E-cadherin在白血病细胞膜表面的表达及与β-catenin细胞膜定位的关系

目的 研究E-cadherin在白血病细胞膜表面的表达并确定与其下游信号分子β-catenin细胞膜定位的关系.方法 通过免疫荧光标记、激光共聚焦显微镜观察46例白血病患者和17名正常人骨髓细胞膜表面E-cadherin的表达,并分析其与β-catenin在细胞内分布的相关性.结果 白血病患者E-cadherin表达水平(中位平均荧光强度16.78)显著低于正常人(26.03);进一步随机选取14份标本测定细胞膜表面E-cadherin的表达及β-catenin的细胞膜分布并分析二者的相关性,结果显示E-cadherin的表达与β-catenin的细胞膜分布明显相关(r=0.74,P=0.002);5-氮杂脱氧胞苷(5-Aza-CdR)诱导白血病细胞中E-cadherin表达后,β-catenin在细胞膜的分布增加,而细胞核内的β-catenin定位减少,初步证实E-cadherin表达后可募集β-catenin到细胞膜.结论 白血病细胞中E-cadherin表达降低或缺失可引起β'-catenin从细胞膜释放并进入细胞核,最终可能会引起β-catenin靶基因的转录.     

PIG7与丙戊酸促进人白血病细胞SKNO-1的分化和凋亡

 目的：研究p53诱导基因 7（PIG7）对人白血病细胞SKNO-1的作用及组蛋白脱乙酰酶抑制剂丙戊酸(VPA)的协同效应。方法：SKNO-1细胞经不同浓度的VPA（1~10 mmol/L）分别作用后,用MTT法检测VPA对SKNO-1细胞增殖的影响。通过病毒包装及感染系统分别将带有PIG7开放读码框和反义寡核苷酸片段的慢病毒载体导入SKNO-1细胞,用RT-PCR及Western blotting检测SKNO-1细胞中PIG7 的mRNA及蛋白表达情况;用流式细胞术检测VPA作用于病毒感染后SKNO-1细胞的凋亡率和分化抗原CD11b的表达; DNA ladder实验分析细胞的凋亡。结果：VPA可明显抑制SKNO-1细胞增殖,且具有时间、剂量依赖性。过表达PIG7促进SKNO-1细胞的凋亡和分化, 联合VPA作用后细胞分化抗原CD11b的表达水平和细胞凋亡率明显高于空载体组（P<0.05）,并出现典型的DNA梯状条带。结论：VPA具有抑制SKNO-1细胞增殖和诱导其分化及凋亡的作用。过表达PIG7可促进SKNO-1细胞的凋亡和分化,并增加SKNO-1细胞对VPA的敏感性。过表达PIG7联合VPA有望成为白血病治疗的新策略。     

癌蛋白iASPP对小鼠骨髓细胞增生促进作用研究

 目的　研究iASPP（一个新发现的p53家族抑制性成员）在小鼠骨髓细胞中过表达对细胞增生作用的影响。方法　构建反转录病毒载体,通过基因转导方法,使小鼠骨髓细胞过表达人类iASPP或（和）突变的N-Ras,采用集落形成实验检测细胞体外增生能力的变化。结果　转导iASPP的小鼠骨髓细胞与转导空载体对照组相比集落形成能力显著增强（P＜0.01）,转导突变的N-Ras也能提高小鼠骨髓细胞的体外增生能力,二者差异无统计学意义（P＞0.05）,但iASPP联合突变的N-Ras可使集落的数量显著多于单基因组（P＜0.05）及空载体对照组（P＜0.01）,而且集落体积增大。结论　癌蛋白iASPP可以显著提高小鼠骨髓细胞的体外增生能力,并且与突变的N-Ras具有协同作用,因而iASPP有望成为研究肿瘤及白血病治疗的新靶点。     

再生障碍性贫血血清造血调控活性及其临床意义

造血环境因素包括多种细胞成分(如各种骨髓基质细胞,外周血的T淋巴细胞与单核细胞等)及循环血液中的血清(血浆)。再生障碍性贫血(AA)患者血清(血浆)中含有多种已知及未知的造血正/负调控因子,对AA血清造血调控活性研究有助于从体液因子角度探讨造血环境对造血的影响,亦可用于指导患者临床分型治疗及判断患者预后。     

