miR-3195对人喉癌Hep-2细胞增殖的抑制作用及其机制

目的：探讨miR-3195对喉癌Hep2细胞增殖的影响及其分子机制。方法：选取2008年1月至2012年8月期间在南华大学教学医院郴州市第一人民医院耳鼻喉科收治的29例喉癌患者的喉癌组织及其相应的癌旁组织标本，采用qPCR检测miR-3195在喉癌和癌旁组织中的表达；构建miR-3195在喉癌Hep-2细胞中稳定高表达的细胞株，采用MTT法观察miR-3195稳定高表达组和对照组的增殖情况；建立裸鼠移植瘤模型，观察miR-3195稳定高表达的人喉癌细胞株Hep-2在裸鼠体内增殖的情况。利用生物信息学预测 miR-3195 的靶基因，构建 TBX1 3''UTR 的荧光素酶载体，双荧光素酶检测系统检测其荧光素酶活性；Western blotting检测稳定高表达miR-3195组和对照组细胞株的TBX1蛋白表达水平。结果：miR-3195在喉癌组织中的表达明显低于癌旁组织（P<0.01）；miR-3195上调可抑制Hep-2细胞的增殖（P<0.01），且可明显抑制裸鼠移植瘤瘤体的生长（P<0.05）；双荧光素酶报告基因检测结果表明miR-3195可能与TBX1靶向结合（P<0.05），同时Western blotting法验证了miR-3195能够抑制TBX1蛋白的表达（P<0.05）。结论：miR-3195对Hep2细胞有明显的增殖抑制作用，其分子机制可能与负性调控TBX1的表达有关。     

结核杆菌Pup-蛋白酶体系统与耐药结核杆菌耐药性的相关性研究

目的:检测不同耐药的结核杆菌临床分离株原核类泛素蛋白-蛋白酶体系统(以下简称:Pup-蛋白酶体系统)相关的Pup、Dop、PafA、Mpa基因的表达水平,探讨研究结核杆菌Pup-蛋白酶体系统与新疆地区广泛流行的耐药结核杆菌临床分离株耐药性的相关性。方法:以培养对数生长期的新疆地区广泛流行的耐药结核杆菌临床分离株为研究对象,分别提取结核杆菌临床分离的药物敏感菌株、单纯耐异烟肼的结核杆菌临床分离株(INH-MTB)、单纯耐利福平的结核杆菌临床分离株(RFP-MTB)、单纯耐链霉素的结核杆菌临床分离株(SM-MTB)、单纯耐乙胺丁醇的结核杆菌临床分离株(EB-MTB)、耐多药结核杆菌临床分离株(MDR)等各组菌株的总RNA,经纯度鉴定后,利用SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR方法,检测各组结核杆菌菌株的Pup、Dop、PafA、Mpa基因的表达水平,分析各组耐药结核杆菌临床分离株Pup-蛋白酶体系统相关的Pup、Dop、PafA、Mpa基因的表达与新疆地区广泛流行的耐药结核杆菌临床分离株耐药性的相关性。结果:与药物敏感菌株相比,Pup、Mpa基因在单一耐药菌株和耐多药菌株中表达有不同程度的下调,Dop、PafA基因在单一耐药菌株和耐多药菌株中表达有不同程度的上调,差异有统计学意义(P<0.05)。与MDR相比,Pup、Dop、Mpa基因在单一耐药菌株中表达有不同程度的上调,PafA基因在单一耐药菌株中表达有不同程度的下调,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:在结核杆菌临床分离的药物敏感菌株、INH-MTB组、RFP-MTB组、SM-MTB组、EB-MTB组和MDR组中,结核杆菌Pup、Dop、PafA、Mpa基因的表达差异,与新疆地区广泛流行的耐药结核杆菌临床分离株耐药性有相关性。     

瑞芬太尼清醒麻醉在无痛胃镜检查中的应用观察

胃镜检查在许多上消化道疾病的诊断及治疗中占有越来越重要的地位,作为一种侵入性检查,传统胃镜给患者带来紧张、焦虑,以及恶心、呕吐等诸多不良反应。为了减轻患者痛苦,使其在无痛舒适的状态下接受检查,近年来各大医院已广泛开展了无痛胃镜技术,这样便避免了传统胃镜给患者带来的痛苦,受到广大患者及胃镜医师的欢迎。目前常规的无痛胃镜技术多采用丙泊酚等短效静脉麻醉药,使患者处于全麻状态完成胃镜检查,然而这些药物对中枢神经系统、呼吸系统、循环系统都有明显的抑制作用,术中极易出现严重呼吸抑制、血压下降、心动过缓以及术毕苏醒困难。为克服上述不良反应,作者近年开展单纯瑞芬太尼麻醉技术,让患者在清醒无痛的状态下行胃镜检查,在临床实际应用中取得了满意的效果。     

固体火箭发动机的一种点火药量估算方法

针对传统经验公式估算点火药量存在的不足,从固相点火理论出发,推导得到固体发动机点火药量的计算公式。对不同配置的固体火箭发动机进行点火药量验算的结果表明,该公式估算的点火药量与发动机真实试验药量基本一致,估算精度明显优于传统经验公式,且公式通用性较好。     

