新型伊立替康衍生物ZBH-1208的体外抗肿瘤活性及机制研究

目的研究新型伊立替康衍生物ZBH-1208体外对肿瘤细胞的生长抑制作用并初步探讨其作用机制。方法采用四甲基偶氮唑盐比色(MTT)法检测分析ZBH-1208对人宫颈癌HeLa细胞、人非小细胞肺癌A549细胞、人小细胞肺癌NCI-H446细胞、人乳腺癌MCF-7细胞、人结肠癌SW1116细胞、人胃腺癌SGC-7901细胞、人肝癌SMMC-7721细胞及人胚肾293细胞的生长抑制作用,计算IC50值;流式细胞术检测ZBH-1208对肿瘤细胞周期及活化Caspase-3表达的影响。结果 ZBH-1208对肿瘤细胞的生长具有抑制作用,呈剂量-时间依赖关系。ZBH-1208作用各肿瘤细胞后IC50值在0.002μmol/L-0.265μmol/L之间,而对照组伊立替康(CPT-11)的IC50值在0.464μmol/L-52.111μmol/L之间,两者相比较差异均有统计学意义(P0.05)。流式细胞术检测结果显示,ZBH-1208诱导肿瘤细胞发生G2/M期阻滞,百分比到达90%以上;并且诱导活化形式Caspase-3表达增加。结论与CPT-11相比,新型化合物ZBH-1208具有高效低毒、起效快的特点,可使肿瘤细胞发生细胞周期阻滞,并诱导肿瘤细胞凋亡,具有进一步研究开发的价值。     

慢性乙型肝炎327例肝组织病理与临床分析

目的 :探讨慢性乙型肝炎患者临床与肝脏组织病理改变关系。方法 :对慢性乙型肝炎327例患者行肝脏穿刺取肝脏组织作病理检查,并对实验室、超声波和临床有关资料进行分析。结果:(1)随着ALT的逐渐升高,肝脏炎症分级和纤维化分期也随之升高;(2)肝组织纤维化分期随着GLB的增高有加重趋势;(3)HBV DNA定量在103~105和105~107两组肝脏纤维化程度较HBV DNA定量<103和>107两组有加重趋势;(4)超声检测脾脏,其脾斜径随着肝组织纤维化程度加重(S1~S4)而增加,各组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:慢性乙型肝炎病情活动度的临床诊断与病理诊断的存在一定差异,故无禁忌证者应行肝活检,特别是对于中、重度的患者,更应该行肝穿活检,以明确诊断评估预后。     

胰腺癌组织中Smad4、上皮型钙黏蛋白及β-连环蛋白的表达及临床意义

目的:观察Smad4、上皮型钙黏蛋白(E-cadherin)及β-连环蛋白(β-catenin)在胰腺癌组织中的表达,探讨Smad4在胰腺癌侵袭和转移过程中的作用机制.方法:构建胰腺癌组织芯片,采用免疫组织化学方法检测Smad4、E-cadherin及β-连环蛋白表达情况,并与临床病理资料作对照分析.结果:88例胰腺导...     

黑色素和大豆皂甙混合后对大鼠小肠葡萄糖吸收抑制机理的研究

黑色素和大豆皂甙以不同比例混合后 ,经雄性大鼠体外循环实验证实 :此混合物可以抑制大鼠小肠对葡萄糖的吸收 ,进一步通过其量 效关系初步探讨得出 :黑色素和大豆皂甙以 1∶5 0的比例混合时 ,大鼠小肠对葡萄糖的吸收有最好的阻碍作用〔1〕。材料　黑色素、大豆皂甙、缓冲液 (ｐＨ =7 4的Ｈａｎｋ液 )、环流液 (10 0 0 μｍｏｌ/Ｌ葡萄糖液 ,临用现配 )、麻醉剂 (苯巴比妥 )。方法　取雄性大鼠 72只 ,体重 10 0～ 12 0 ｇ,随机分组 ,每组 8只 ,用苯巴比妥麻醉后开腹 ,切掉与胃相连的 3ｃｍ小肠后将其后 15ｃｍ小肠剪下 ,用Ｈａｎｋ冲洗剪下小…     

上调HCCR-2基因表达对乳腺癌细胞增殖与凋亡的影响

目的利用细胞转基因技术探讨人宫颈癌癌基因-2(HCCR-2)对人乳腺癌细胞增殖、凋亡的影响及其可能的分子机制。方法经脂质体介导将含有HCCR-2真核表达质粒转染人乳腺癌MCF-7细胞株,采用G418筛选阳性细胞克隆及Western blot鉴定;Western blot检测阳性细胞克隆Bcl-2、Bax蛋白表达改变;流式细胞仪检测细胞凋亡率;噻唑盐(MTT)比色法检测阳性细胞克隆的增殖活性。结果成功建立高表达HCCR-2的阳性MCF-7细胞克隆(M-23),并证实其Bcl-2蛋白表达与细胞增殖活性均显著增高,而Bax蛋白表达与细胞凋亡显著降低。结论上调MCF-7细胞HCCR-2基因后,细胞增殖活性增加,细胞凋亡降低,其作用机制与Bcl-2表达增加而Bax表达降低。     

