA和PAI-1在胰腺癌组织中的蛋白表达均呈正相关(P<0.01).结论: Smad7、uPA及PAI-1在胰腺癌中共同高表达,Smad7可能通过增强胰腺癌组织内uPA及PAI-1的生成而起到促进胰腺癌进展的作用.     

上皮型钙黏素E和β-连环蛋白在急性坏死性胰腺炎肠黏膜的表达及意义

目的 探讨急性坏死性胰腺炎大鼠肠黏膜β-连环蛋白(β-catenin)和上皮型钙黏素E(E-cadherin)表达的变化规律及意义.方法 健康成年Wistar大鼠30只,随机分为空白对照组(n=10)、急性坏死性胰腺炎手术后4 h组(n=10)、12 h组(n=10).对照组直接取空肠组织,急性坏死性胰腺炎组分别于手术后4 h和12 h取空肠组织.应用免疫组织化学染色检测大鼠在急性坏死性胰腺炎中小肠黏膜β-catenin及E-cadherin表达的变化.结果 正常大鼠肠黏膜细胞中β-catenin仅有微弱表达,感染后不同时期表达均高于对照组.E-cadherin在感染后不同时间也高于对照组.结论 急性坏死性胰腺炎可诱导β-catenin和E-cadherin表达,提示β-catenin和E-cadherin可能在急性坏死性胰腺炎中对肠黏膜的保护和修复有关.     

COX-2、β-catenin及E-cadherin在乳腺肿瘤中的表达及相关性研究

目的 研究乳腺肿瘤组织中环氧化酶-2(cyelooxygenase-2,COX-2)、上皮钙黏素(E-cadherin,E-cad)及β-连环蛋白(β-catenin)的表达,探讨其相关性及临床意义.方法 采用免疫组化对96例乳腺肿瘤的COX-2、β-catenin及E-cadherin进行检测.结果 COX-2、E-cadherin及β-catenin在乳腺导管内乳头状肿瘤组及不同乳腺肿瘤组中表达的差异有统计学意义(P<0.05),在乳腺肿瘤中E-cadherin和β-catenin之间表达的变化趋势一致,COX-2表达与E-cadherin及β-catenin表达的变化趋势相反,COX-2表达增高时E-cadherin及β-catenin的表达均下降,COX-2与E-cadherin/catenin构成的复合体二者之间表达趋势差异有统计学意义(P<0.05).结论 COX-2的高表达与E-cadherin及β-catenin的低表达在乳腺肿瘤的发生发展过程中起重要的作用,检测其表达异常对判断临床进展、推测预后以及制定针对性的治疗方案有一定的参考价值.     

E-钙黏蛋白、β-连环蛋白和Podoplanin在人食管鳞癌中的表达及意义

目的探讨E-钙黏蛋白(E-cadherin)及β-连环蛋白(β-catenin)在人食管癌进展过程中的表达及作用。方法取临床手术切除的50例食管癌组织,用免疫组化方法检测食管癌中E-cadherin、β-catenin及Podoplanin的表达情况。结果E-cadherin与β-catenin主要表达于癌细胞,表达率随食管癌的发生、进展而降低,Podoplanin只表达于淋巴管,食管癌组织周边部淋巴管密度比内部明显增高(P<0.01)。结论E-cadherin、β-catenin在食管癌细胞中的表达减少,推测使食管癌细胞间的粘附能力减弱,促进了癌细胞的转移。食管癌周边大量淋巴管为癌细胞的淋巴道转移提供了条件。Podoplanin可以作为淋巴管特异性标记物。     

胰腺癌组织中DPC4/Smad4的表达及临床意义

目的　探讨DPC4 /Smad4在胰腺癌组织中的表达及意义。方法　采用免疫组织化学SABC法,对34例胰腺癌和慢性胰腺炎组织进行DPC4 /Smad4表达水平研究。结果　DPC4 /Smad4蛋白在胰腺癌组织中的阳性表达低于慢性胰腺炎组织(P <0 .0 5 ) ,患者性别、年龄、肿瘤大小、部位、病理分型、组织学浸润之间的表达差异无统计学意义(P >0 .0 5 )。结论　DPC4作为一种抑癌基因,其改变对胰腺癌的发生、发展可能起重要作用。     