核受体辅助抑制因子中ETO结合结构域的确定

目的 为消除急性髓系白血病标志基因AML1／ETO的活性，确定核受体辅助抑制因子（nuclear receptor co-repressor,N-CoR)与ETO基因相互作用的活性部位。方法 用PCR扩增不同区段的N－CoR(N-CoRY)，克隆入酵母表达质粒pGADGL中，构建获得pGADGL／N－CoRY。应用酵母双杂交技术及X-gal染以确定pGADGL／N－CoRY10个区段的N－CoR是否与ETO结合。结果 N－CoR的988－1126氨基酸残基与1551－1801氨基酸残基共存时，才能与ETO发生结合作用，是ETO相互作用的结构域。结论 N－CoR两个结构域能与ETO的两个锌指结构作用，保持两种蛋白之间的稳定结合。     

真性红细胞增多症患者内源性红系集落检测及其临床意义

目的　了解真性红细胞增多症 (PV)患者内源性红系集落 (EEC)生长情况及其临床意义。方法　应用半固体甲基纤维素培养体系培养 2 6例PV患者及 19名正常对照者骨髓单个核细胞中的EEC ,应用流式细胞术检测 8例PV患者及 10名正常对照者骨髓单个核细胞AnnexinⅤ并分析其与EEC之关系。结果　① 2 6例PV患者中 2 5例 (96 .2 % )检测到EEC ,继发性红细胞增多症患者及正常对照组EEC检出率为 0。②PV患者的EEC数、EEC/Epo依赖CFU E(EEC率 )与患者血红蛋白水平呈正相关(r=0 .6 0 8,P =0 .0 1) ,EEC率与患者外周血白细胞和血小板计数及中性粒细胞碱性磷酸酶 (ALP)指数无明显相关性。③EEC与血清Epo水平无相关性 (r =0 .5 18,P =0 .12 5 )。④ 15例PV患者应用羟基脲(HU)和 (或 )干扰素 (IFN)治疗 ,治疗前EEC率与达完全缓解 (CR)所需治疗时间呈正相关 (r=0 .6 5 1,P=0 .0 0 9) ,与缓解持续时间呈负相关 (r=- 0 .5 92 ,P <0 .0 2 )。⑤ 7例应用HU和 (或 )IFN治疗的PV患者 ,血常规恢复正常后EEC及EEC率均减低。⑥EEC率与血栓栓塞发生率呈正相关 (r =0 .5 2 4 ,P =0 0 1)。⑦PV患者骨髓单个核细胞的凋亡率较正常对照组明显减低 ,PV患者中EEC与骨髓细胞凋亡率呈负相关 (r=- 0 .192 ,P <0 .0 4 5 )。结论　EEC特异性见于PV     

聚丙烯人工补片在骨恶性肿瘤关节置换中的应用

目的探讨骨恶性肿瘤关节置换患者术中应用聚丙烯人工补片修复关节囊及软组织的方法及其价值。方法2014年3月至2017年1月,回顾性分析12例接受肩关节及髋关节周围非病理性骨折的骨恶性肿瘤关节置换手术患者,男7例,女5例;年龄5~74岁,平均42岁。肩关节置换4例,髋关节置换8例。骨转移癌7例,骨原发性恶性肿瘤5例。所有患者均行广泛切除+假体置换术,并用聚丙烯人工补片修复关节囊。患者术前、术后的关节功能用美国骨与软组织肿瘤协会(musculoskeletal tumor society,MSTS)功能评价系统进行评估。结果本组患者均获随访,随访时间6~20个月,平均10.5个月。术后平均5d拔除术区引流管,伤口均I期愈合,术后功能恢复良好,均无术后并发症,伤口渗液无明显增多。术前MSTS关节功能评定,良4例,可8例;术后MSTS关节功能评定,良10例,可2例。随访期间,所有患者对诊疗效果满意。结论聚丙烯人工补片对骨恶性肿瘤广泛切除后软组织缺损的修复及关节假体置换后关节的稳定性和动力重建起到了重要的作用,近期疗效满意。     