SOCS1-siRNA沉默SOCS1基因表达对脐血树突状细胞生物学活性的影响

目的采用RNA干扰技术抑制脐血树突状细胞(DC)SOCS1基因表达,并检测其对树突状细胞生物学活性的影响,为树突状细胞的临床应用奠定基础。方法针对SOCS1基因,采用化学合成法合成SOCS1siRNA,并转染脐血DC。RT-PCR和Western blot检测转染前后DC的SOCS1基因表达;流式细胞术检测细胞表面CD80、CD86及HLA-DR分子表达情况;ELISA法检测细胞培养上清中IL-12水平。结果与对照组相比,siRNA组SOCS1蛋白质表达水平降低,差异有统计学意义;DC表面CD80、CD86及HLA-DR分子表达上调,DC培养上清中IL-12的浓度显著提高。结论 RNA干扰技术能显著下调脐血树突状细胞SOCS1的表达,为以DC SOCS1为靶向的抗肿瘤治疗提供了新思路和新手段。     

结缔组织生长因子反义寡核苷酸对胰腺癌细胞基质金属蛋白酶-9、血管内皮生长因子表达及细胞增殖与侵袭的影响

目的 通过研究结缔组织生长因子(CTGF)反义寡核苷酸(ASODN)对人胰腺癌细胞基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、血管内皮生长因子(VEGF)表达及细胞增殖与侵袭力的影响,深入探讨CTGF在胰腺癌发生、发展中的作用机制,为CTGF ASODN在胰腺癌基因治疗中的运用奠定理论基础.方法 经脂质体介导将CTGF ASODN转染人胰腺癌细胞株SW1990,荧光显微镜及流式细胞仪检测转染效率;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)及Western blot检测转染细胞CTGF、MMP-9与VEGF mRNA与蛋白表达;噻唑盐(MTT)比色法检测转染细胞的增殖活性;采用Transwell小室检测细胞侵袭能力.结果 (1)荧光显微镜及流式细胞仪检测显示CTGF ASODN可成功转染SW1990细胞.(2)反义组、无义组和单加脂质体组细胞CTGF mRNA表达量分别为0.24±0.09、0.67±0.21、0.63±0.18,反义组较其他组的mRNA表达明显减少(P<0.01);相应的CTGF蛋白表达量分别为0.19±0.07、0.75±0.26、0.71±0.23;相应的MMP-9 mRNA表达量分别为0.21±0.12、0.78±0.35、0.81±0.37;相应的VEGF mRNA表达量分别为0.16±0.06、0.42±0.22、0.43±0.28;相应的MMP-9蛋白表达量分别为0.68±0.22、1.97±0.46、1.92±0.39;相应的VEGF蛋白表达量分别为0.27±0.07、0.52±0.19、0.55±0.18,反义组CTGF、MMP-9和VEGF的表达较其他组显著降低(P<0.01).(3)反义组、无义组、单加脂质体组细胞增殖活性分别为1.67±0.14、2.34±0.17、2.29±0.21,反义组较其他组细胞增殖被显著抑制(P<0.01).(4)反义组、无义组、单加脂质体组微孔滤膜外侧细胞数分别为24.88±6.17、52.37±8.62、55.49±8.83,反义组较其他组微孔滤膜外侧细胞数显著减少(P<0.01).结论 CTGF ASODN转染可有效抑制SW1990细胞CTGF的表达,并降低其MMP-9、VEGF的表达及细胞增殖活性与细胞侵袭力.     

非抑制型离于色谱法测定饮用水中的多种离子

在卫生检验工作中,生活饮用水及矿泉水中微量元素的测定是一项重要的工作,以往均采用原子吸收或原子发射方法测定,几种离子之间还产生相互干扰。非抑制型离子色谱法测定阳离子能充分发挥色谱的分离分析功能,各离子间不产生干扰,一次进样可以同时分析多种离子。1 材料与方法1.1 仪器和试剂 液相色谱仪:美国Weters公司432电导检测器,800色谱工作站,1L聚丙烯容量瓶,超声彼脱气装置。1.2 色谱条件 色谱柱:Waters IC Pak·C M/D 3.9×150mm 流动相:0.1mmol/l EDTA/3mmol/1HNO3　1.0ml/min 进样量:50μg;检测器灵敏度0.00021.3 实验方法 用超纯水配制标准溶液和流动相,流动相经0.45μm孔滤膜过滤并超声波脱气。 氢氧化钾、氯化钠、氯化钾、硝酸镁、硝酸钙均为优级纯。分     

体表心电图ST—T改变对诊断冠心病价值的探讨

目的：探讨心电图ST—T改变诊断冠心病的可靠性。方法：对160例有ST—T改变的患者行18导联心电图、动态心电图、冠脉造影检查,并对ST—T改变与造影结果对比分析。结果：60例ST—T改变有动态变化的患者确诊冠心病例数为42例,符合率70．0％,而100例ST—T改变始终无动态变化的患者确诊冠心病例数为40例,符合率40．0％。结论：ST—T改变无动态变化诊断冠心病可靠性小,应尽早行冠脉造影明确诊断;ST—T改变有动态变化诊断冠心病（CHD）可靠性大,对临床诊断有指导意义。