耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌同源性研究

目的 探讨我院2001年8月～2002年3月显著增多的耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌之间的同源性。方法 用脉冲场凝胶电泳对7株耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌进行分型，明确其是否为同一菌株的克隆。结果 7株不动杆菌分为：A型2株，A1型2株，A2型1株。A1型与A2型之间的相似系数达94．6％，它们与A型的相似系数达84．9％，其余两株各有独特的PFGE分型。结论 其中5株耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌有高度同源性，第5号株极可能是此次院内感染的源头。     

对比分析DHPA法及API 20 strep法鉴定链球菌

目的：对比分析双歧层次鉴定法（DHPA法）及API20 strep法对链球菌的准确性与可比性。方法：用依据双歧鉴定法和层次分析原理建立的双歧层次分析（DHPA）法及API20 strep试条鉴定链球菌。结果：DHPA法和API法对链球菌47个已知单元（KIU）鉴定的正确性均为100％，DHPA法与API法对链球菌3410个试验编码分析的总符合率为77．9％，DHPA法与API法对161株临床菌株鉴定的符合率为73．3％。结论：DHPA法解决了API法存在的缺码或不能鉴定问题，是链球菌准确、快速、简便、经济和实用的鉴定方法。     

重症监护病房患者金黄色葡萄球菌感染的分子流行病学研究

目的通过对重症监护病房患者金黄色葡萄球菌(SA)感染的分子流行病学研究,为临床预防和研究SA感染提供科学依据。方法收集重症监护病房近3年SA培养阳性病例52例,(去除同一患者相同和不同部位标本)采用多重PCR扩增SA的毒素基因tst和sec,分析毒素基因的存在与发热的关系,通过PCR扩增耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)基因组稀有限制区旁的DNA序列,对MRSA进行基因分型。结果 52例患者中,19例为对甲氧西林敏感的金黄色葡萄球菌(MSSA),33例为MRSA,其中有22例MRSA携带tst和sec基因(66.7%),显著高于MSSA 7例携带tst和sec基因(P0.05);37例伴有发热,其中29例含有tst和sec基因,15例不伴发热,其中5例含tst和sec基因,发热组携带两种基因比率显著高于不发热组(P0.05);稀有限制区PCR(IRS-PCR)分型表明,2012~2014年感染MRSA的33例患者有22例为同种基因型。结论 tst和sec基因的存在可能与SA引起的发热有关,近3年该病房存在MRSA暴发流行可能。     

金黄色葡萄球菌和肠球菌属对17种抗菌药物敏感性分析

目的调查金黄色葡萄球菌和肠球菌属对17种抗菌药物的敏感性。方法收集医院2005—2006年临床分离的138株金黄色葡萄球菌和肠球菌属，琼脂稀释法检测17种抗菌药物对分离菌的最低抑菌浓度（MICs），数据分析采用wHONET5．3软件。结果耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRsA）占金黄色葡萄球菌20．7％，MRSA对万古霉素和替考拉宁仍高度敏感（100．0％），MIC50和MIC90分别为0．5和1．0μg／ml，氟喹诺酮类、复方新诺明、红霉素和克林霉素对MRSA的抗菌活性均较差（敏感率0～33．3％）；粪肠球菌对万古霉素和替考拉宁最敏感（100．0％），其次哌拉西林／他唑巴坦、亚胺培南和氨苄西林（97．2％～100．0％）；屎肠球菌仅万古霉素和替考拉宁高度敏感（100．0％），MRSA、MSSA、粪肠球菌和屎肠球菌对氟喹诺酮类均存在明显的交叉耐药。结论医院MRSA和屎肠球菌对多种抗菌药物高度耐药，应加强病原菌耐药性的监测。     

大肠埃希菌中质粒AmpC型β内酰胺酶基因型的检测

目的 :研究大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中AmpC型 β内酰胺酶的基因型。 方法 :收集对头孢西丁不敏感的 4 2株大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌 ,用酶提取物三维试验检测AmpC酶 ;用等电聚焦电泳、接合试验、聚合酶链反应 (PCR)确定AmpC型酶的表型和基因型。结果 :16株菌高产AmpC酶 ,其中 11株同时产超广谱 β内酰胺酶 (ESBLs) ;这 16株菌对亚胺培南敏感 ,5株只产AmpC酶的菌对头孢吡肟敏感 ;等电聚焦电泳发现这 16株菌产生 2～ 5种酶 ,且都有一个能为氯唑西林抑制的、等电点>7.8的酶带 ;1株大肠埃希菌通过接合试验可将头孢西丁耐药性传递给受体菌 ;PCR扩增和测序证实其为质粒介导的ACT 1型AmpC酶。 结论 :2 0 0 0年我院分离的对头孢西丁不敏感的 4 2株革兰阴性杆菌中证实有 15株大肠埃希菌和 1株肺炎克雷伯菌产AmpC酶 ,并在国内首次发现 1株大肠埃希菌产ACT 1型质粒AmpC酶。     

