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| 靶向瘦素基因的siRNA对人肺腺癌A549细胞增殖和凋亡的影响 | |
| 引用本文： | 承柯伟,孙月雯,岳静静,黄茂,殷凯,王富强,束永前,冯源.靶向瘦素基因的siRNA对人肺腺癌A549细胞增殖和凋亡的影响[J].国际呼吸杂志,2012,32(4). |
| 作者姓名： | 承柯伟 孙月雯 岳静静 黄茂 殷凯 王富强 束永前 冯源 |
| 作者单位： | 1. 210029, 南京医科大学第一附属医院呼吸科 2. 210029, 南京医科大学分析测试中心 3. 210029, 南京医科大学第一附属医院肿瘤科 |
| 基金项目： | 江苏省科教兴卫工程重点学科开放课题 |
| 摘 要： | 目的 通过构建慢病毒介导的靶向瘦素基因的小干扰RNA(siRNA),探讨瘦素对A549细胞增殖和凋亡的影响.方法 建立siRNA-a组、siRNA-b组及其各自阴性对照组和空白对照组(A549)5组细胞,分别于荧光显微镜下观察细胞5d和11d的生长情况.噻唑蓝(MTT)比色法测定空白对照组、siRNA-a组及其阴性对照组细胞1～6 d的生长情况,绘制生长曲线,比较各组细胞增殖差异.流式细胞仪分析各组细胞凋亡率,观察瘦素的siRNA对A549细胞凋亡的影响.RT-PCR和Western bloting方法检测各组细胞瘦素mRNA和蛋白表达水平.结果 siRNA-a细胞镜下形态基本正常,5d后荧光效率仍较高,感染稳定,但生长较阴性对照组及空白对照组细胞缓慢.siRNA-b细胞感染48 h后,镜下见细胞肿胀、变形,空泡出现,5d后见多量细胞碎片,凋亡小体形成,呈现凋亡状态,11d后可见细胞碎片,已近完全凋亡.MTT实验siRNA-a组细胞从第3天起生长比其他各组均缓慢(P＜0.01).流式细胞仪检测细胞凋亡率结果:siRNA-a组、siRNA-b组细胞凋亡率明显高于阴性对照组和空白对照组.RT-PCR和Western bloting结果 显示干扰组细胞瘦素mRNA和蛋白表达水平较阴性对照组和空白对照组明显下调.结论 慢病毒介导的siRNA能下调肺腺癌A549细胞瘦素基因的表达,从而抑制A549细胞增殖,促进其凋亡.由此可见,瘦素的siRNA有望成为肺腺癌基因治疗的新手段. |
| 关 键 词： | 瘦素 siRNA A549细胞 增殖 凋亡 |
Effects of siRNA targeting leptin gene on proliferation and apoptosis in human lung adenocarcinoma A549 cell line |
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| CHENG Ke-wei , SUN Yue-wen , YUE Jing-jing , HUANG Mao , YIN Kai , WANG Fu-qiang , SHU Yong-qian , FENG Yuan.Effects of siRNA targeting leptin gene on proliferation and apoptosis in human lung adenocarcinoma A549 cell line[J].International Journal of Respiration,2012,32(4). | |
| Authors: | CHENG Ke-wei SUN Yue-wen YUE Jing-jing HUANG Mao YIN Kai WANG Fu-qiang SHU Yong-qian FENG Yuan |
| Abstract: | |
| Keywords: | Leptin siRNA A549 cells Proliferation Apoptosis |
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