E-cadherin在胰腺癌中的表达及与血管生成的关系

目的:探讨胰腺癌组织中E-钙粘素(E-cadherin)的表达与胰腺癌临床病理特征及预后的关系,及E-cadhefin在胰腺癌血管生成中的作用.方法:采用免疫组化Power Vision法对49例胰腺癌组织及癌旁正常胰腺组织的E-cadherin、血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor,VEGF)和CD34抗体的表达情况进行检测.结果:胰腺癌组织中E-cadherin阳性表达阳性率为73.5%,癌旁正常胰腺组织阳性率仅为16.3%,两者比较差异有统计学意义(P<0.05). E-cadherin蛋白和VEGF蛋白表达呈正相关(P<0.05):E-cadherin阳性组的微血管密度(Microvessel density,MVD)值明显高于阴性低表达组(P<0.05). E-cadherin的表达与胰腺癌组织的分化程度、浸润程度、血管侵袭、淋巴结转移及pTNM分期呈明显相关(P<0.05); E-cadherin阳性表达组患者的中位生存时间(18.00 ±3.65)月低于阴性表达组(30.00±8.01)月,阳性表达组的预后显著差于阴性表达组,差异有统计学意义(P<0.05).结论:E-cadherin的异常表达可作为评价胰腺癌预后的辅助指标.E-cadherin可能激活VEGF通道,从而诱导胰腺癌血管的生成.     

胃癌组织中β-连环蛋白、基质金属蛋白酶-7的表达及意义

目的:探讨β-连环蛋白(β-catenin)、基质金属蛋白酶-7(MMP-7)在胃癌组织中的表达及相互关系。方法:应用免疫组织化学ABC法检测胃癌组织、胃黏膜组织中β-连环蛋白表达;应用蛋白质印迹法检测β-连环蛋白阳性组胃癌组织中MMP-7蛋白表达。结果:75例胃癌组织中有35例β-连环蛋白呈阳性表达,阳性率为46.67%;30例胃黏膜组织中仅有3例β-连环蛋白呈阳性表达,阳性率为10.00%,差异有统计学意义(P<0.05)。低分化胃癌组织中β-连环蛋白阳性率73.91%、MMP-7阳性率65.22%,明显高于中分化胃癌组织中β-连环蛋白的阳性率47.36%、MMP-7的阳性率42.10%以及高分化胃癌组织中β-连环蛋白的阳性率50.00%、MMP7的阳性率40.00%,差异有统计学意义(P<0.05)。62例有淋巴结转移的胃癌组织中有44例β-连环蛋白呈阳性表达,阳性率为70.97%;13例无淋巴结转移胃癌组织中有6例β-连环蛋白呈阳性表达,阳性率为46.15%,差异有统计学意义(P<0.05)。35例β-连环蛋白阳性胃癌组织中有21例MMP-7呈阳性表达,阳性率为60.00%,相关性分析显示胃癌组织中β-连环蛋白、MMP-7表达呈正相关(r=0.617,P<0.01)。结论:胃癌组织中β-连环蛋白以及MMP-7表达与胃癌的侵袭和转移密切相关。     

Smad4蛋白在胰腺癌中的表达研究

目的运用组织芯片技术,检测Smad4在胰腺癌旁组织及癌旁组织中蛋白水平的表达,明确Smad4蛋白在胰腺癌中的表达及临床意义。方法选取经手术、病理证实的胰腺癌及癌旁组织各162例,构建胰腺癌组织芯片,采用免疫组化染色法检测胰腺癌及癌旁组织中Smad4蛋白的表达。结果 Smad4在胰腺癌和癌旁组织中的表达定位于细胞质和细胞核,在癌旁组织细胞质内显著高于癌组织(P<0.05),而在癌组织细胞核内显著高于癌旁组织(P<0.05)。胰腺癌及癌旁组织Smad4与肿瘤大小、病理分级均无相关性(均P>0.05);而癌旁组织中胞核Smad4的染色指数与淋巴结转移呈负相关(P<0.05)。结论 Smad4与胰腺癌的发生、发展有关,且与淋巴结转移与否相关,该基因有望成为胰腺癌早期诊断的分子指标。     

星形细胞瘤组织TGF-β1、Smad7与VEGF的表达及意义

目的:探讨转化生长因子(TGF-β1)、Smad7、血管内皮生长因子(VEGF)在脑星形细胞瘤中的表达及意义.方法:采用免疫组化法检测正常脑组织、低级别(Ⅰ-Ⅱ级)和高级别(Ⅲ-Ⅳ级)星形细胞瘤组织中TGF-β1、Smad7与VEGF的表达情况.结果:TGF-β1、Smad7及VEGF蛋白在星形细胞瘤中均有不同程度的表...     

Smad4和转化生长因子β受体Ⅱ在宫颈腺癌中的表达及意义

目的:研究Smad4和转化生长因子β受体Ⅱ(TβR-Ⅱ)在宫颈腺癌中的表达及其与临床病理的相关性,探讨其作为宫颈腺癌预后判断分子指标的可能性.方法: 免疫组织化学链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连接法(SP法)检测36例宫颈腺癌组织中Smad4和TβR-Ⅱ的表达,以 20例正常宫颈腺上皮组织作为对照,对Smad4和TβR-Ⅱ的表达与宫颈腺癌临床病理参数的关系进行分析.结果: Smad4和TβR-Ⅱ在宫颈腺癌中的表达显著低于正常宫颈腺上皮组织(P<0.05),在低分化癌中的表达率显著低于中高分化癌(P<0.05),在有淋巴结转移组显著低于无淋巴结转移组(P<0.05).Smad4和TβR-Ⅱ的表达相关.结论: Smad4和TβR-Ⅱ的表达缺失与宫颈腺癌的发生、分化程度及转移有关.Smad4和Tβ-Ⅱ的低表达可能作为判断宫颈腺癌恶性程度和转移的标记,Smad4和TβR-Ⅱ联合检测能作为一种有效的肿瘤标记物用于宫颈腺癌患者预后的评估.     

