血浆miR-191和miR-27a在胃癌诊断中的价值

目的:研究胃癌患者和健康者血浆中miRNA的表达差异,为胃癌提供新的早期miRNA诊断标志物?方法:分别收集既往未行放化疗的初治胃癌患者和健康者外周血浆?采用商品化的试剂盒提取血浆中的RNA,用反转录及实时定量PCR的方法检测7种miRNA(miR-21?-27a?-191?-379?-658?-433?-383)的含量?结果:miR-191和miR-27a在胃癌患者血浆中的表达较健康者升高(P < 0.001),miR-191的AUC(ROC曲线下面积)为0.939,区分胃癌患者和健康者的敏感性和特异性分别为86.1%和100%?miR-27a的AUC为0.881,其敏感性和特异性为83.33%和86.67%?结论:外周血浆中miR-191和miR-27a有作为胃癌早期诊断的标志物的潜力?     

培美曲塞联合顺铂/卡铂一线治疗晚期非鳞状NSCLC近期疗效分析

目的 观察培美曲塞联合顺铂/卡铂一线治疗晚期非鳞状非小细胞肺癌( NSCLC)的疗效和不良反应.方法 选择晚期非鳞状NSCLC初治患者38例,一线进行培美曲塞联合顺铂或卡铂化疗:培美曲塞500 mg/m2 d1,联合顺铂25 mg/m2 d1～d3或卡铂(AUC=5)d1,每3周为1个周期重复,所有患者接受至少2个周期化疗.结果 38例可评价,CR 0例,PR 10例,SD 20例,PD8例,客观有效率26.3％,疾病控制率78.9％,临床受益反应率为71.1％;主要不良反应为骨髓抑制、胃肠道反应,经对症处理后均能耐受.结论 培美曲塞联合顺铂/卡铂一线治疗晚期非鳞状NSCLC疗效较好,不良反应轻微,易于耐受.     

CCND1基因G870A多态性与肺癌危险性的Meta分析

目的研究细胞周期素D1(Cyclin D1,CCND1)基因G870A多态性与肺癌(Lung cancer)危险性的关系。方法检索中国医学文献数据库和PubMed,获取所有关于CCND1基因G870A与肺癌危险性的病例-对照研究,使用Meta分析方法合并G870A与肺癌危险性关系的OR值。同时进行异质性分析、亚组分析和发表偏倚检验。采用固定效应模型和随机效应模型进行分析。结果纳入符合标准的文献有8篇,共包括4 747例病例和4 512例对照,在显性模型下,G870A多态性能够增加罹患肺癌的风险(OR=1.12,95%CI=1.02~1.23)。种族分层分析发现,此危险在高加索人群中更为显著,而在亚洲人群中并未显著。结论 CCND1基因G870A多态性是肺癌的易感性位点,而且在高加索人群中更为显著。     

靶向瘦素基因的siRNA对人肺腺癌A549细胞增殖和凋亡的影响

目的 通过构建慢病毒介导的靶向瘦素基因的小干扰RNA(siRNA),探讨瘦素对A549细胞增殖和凋亡的影响.方法 建立siRNA-a组、siRNA-b组及其各自阴性对照组和空白对照组(A549)5组细胞,分别于荧光显微镜下观察细胞5d和11d的生长情况.噻唑蓝(MTT)比色法测定空白对照组、siRNA-a组及其阴性对照组细胞1～6 d的生长情况,绘制生长曲线,比较各组细胞增殖差异.流式细胞仪分析各组细胞凋亡率,观察瘦素的siRNA对A549细胞凋亡的影响.RT-PCR和Western bloting方法检测各组细胞瘦素mRNA和蛋白表达水平.结果 siRNA-a细胞镜下形态基本正常,5d后荧光效率仍较高,感染稳定,但生长较阴性对照组及空白对照组细胞缓慢.siRNA-b细胞感染48 h后,镜下见细胞肿胀、变形,空泡出现,5d后见多量细胞碎片,凋亡小体形成,呈现凋亡状态,11d后可见细胞碎片,已近完全凋亡.MTT实验siRNA-a组细胞从第3天起生长比其他各组均缓慢(P＜0.01).流式细胞仪检测细胞凋亡率结果:siRNA-a组、siRNA-b组细胞凋亡率明显高于阴性对照组和空白对照组.RT-PCR和Western bloting结果 显示干扰组细胞瘦素mRNA和蛋白表达水平较阴性对照组和空白对照组明显下调.结论 慢病毒介导的siRNA能下调肺腺癌A549细胞瘦素基因的表达,从而抑制A549细胞增殖,促进其凋亡.由此可见,瘦素的siRNA有望成为肺腺癌基因治疗的新手段.     

