检出3株携带新型基因盒组合形式Ⅰ类整合子的铜绿假单胞菌

目的 研究整合子介导铜绿假单胞菌耐药及多重耐药的机制。方法 整合子PCR法扩增整合子的可变区;联合限制性片段长度多态性分析（RFLP）和DNA测序技术分析整合子可变区的耐药基因。结果 98株南京地区铜绿假单胞菌中有35株（35．7％）整合子可变区扩增阳性,扩增片段大小1．0-4．0kb。共检出6种不同的可变区,含有编码对氨基糖苷类、β-内酰胺类和磺胺类抗菌药耐药的基因,其中有3例为新型基因盒组合形式,包括aadA6-orfD、aadB-blaP1和aadB-aac（6′）-Ⅱa-blaCARB-8,Genbank基因号分别为DQ 091179、DQ 141316和DQ 288251。结论 整合子参与了铜绿假单胞菌的耐药和多重耐药,主要携带氨基糖苷类耐药基因,首次报道了3种携带新型基因盒组合形式的Ⅰ类整合子。     

流行性出血热患者血、尿中免疫复合物的检测及其免疫发病机制的再探讨

采用改进的Digeon氏检测方法报告出血热患者免疫复合物的动态观察,并结合体液免疫指标和病情对出血热免疫发病机制进行了探讨。初步提出循环免疫复合物(CIC)的水平与病情有一定关系的看法。     

流行性出血热辨舌验齿的临床意义——附90例分析

流行性出血热(简称出血热)属中医温病范畴。我们对1979年11月～1980年1月收治90例出血热患者的舌象齿态作了观察,并对其与肝肾损害、血小板、细胞免疫和体液免疫功能、循环免疫复合物之间的内在联系进行了探讨。现报导如下: 对象与方法一、对象:男性53例,女性37例,年龄14岁～61岁。二、方法:在室内自然光线下用肉眼观察舌质的色泽、形态和质地:舌苔的苔色、厚薄、润燥及牙齿(门齿)润燥和齿垢。     

时间分辨免疫荧光定量检测乙型肝炎病毒前S1抗原的研究

目的 建立时间分辨免疫荧光定量分析乙型肝炎病毒PreS1抗原的方法.方法 以基因重组的带有PreS1抗原的乙型肝炎表面抗原作标准品,应用双抗体夹心免疫荧光分析方法,用抗PreS1单克隆抗体和抗-HBs分别作为固相抗体和铕标记抗体,若样本中含有PreS1抗原,则形成抗体-抗原-铕标记抗体复合物,加增强液解离铕离子,采用时间分辨荧光测量技术,对乙型肝炎病毒PreS1抗原进行检测.结果 自制TRFIA试剂检测PreS1抗原,单侧95%参考范围为0～0.26 ng/ml;自制TRFIA试剂与ELISA试剂对乙型肝炎患者血清标本中PreS1抗原的检测,TRFIA方法灵敏度高于ELISA方法,250份乙型肝炎患者血清标本中有3例标本ELISA方法结果为阴性,而用TRFIA方法可检测到PreS1抗原;对于弱阳性标本用ELISA方法检测不到时,TRFIA方法仍可检出.ELISA方法在一阳性标本1：4 096倍稀释时结果为阴性,而TRFIA方法在1：16 384倍稀释时仍为阳性;高、中、低三个浓度,批内和批间精密度测试变异系数（CV,%）均小于10%,平均回收率为103.3%;TRFIA方法检测PreS1抗原与HBsAg及HBeAg无交叉反应;50份我院正常体检者血清标本进行PreS1抗原的检测,结果均正常,特异性100%.结论 TRFIA方法定量检测PreS1抗原,灵敏度高,特异性强,能够准确及时敏感地反映患者体内乙型肝炎病毒的复制情况.     

荧光定量聚合酶链反应检测肺癌患者血清循环DNA的临床应用

循环DNA是指存在于血液、滑膜液等体液中的细胞外DNA ,主要以DNA蛋白质复合物的形式存在 ,部分为游离DNA。其在体液中处于一种动态平衡过程 ,由细胞受外源刺激后主动分泌或者细胞损伤或死亡后释放产生[1]。其变化与临床多种疾病 ,尤其是肿瘤有关。本研究用建立的循环DNA提取和定量检测方法 ,对临床不同疾病的血清中循环DNA水平进行研究。一、材料和方法1.标本来源 :随机选择 2 0 0 2年 4月至 6月本院经病理确诊为肺癌患者的血清标本 40份 ,年龄 52～ 84岁 ;肝癌标本 40份 ,年龄 46～ 76岁 ;门诊收集健康体检者血清 3 0份 ,年龄 50～…     