Smad7基因转染人胰腺癌细胞后uPA及PAI-1表达的变化

目的: 通过对人胰腺癌细胞BxPC3转染Smad7基因,观察转染阳性细胞克隆尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA)及纤溶酶原激活物抑制因子-1(PAI-1)表达的改变,进一步阐明Smad7在胰腺癌侵袭和转移中的作用.方法: 经脂质体介导将含有Smad7重组表达质粒转染BxPC3细胞,用G418筛选及RT-PCR、蛋白质印迹法鉴定;又分别采用RT-PCR与蛋白质印迹法检测转染阳性细胞克隆uPA及PAI-1的表达.结果: 成功建立高表达Smad7的阳性BxPC3克隆(F-16、F-21),并证实其uPA、PAI-1 mRNA及蛋白表达均显著增加.结论: Smad7可能通过增强胰腺癌组织内uPA及PAI-1的生成而起到促进胰腺癌进展的作用.     

Oct4与TGF-β信号通路相关因子在胃癌组织中的表达和相互关系

目的:探讨八聚体结合蛋白4(Oct4)与TGF-β信号通路相关因子在胃癌组织中的表达情况和相互关系.方法:57例胃癌患者手术切除的癌组织及对应正常胃组织,采用Western blotting法检测Oct4、TβRⅡ、Smad2、Smad3、E-Cadheri蛋白的表达情况,分析它们与胃癌临床病理特征的关系,以及胃癌组织Oct4表达与TβRⅡ、Smad2、Smad3、E-Cadherin的相关性.结果:胃癌组织Oct4蛋白的表达明显高于正常组织,TβRⅡ、Smad2、Smad3、E-Cadherin蛋白的表达明显低于正常组织(P＜0.05).胃癌组织Oct4、TβRⅡ、Smad2、Smad3、E-Cadherin表达与与肿瘤组织分型、临床分期、淋巴结转移和浆膜浸润有关(P＜0.05).胃癌组织Oct4表达与TβRⅡ、Smad2、Smad3、E-Cadherin呈负相关关系(r=-0.887、-0.912、-0.779、-0.879,P＜0.01).结论:胃癌组织Oct4高表达可参与胃癌的发生发展和浸润、转移,其机制可能与调节TGF-β信号通路,诱导细胞上皮间质转化有关.     

TCF4、β-catenin和E-cadherin在卵巢癌癌组织中的表达水平及意义

目的:探讨TCF4、β-catenin和E-cadherin在卵巢癌癌组织中的表达水平及意义。方法:采用免疫组织化学染色法(SP)检测卵巢良性组织、卵巢交界性肿瘤组织及卵巢癌组织中TCF4、β-catenin和E-cadherin分子的表达情况。结果:与卵巢良性组织比较,卵巢癌组织和卵巢交界性肿瘤组织中TCF4、β-catenin阳性表达率和表达评分显著升高(P<0.05),而E-cadherin阳性表达和表达评分显著降低(P<0.05),与卵巢交界性肿瘤组织比较,卵巢癌组织TCF4、β-catenin阳性表达率和表达评分显著升高(P<0.05),而E-cadherin阳性表达和表达评分显著降低(P<0.05)。结论:TCF4、β-catenin和E-cadherin异常表达可能参与卵巢癌的发生、发展过程,对三者联合检测能够提高患者早期诊断及判断预后的重要指标。     

胰腺上皮内瘤变和胰腺癌中TGF-β/Smads信号通路相关基因的突变分析

目的:探讨TGF-β/Smads信号通路相关基因在胰腺上皮内瘤变和胰腺癌中的变化规律.方法:采用组织芯片、激光显微切割、PCR-SSCP和直接测序技术,检测各级别胰腺上皮内瘤变和胰腺癌组织中TGF-β/Smads信号通路相关基因突变.结果:23例胰腺癌中有2例分别存在Smad4基因(DPC4)第8和第11外显子的纯合性缺失;2例PanIN-3病灶和5例胰腺癌中分别存在 Smad4基因第8外显子、第11外显子,TβR-Ⅱ基因第3外显子和Smad2基因第1外显子的突变.突变类型包括错义突变、移码突变和多聚腺苷酸A的缺失,且基因改变者的免疫组化结果与之完全一致.结论:TGF-β/Smads信号通路中Smad4基因(DPC4)改变在胰腺癌形成和发展过程中起主导作用.