肠癌组织中 ERCC1基因表达与预后的关系

目的：探讨 ERCC1基因在肠癌组织中的表达与临床病理特征及预后的关系。方法：应用实时荧光定量 PCR 检测68例肠癌石蜡组织中 ERCC1基因的表达,分析其表达水平与临床病理特征及预后之间的关系。结果：ERCC1在肠癌组织中的表达水平与组织学分级、淋巴结转移及临床分期等临床病理特征无关。ERCC1低表达病例3年及5年生存率均优于高表达病例,两者差异有统计学意义。结论：ERCC1表达与肠癌患者临床病理特征无关,提示 ERCC1表达水平与肿瘤的恶性生物学行为无关。ERCC1表达水平的高低与患者3年及5年生存率显著相关,有预测预后的价值。     

肺癌中结肠多发性腺瘤样息肉基因启动子1A序列甲基化模式的研究

目的 探寻结肠多发性腺瘤样息肉（APC）基因启动子1A序列中肺癌甲基化位点及其存在模式。方法 用甲基化序列特异性引物，对阳性控制样品（CB＋）、阴性控制样品（CB-）、13份正常肺组织及19份肺癌组织进行APC基因启动子1A序列甲基化特异性扩增（MSP），其扩增产物直接测序和进行克隆测序分析。结果 在19份肺癌组织中，APC基因启动子1A序列的707、714、719和726位点发生高甲基化，甲基化率分别为95％（18／19）、74％（14／19）、74％（14／19）和74％（14／19），与正常肺组织比较，差异均有统计学意义（P〈0．001）。而679和687位点甲基化发生率均为11％（2／19），与正常肺组织甲基化发生率（0／13）接近（P〉0．05）。结论 在APC基因启动子1A序列中存在CpG胞嘧啶二核苷酸特定甲基化模式，其对肺癌早期诊断可能有重要意义。     

重组人血管内皮抑制素的抗肿瘤活性研究

目的观察重组人内皮抑素的抗肿瘤活性及对血管内皮细胞增殖的抑制作用。方法以重组人内皮抑素作用于小鼠移植性肿瘤模型及人癌裸鼠移植性肿瘤，观察其对肿瘤生长的抑制效果，并与传统细胞毒性药物进行比较；同时，以MTT法观察其对血管内皮细胞ECV细胞和结缔组织类成纤维细胞L929细胞的生长抑制作用。结果重组人内皮抑素对小鼠移植性肿瘤Lewis肺癌及人癌裸鼠移植性肿瘤QGY肝癌、A549肺癌、Bcap37乳腺癌均有明显的肿瘤抑制作用；MIT实验显示重组人内皮抑素对血管内皮细胞及结缔组织类成纤维细胞具有生长抑制作用。结论重组人内皮抑素具有一定的抗肿瘤效果。其作用机理可能在于抑制肿瘤血管内皮细胞的增殖。     

高能聚焦超声热疗合并奥曲肽治疗晚期胰腺癌的随机临床对照研究

目的评价HIFU联合奥曲肽治疗晚期胰腺癌的近期疗效与不良反应的观察。方法病理确诊的晚期胰腺癌患者46例(有可测量病灶者),随机分为热疗组和联合组,联合组采用FBY01北大研制的高强度聚焦超声联合奥曲肽治疗,两组均至少治疗2周期后评价疗效。结果全组均可评价疗效。联合组临床受益反应率为75.0%(18/24),热疗组为36.4%(8/22),2组比较有非常显著差异(P<0.01)。联合组治疗前后及两对照组治疗后比较,都有非常显著差异(P<0.01)。热疗组中位生存期约8.8月,联合组中位生存期达到10.8个月,P>0.05。两组的近期有效率,中位生存时间无显著差异(P>0.05)。毒副作用轻微,二者无显著性差异。结论HIFU联合奥曲肽治疗晚期胰腺癌临床受益反应率改善明显,VEGF水平下降明显,且毒副反应轻,病人能耐受,值得临床推广应用。     

497例子宫内膜癌的临床诊断治疗以及预后因素分析

目的评价国际大样本数据库子宫内膜癌的临床诊治和预后因素分析。方法选取1995年6月—2013年12月国际TCGA组织诊断治疗的子宫内膜癌患者连续病例,分析临床诊疗的特征,评价临床客观疗效和生存时间。结合lncRNA RP11-350N15.6基因的表达和相关性分析,评价患者的预后指标。结果共497例子宫内膜癌入选。71.6%的患者为Ⅰ~Ⅱ期,白种人为72.6%,子宫内膜腺癌为75.9%,81.1%患者为绝经后患者。RP11-350N15.6基因表达与肿瘤组织病理和分级以及7个重要的肿瘤驱动基因具有明显相关性,高表达组总生存时间明显延长。结论国际TCGA子宫内膜癌研究的诊断治疗符合临床规范,高表达RP11-350N15.6是患者具有良好预后的重要指标。     

实时荧光定量检测人血浆中RASSF1A基因启动子甲基化

目的 建立检测人血浆DNA中RASSF1A基因甲基化的方法.方法 以肺癌细胞株NCI-H460作为RAssF1A基因启动子区甲基化阳性样本,传统酚/氯仿法提取细胞DNA,经紫外分光光度计定量后以10倍稀释的浓度梯度依次投入到200 μl健康人血浆中,制备得到模拟肺癌患者血浆.用磁珠法从模拟血浆样本和15例早期肺癌患者血浆中提取总DNA.对血浆DNA模板进行亚硫酸氢盐化学修饰,并以TaqMan技术的实时荧光定量甲基化特异性PCR(MSP)进行检测.以模拟血浆样品作为标准品,用外标准曲线法对肺癌患者血浆中的甲基化RASSF1A进行定量.结果 实时荧光定量MSP对模拟肺癌患者血浆的检测最低限为150拷贝(甲基化的肿瘤DNA)/ml(血浆).15例肺癌患者5例RASSF1A甲基化阳性(33.3%).5例肺癌患者血浆中甲基化的RASSF1A基因的浓度分别为2.56×103,8.20×104,1.45×104,3.31×104和4.24×104拷贝/ml.结论 实时荧光定量MSP法检测肺癌患者血浆DNA中RASSF1A基因甲基化,灵敏度高,特异性强.