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1.
本研究用重组烟曲霉半乳糖甘露聚糖 (AFMP1) ,制备免疫血清 ,建立一种以生物素 亲和素 (BA)系统为基础的夹心酶联免疫吸附试验 (ELISA)法 ,快速检测烟曲霉GM抗原[1] 。一、材料与方法1.动物和菌株来源 :家兔和豚鼠购自第一军医大学动物所 ,表达GST AFMP1融合蛋白BL2 1菌种及全部真菌标准株均由香港大学微生物系提供。2 .主要试剂 :GST融合蛋白纯化试剂盒、ProteinGSepharose 4B和ECL底物显色剂 (AmershamPharmacia公司 ) ,弗氏佐剂 (Sigma产品 ) ,活化Sulfo NH… 相似文献
2.
目的评价xTAG呼吸道病毒群快速检测(Respiratory Virus Panel Fast Array,RVP Fast)技术检测呼吸道病毒的临床应用价值。方法选取经实时荧光定量PCR/RT-PCR筛查的74份呼吸道病毒阳性和4份阴性鼻拭子标本,用RVP Fast和RTPCR同时检测78份标本的8种呼吸道病毒及其亚型(共19型),运用McNemarχ2检验,Kappa检验和线性回归方法对检测结果进行统计处理。结果两种方法检测78份标本有71份结果完全相符,包括55份单个病毒感染标本,12份混合病毒感染标本和4份阴性标本。两种方法检测结果总体比较无统计学差异(P0.05),一致性较好(Kappa=0.960,P0.01),RVP Fast荧光强度中位数(MFI)与实时荧光PCR/RT-PCR阈值循环数(Ct)呈负相关(r=-0.529,P0.01)。结论 RVP Fast芯片技术的检测性能准确可靠,可应用于国内呼吸道病毒感染的快速、高通量检测,具有推广价值。 相似文献
3.
林裕龙;温坤;王压娣;晋晶;车小燕 《广东医学》2011,32(3)
目的 探讨共有序列简并杂合寡核苷酸引物PCR(CODEHOP-PCR)在肠道病毒血清型鉴定中的临床应用价值。方法 以CODEHOP-PCR检测经实时荧光RT-PCR鉴定为EV71和CA16 手足口病患者的临床样本和病毒分离培养细胞上清的肠道病毒VP1基因片段,经琼脂糖凝胶电泳并回收、测序,与Genbank提供的序列比较,确定肠道病毒的血清型。结果 CODEHOP-PCR后的序列分析表明,所有的EV71毒株和CA16毒株与近几年国内报道的部分毒株同源性在96%以上,其血清分型结果验证了实时荧光RT-PCR分型结果的准确性。结论 CODEHOP-PCR合并测序用于肠道病毒血清型的准确鉴定,与传统的病毒分离及血清中和试验相比,具有更快速、准确的优点。 相似文献
4.
目的 建立一种可用于严重急性呼吸综合征(SARS)早期诊断的简便、快速、灵敏的实验室检测方法。方法 采用化学发光免疫分析方法 (Chemiluminescenceimmunosaasy, CLIA)测定 34种不同病毒培养上清和人血中SARS冠状病毒(SARS- CoV)核衣壳蛋白 (Nucleocapsidprotein, SARS- CoVN)。结果 6种不同SARS- CoV毒株测定均为阳性, 11种非SARS毒株测定均为阴性,最低可检出核酸定量为 6 3×10PFU/ml的SARS- CoV培养上清;测定 49例抗体阳性的临床血清样本,发热 6~10d的样本检出率最高可达 100%。结论 SARS -CoV的CLIA的灵敏度和特异性较高,且简便、快速,在SARS的早期诊断中有良好的应用前景。 相似文献
5.
6.
本文通过分析珠江医院SARS快速诊断科技攻关的组织管理的成功经验,阐述了学习型组织在加强科研管理、组织研究团队、提高应对科技型突发事件的科学研究应急能力方面的运用,说明了精简的扁平化结构和团队学习在科研组织管理中的高效性,提出把学习型组织与科学研究相结合,组织学习型团队是提高科研应急反应能力的有效措施之一。 相似文献
8.
抗SARS冠状病毒S1蛋白N端249至667的单克隆抗体的制备与鉴定 总被引:4,自引:1,他引:3
目的 在获得了具有免疫原性的SARS冠状病毒S1蛋白片段的基础上,制备和鉴定特异性抗该段S1蛋白单克隆抗体(mAb)。方法 原核表达含S蛋白受体结合区的SARS冠状病毒S1蛋白片段Slc(N端249-667氨基酸残基),其免疫原性经SARS病人恢复期血清鉴定后免疫BALB/c小鼠,按常规方法制备单克隆抗体,并采用ELISA间接法、免疫荧光和免疫印迹进行筛选和鉴定。结果 筛选出3株特异性针对SARS冠状病毒S1蛋白N端249-667的mAb杂交瘤细胞株,IgG亚类鉴定1株为IgG1,2株为IgG2a,经免疫荧光鉴定与人冠状病毒株229E和OC43无交叉反应。结论 获得3株抗SARS冠状病毒S蛋白受体结合区特异性单克隆抗体。为建立新的SARS冠状病毒检测方法的和进一步研究S蛋白的功能奠定了基础。 相似文献
9.
10.
禽流感病毒非结构蛋白1单克隆抗体的制备及其特异性分析 总被引:2,自引:0,他引:2
为研制禽流感病毒(H5N1)非结构蛋白1(NS1)的特异性单克隆抗体(mAb),并鉴定其特异性,本研究在分别表达了具有良好抗原性的A/Vietnam/1194/04(H5N1)-NS1和A/HongKong/486/97(H5N1)-NS1重组蛋白基础上,用A/Viet-nam/1194/04(H5N1)-NS1蛋白免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞进行融合,间接ELISA筛选阳性的杂交瘤细胞,并结合免疫荧光和免疫印迹对抗体的特异性进行鉴定,通过竞争抑制实验对单抗识别的抗原位点进行分析。结果共获得19株能识别4个H5N1-NS1蛋白不同抗原位点的mAb,亚类测定显示,5株为IgG2a、1株为IgG2b,另外13株为IgG1。这些mAb均与A/Vietnam/1194/04(H5N1)-NS1和A/HongKong/486/97(H5N1)-NS1重组蛋白特异性结合,免疫荧光检测均与A型流感病毒(H1N1和H3N2)有交叉反应,而与B型流感病毒无交叉现象。表明成功获得特异性针对H5N1-NS1蛋白的mAb,为进一步研究禽流感病毒NS1蛋白的结构与功能奠定基础。 相似文献