循证医学及其在医学检验中的应用

循证医学 (ｅｖｉｄｅｎｃｅ ｂａｓｅｄｍｅｄｉｃｉｎｅ ,ＥＢＭ )就是遵循证据的临床医学 ,其起源于 19世纪中叶的法国巴黎或更早时期。近 10年来 ,循证医学有了新的发展 ,成为包括循证医疗、循证诊断、循证决策、循证护理等近 10余个分支的医学学科[1] 。循证医学在医学领域中的迅速兴起 ,为以个人经验为主的临床医学注入了新的活力。“证据”是循证医学的基础 ,它主要来源于医学文献的研究报告 ,特别是采用随机对照实验 (ｒａｎｄｏｍｉｚｅｄｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄｔｒｉａｌ,ＲＣＴ)及设计合理、方法严谨的临床研究数据 ,针对临床医学…     

肺癌中结肠多发性腺瘤样息肉基因启动子1A序列甲基化模式的研究

目的 探寻结肠多发性腺瘤样息肉（APC）基因启动子1A序列中肺癌甲基化位点及其存在模式。方法 用甲基化序列特异性引物，对阳性控制样品（CB＋）、阴性控制样品（CB-）、13份正常肺组织及19份肺癌组织进行APC基因启动子1A序列甲基化特异性扩增（MSP），其扩增产物直接测序和进行克隆测序分析。结果 在19份肺癌组织中，APC基因启动子1A序列的707、714、719和726位点发生高甲基化，甲基化率分别为95％（18／19）、74％（14／19）、74％（14／19）和74％（14／19），与正常肺组织比较，差异均有统计学意义（P〈0．001）。而679和687位点甲基化发生率均为11％（2／19），与正常肺组织甲基化发生率（0／13）接近（P〉0．05）。结论 在APC基因启动子1A序列中存在CpG胞嘧啶二核苷酸特定甲基化模式，其对肺癌早期诊断可能有重要意义。     

2006年版CLSI/NCCLS有关抗生素敏感试验操作标准的更新要点

2006年1月美国临床和实验室标准化协会(the Clinical and Laboratory Standards Institute,CLSI,原名NCCLS)公布的第16版抗生素敏感试验操作标准(M100-S16)对15版进行了更新,以取代2005年及以前版本的内容。其主要变化源于2005年召开的抗生素药物敏感试验的专业会议。第16版的更新要点如下:(1)再次阐明奇异变形杆菌ESBLs检测的筛选与确认试验;(2)新增铜绿假单胞菌、不动杆菌属、洋葱伯克霍尔德菌、嗜麦芽窄食假单胞菌的纸片扩散和MIC解释标准的4个独立表格;(3)删除达托霉素(daptomycin)纸片扩散法的解释标准,修改了葡萄球菌属和链球菌属(除肺炎链球菌外)关于达托霉素琼脂稀释法药敏试验的建议,指出肠球菌属达托霉素琼脂稀释试验尚未被确认; (4)增加了万古霉素敏感性降低之金黄色葡萄菌的万古霉素BHI琼脂筛选试验;(5)修正了万古霉素对葡萄球菌属的     

临床细菌耐药状况及其分析

2004年从本院各临床科室送检的12248份标本（包括痰液、血液、脑脊液、引流液、中段尿、骨髓等）中培养分离出细菌共5338株，其中各科加强监护病室（ICU）阳性率最高为61％～82％，老年科、呼吸科、脑外科送检的阳性率在50％～60％之间，兹就其中主要细菌的抗生素药敏试验耐药情况列表分析如下（表1，表2）。     

细菌性阴道病实验室诊断方法的比较

【目的】比较细菌性阴道病的4种实验室诊断方法。【方法】随机选择就诊病人100例分别用Amsel法,组织多胺试验．一步法唾液酸酶活性的检测试验,革兰染色细菌评分法检测细菌性阴道病。【结果】Amsel法阳性率28％,组织多胺试验阳性率24％,一步法唾液酸酶活性的检测试验阳性率34％,革兰染色细菌评分法阳性率30％;唾液酸酶活性检测法与Amsel法,革兰染色细菌评分法相比较差异无显著性;组织多胺试验与Amsel法,革兰染色细菌评分法相比较差异无显著性;以Amsel法为标准,一步法唾液酸酶活性检测法和组织多胺试验的灵敏度分别为92．9％和71．4％,特异性分别为88．9％和94．4％,阳性预期值分别为76．5％和83．3％,阴性预期值分别为97．0％和89．5％;以革兰染色细菌评分法为标准．一步法唾液酸酶活性检测法和组织多胺试验的灵敏度分别为93．8％和66．7％,特异性分别为92．1％和94．3％,阳性预期值都为83．3％,阴性预期值分别为97．2％和86．8％。【结论】一步法唾液酸酶活性的检测试验和组织多胺试验快速,简便,易于标准化,可以用于临床诊断细菌性阴道病。