多重PCR-反向线点杂交技术在检测女性念珠菌和阴道毛滴虫感染中的应用

目的建立和评价多重PCR-反向线点杂交技术(mPCR-RLB)快速同时检测阴道毛滴虫和念珠菌感染的方法。方法分别选择阴道毛滴虫特异性DNA重复序列设计一对特异性引物,以念珠菌属28srRNA至5.8s rRNA间隔序列Ⅱ(ITS2)为靶基因设计一对检测念珠菌的通用引物,构建二重PCR同时扩增阴道毛滴虫、白色念珠菌、热带念珠菌、克柔念珠菌、光滑念球菌、近平滑念珠菌、都柏林念株菌DNA,然后与通过氨基标记固定在尼龙膜上的各特异性寡核苷核探针杂交,并对女性阴道试子标本进行检测。结果多重PCR可同时扩增阴道毛滴虫、白色念珠菌、热带念珠菌、克柔念珠菌、光滑念球菌、近平滑念珠菌、都柏林念株菌临床或标准菌株DNA,上述念珠菌标准菌株可扩增出302～441bp DNA片段,阴道毛滴虫临床株可扩增出262bp DNA片段。6种念珠菌和阴道毛滴虫的特异性寡核苷酸探针可分别与其相应的PCR产物杂交。通过对150例女性阴道试子进行检测,mPCR-RLB检测念珠菌的阳性率为47.33%,阴道毛滴虫的阳性率为6.67%,二者同时阳性率为1.33%。而培养法检测念珠菌阳性率为36.00%,阴道毛滴虫的阳性率为2.00%,二者同时阳性率为0.67%。明显高于培养法(P<0.05)。结论多重PCR-RLB可快速同时检测念珠菌和阴道毛滴虫,为女性阴道炎的临床诊断提供了一种可靠的方法。     

抗原致敏树突状细胞抗小鼠白念珠菌系统感染的实验研究

目的研究不同形态白念珠菌致敏的小鼠骨髓来源树突状细胞(DC)对免疫抑制小鼠白念珠菌系统感染的免疫保护作用及所对应的细胞因子改变。方法孢子相和菌丝相白念珠菌在体外分别致敏小鼠骨髓来源的DC(BM-DC),测定混合培养上清IL-12水平;尾静脉回输免疫抑制小鼠体内后,ELISA法测定各组小鼠脾IFN-γ及IL-4水平,并检测肾携菌量。结果DC孢子致敏组上清IL-12水平(380.2±104.13)pg/mL明显高于DC菌丝致敏组和对照组(P<0.05);而DC菌丝致敏组(74.79±23.47)pg/mL与单纯DC培养组上清IL-12水平(19.71±9.21)pg/mL差异无统计学意义(P>0.05)。孢子致敏DC、菌丝致敏DC分别过继免疫小鼠后,前者脾脏IFN-γ水平(269.43±17.34)pg/g明显高于其他组(P<0.05),IL-4水平(6.23±0.37)pg/g则明显低于其他对照组(P<0.05);荷菌一周后孢子致敏DC回输组小鼠肾携菌量(3.58±2.32)×102CFUs与健康小鼠荷菌组比较无统计学意义(P>0.05);其他各组间肾携菌量比较则有统计学意义(P<0.05)。结论尾静脉回输白念珠菌孢子体外致敏的小鼠骨髓来源DC可有效诱导免疫抑制小鼠抗白念珠菌保护性免疫。     

不同类型的尖锐湿疣患者皮损中端粒酶活性的表达

低危型和高危型人乳头瘤病毒（HPV）感染可引起泌尿生殖器、皮肤、呼吸道、消化道等的良性上皮增生性病变，而且这些部位的上皮不典型增生与恶性肿瘤形成有关。端粒酶是一种能延长端粒末端的特殊的RNA逆转录酶，它可以以自身RNA为模板合成端粒DNA并加到染色体末端犤１，２犦。许多研究表明HPV蛋白表达并结合于细胞，通过激活端粒酶活性，改变细胞表型，促发受感染细胞增生，异常增生甚至恶变。本实验是为研究不同HPV型尖锐湿疣皮损中端粒酶活性表达及与HPV的致癌机理相互关系，探讨它们在尖锐湿疣（CA）发生中的作用机制及调节机…     

Marshall-White综合征10例临床分析

Marshall-White综合征临床少见,近几年来报道逐渐增多,自1994年以来国内已有20例报道[1-4]。为分析该综合征的临床特点,我们对协和医院皮肤科门诊1999年10月至2006年6月所诊治的10例该综合征患者进行分析,现报道如下。1临床资料10例患者中男性7例,女性3例。年龄19～37岁,平均年龄(29.4±5.5)岁。其中2例为学生,2例为公司职员,其余6例为工人。病程1～3年。所有患者均因无明显诱因出现上下肢白斑而就诊。皮肤科检查:四肢(以前臂及小腿伸侧为主,包括手背和足背)呈淡红色或暗红色斑,其上散在直径1～2cm苍白色斑点,边界清,形状不规则,似大理石样…     

树突状细胞分型进展与抗白念珠菌特异性免疫

树突状细胞(DC)因其特有的捕捉、吞噬、提呈抗原的能力在其被发现的初期就引起人们极大的研究热情。近年来随着DC培养、分离技术的突破，对DC的认识也日益深入。目前认为DC亚群的多样性及其功能的可塑性是其在免疫应答和免疫调节中多样化作用的重要基础。     

皮肤肿瘤及正常皮肤组织中端粒酶活性的表达

目的 检测皮肤肿瘤及正常皮肤组织中端粒酶活性的表达。方法 采用端粒重复扩增TRAP及PCR方法，检测28例皮肤肿瘤(包括良性、癌前病变及恶性肿瘤)及15例正常皮肤组织中端粒酶活性。结果 15例正常皮肤中端粒酶表达仅为13．3％。28例皮肤肿瘤中有端粒酶表达的为82．1％，其中恶性肿瘤的端粒酶活性明显高于良性、癌前病变者。结论 端粒酶可能是皮肤肿瘤癌变中的一个早期事件，与皮肤癌变的发生发展过程有一定关系，可以反映组织的增生程度。