组蛋白脱乙酰基酶抑制剂苯丁酸钠对基因PIG7的表达作用研究

目的研究组蛋白脱乙酰基酶抑制剂苯丁酸钠（PB）作用于Kasumi-1细胞后PIG7基因的表达变化及其与细胞分化凋亡的关系。方法采用半定量RT—PCR检测1,2,3mmol／LPB作用后24h、48hKasumi-1细胞PIG7基因的表达水平,同步观察细胞的形态变化,流式细胞仪检测CD11b、CD13和AnnexinV／PI表达水平。结果处理前PIG7低表达不能检测到,处理后均明显升高（P〈0．05）,不同浓度、作用时间间差异无统计学意义（P〉0．05）;细胞形态呈现分化凋亡改变;CD11b、CD13表达增加（P〈0．05）,AnnexinV^＊／PI^-增加（P〈0．05）。结论组蛋白脱乙酰基酶抑制剂苯丁酸钠作用后Kasumi-1细胞PIG7基因的表达增加,同时细胞发生分化凋亡,PB可能通过上调PIG7的表达引起上述生物学效应。     

骨膜下动脉瘤样骨囊肿的临床特点及外科治疗

目的 探讨骨膜下动脉瘤样骨囊肿的影像学、病理学特点及相关外科治疗。方法 回顾分析笔者医院于2013~2017年期间收住治疗6例经骨科、影像科及病理科共同诊断治疗的骨膜下动脉瘤样骨囊肿患者。男性5例,女性1例,患者年龄18~35岁,平均年龄23.3岁;左侧股骨远端4例,右侧股骨远端2例。1例患者因病变瘤体巨大采用双切口,余患者均采用病变部位正中切口,均采用延病变瘤体基底部完整切除肿瘤、瘤腔灭活术。6例患者均未值骨或用钢板固定。结果 患者X线及CT检查均可见囊状溶骨性改变,病变位于皮质或骨膜下未侵及髓腔,病变部位呈"蜂窝状"改变。MRI可见混杂信号的囊性改变,可见液液平面。本组病例中5例患者术中出血约100ml,1例患者肿瘤巨大术中出血约2000ml,术中无死亡病例,手术时间60~120min,平均90min。患者术后回访均未见复发。结论 骨膜下动脉瘤样骨囊肿是ABC的一种少见类型,临床上罕见。因其未侵及髓腔,故手术时可充分暴露病变部位后,沿瘤体基底部完整剥除病变组织,且术中出血较少,术后复发率较低。     

陈旧性Denis Ⅱ型骶骨骨折合并骶神经损伤的诊断与治疗

目的：探讨陈旧性Denis Ⅱ型骶骨骨折合并骶神经损伤的诊断及手术方法。方法：取60具骶骨干标本及26具完整骨盆标本，测量S1棘突与S1后孔同位置关系、骶前区血管、骶神经及梨状肌之间关系；对14例陈旧性DenisⅡ型骶骨骨折合并骶神经损伤患者，在常规骨盆X线片，CT，螺旋CT三维重建的同时，又采用显示骶神经全长的骶骨斜冠状位MR扫描，观察神经走向及眦领关系。11例行自行设计的后略骶神经管扩大减压术，3例行非手术治疗。结果：S1棘突于S1后孔中上1/3者占90%，骶前区主要血管有骶外侧动静脉和骶外侧血管、骶正中血管及臀上血管进入骶前孔的分支。血管位于骶丛神经腹侧，骶外侧斑管距离S1前孔大于10mm，S2前孔大于5mm。骶骨斜冠状位MR扫描可以显示骶神经全长及周围眦领关系。骶神经损伤时，发现有神经根走行改变(13例），损伤处神经很周围脂肪消失（11例），神经根管狭窄(10例)。14例均获得随访。随访时间6--12个月。平均7.1个月，术后改善情况，优9例，无变化1例。结论螺旋CT三维重建及骶骨斜冠状位MR扫描对于骶神经损伤的定位及定性诊断有重要价值。后路骶神经管扩大减压术是针对骶神经管、骶前孔处神经损伤的较理想手术方法。