结核分枝杆菌对利福平和异烟肼耐药基因突变快速检测方法的建立

目的建立结核分枝杆菌对利福平和异烟肼耐药基因突变的快速检测方法。方法根据结核分枝杆菌标准株H37Rv序列，自行设计覆盖rpoB、katG、inhA基因突变区的系列寡核苷酸探针，并检测临床样品中结核分枝杆菌的基因突变情况，以此来判断耐药结果。结果在56个利福平耐药菌株中，有50个菌株都在rpoB基因上榆出有突变，利福平耐药突变检出率为89．3％（50／56）；有30个利福平敏感菌株rpoB基因上都未检出突变。有58个异烟肼培养的耐药菌株中有47个在katG或inhA基因上检出有突变，异烟肼耐药突变检出率为81．0％（47／58）；有30个异烟肼敏感菌株katG或inhA基因上未检出突变。结论用膜芯片检测结核分枝杆菌对利福平和异烟肼的耐药性，具有较高的特异性和敏感性，可用于临床结核分枝杆菌耐药性的检测。     

全国10所医院院内与社区感染常见病原菌耐药性分析

目的 监测我国不同地区10所教学医院分离的社区和院内常见病原菌的耐药性.方法 按设计方案收集10所教学医院中分离出的肺炎链球菌、甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA)、大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌;菌株经中心实验室复核后,采用Etest法测定抗菌药物对肺炎链球菌的最低抑菌浓度(MIC),用琼脂稀释法测定抗菌药物对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的MIC,数据输入WHONET 5.4软件进行耐药性分析.结果 在收集的353株肺炎链球菌中,青霉素敏感肺炎链球菌(PSSP)占74.2%,青霉素中介肺炎链球菌(PISP)占9.6%,耐青霉素肺炎链球菌(PRSP)占16.2%;不同医院分离的肺炎链球菌对青霉素的敏感性也不尽相同,在测试的β-内酰胺类药物中,头孢呋辛的敏感性较低,为0～76.7%,头孢曲松和阿莫西林/克拉维酸的敏感性较高,PSSP组中分别为98.1%和98.9%,PISP组中分别为61.8%和64.7%,PRSP组中分别为15.8%和10.5%;267株大肠埃希菌产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的比率为56.2%,206株肺炎克雷伯菌为42.7%,对于产ESBLs菌株,头孢噻肟和头孢曲松的敏感性均较低,而头孢他啶的敏感性在测试的β-内酰胺类药物中相对较高;177株MSSA的β-内酰胺酶产酶率为73.4%,测试的β-内酰胺类抗菌药物对MSSA表现出很好的抗菌活性,敏感率98.9%～100.0%,环丙沙星和左氧氟沙星的敏感率分别为80.8%和88.1%.结论 对于肺炎链球菌,氟喹诺酮类药物保持了较高的体外抗菌活性,头孢曲松和阿莫西林/克拉维酸在β-内酰胺类药物中表现较好;对于MSSA以及非产ESBLs的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌,β-内酰胺类药物均表现出较高的抗菌活性,对于产ESBLs的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌,头孢噻肟和头孢曲松的敏感性均较低,而头孢他啶、头孢吡肟和头孢哌酮/舒巴坦的敏感性相对较高.     

甲氧西林耐药溶血葡萄球菌糖肽类耐药突变株体外筛选

目的：调查在体外糖肽类选择性压力下,溶血葡萄球菌对糖肽类敏感性的变化。方法：琼脂稀释法检测万古霉素、替考拉宁和苯唑西林对6株溶血葡萄球菌的最低抑菌浓度（MIC）,连续浓度梯度法体外筛选万古霉素和替考拉宁耐药突变株。结果：6株甲氧西林耐药溶血葡萄球菌（MRSH）均筛选出替考拉宁耐药突变株（MIC=32～128μg／mL）．未筛选出万古霉素耐药突变株。万古霉素对6株替考拉宁耐药突变株仍保持较好的抗菌活性（MIC=2～4μg／mL）。结论：万古霉素对MRSH抗菌活性稳定,在抗生素压力下不易筛选出耐药株突变株,替考拉宁对MRSH抗菌活性很不稳定,在抗生素压力下极易筛选出耐药株突变株     

医院细菌耐药监测研究

目的 了解深圳地区医院临床分离菌的耐药情况。方法 2001年1--2002年6月，本院临床分离菌用Kirby-Bauer法进行药敏试验。结果 1734株细菌中革兰阳性菌占40．6％，革兰阴性菌占59．4％。最常见的临床分离菌是凝固酶阴性葡萄球菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌等；MRSA和MRCNS分别为37．8％和78．8％；粪肠球菌耐万古霉素株7．6％；大肠埃希菌中产ESBLs株占34．9％，肺炎克雷伯菌占34．2％；产ESBLs菌株对大多数抗菌药物的耐药率(除碳青酶烯类外)均显著高于非产ESBLs株。结论 细菌耐药性仍是目前临床上的难题，需采取积极措施，减缓细菌耐药性的增长。     

2327例血液及体液快速培养结果分析

目的：提高血培养及体液培养阳性率，快速准确作出病原学诊断。方法：用BacT/ALERT3D全自动血培养仪对2327份血液和体液标本进行检测，针对不同年龄患者选用标准血培养瓶，并对其检出阳性的时间、阳性率和病区分布、细菌种类及部分细菌耐药性进行评估。结果：培养时间缩短到5d，培养阳性率为20．7％，其中血液为16．9％，各种体液为32．2％，共检出细菌49种，真菌6种，血培养中葡萄球菌的比例高达60．1％，其中凝固酶阴性葡萄球菌对甲氧西林耐药率高达90％。结论：BacT／ALERT 3D全自动血培养仪提高了血培养及体液培养阳性率，缩短了检出时间。