急性乙型肝炎患者pDCs上CD86表达变化及意义

目的 探讨外周血浆细胞样树突状细胞(pDCs)在急性乙型肝炎(AHB）患者临床转归中的变化及作用。方法 纳入2015年6月至2017年5月收治的急性乙型肝炎(AHB组)患者40例， 给予退黄、降酶、保肝等药物，并加用恩替卡韦0．5 mg空腹口服，1次/d。另纳入健康体检者26例为健康对照组（ HC组）。HC组于体检当天、AHB组于治疗前及治疗后6周采集外周静脉全血，采用ELISA法检测2组血浆HBV DNA、HBsAg、HbeAg及肝功能指标水平，并应用流式细胞仪检测pDCs的频数及其功能分子CD86的表达水平。结果 治疗6周后，AHB组临床症状显著缓解，血清学指标和乙型肝炎标志物水平显著下降（P<0.01）。治疗6周后，AHB组HBV DNA转阴率为82.5%，HBsAg清除率为72.5%，HBeAg血清学转换率为75.0%，与治疗前比较差异均有统计学意义（P<0.01）, HC组pDCs频数显著高于AHB组治疗前。AHB组治疗后CD86+pDCs显著高于治疗前。HC组CD86ABC显著低于AHB组治疗前。结论 在急性乙型肝炎患者外周血pDCs的数量降低。急性乙型肝炎患者在治疗后CD86+pDCs增多。急性乙型肝炎患者pDCs上CD86表达上调。     

血清CYFRA21-1、MMP-9及TTF-1水平在诊断肺恶性肿瘤患者中的临床价值

目的 探讨血清细胞角蛋白19片段(CYFRA21-1)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、甲状腺转录因子-1(TTF-1)水平在诊断肺恶性肿瘤的临床价值。 方法 选择2016年5月—2018年3月浙江省丽水市人民医院收治的27例肺恶性肿瘤患者、45例肺良性肿瘤患者及30例体检健康者作为研究对象，分别设为肺恶性肿瘤组、肺良性肿瘤组及健康对照组，采用电化学发光方法检测入选患者血清CYFRA21-1水平，采用酶联免疫吸附试验入选患者血清检测TTF-1、MMP-9水平。应用统计学方法比较差异。 结果 肺恶性肿瘤组的血清CYFRA21-1、MMP-9、TTF-1水平均明显高于良性肿瘤组和健康对照组，有统计学意义(P<0.05)。Logistic回归分析显示，CYFRA21-1、MMP-9、TTF-1与肺良性肿瘤均无相关性(P>0.01)，与肺恶性肿瘤有相关性(P＜0.01)。ROC曲线分析显示，血清CYFRA21-1诊断肺恶性肿瘤的AUC明显高于MMP-9和TTF-1，有统计学意义(P<0.05)，MMP-9与TTF-1之间的AUC比较差异无统计学意义(P>0.05)。血清CYFRA21-1诊断肺恶性肿瘤敏感性、特异性分别为67.8%、93.1%；MMP-9诊断肺恶性肿瘤分别为42.1%、87.2%；TTF-1分别为44.3%、95.7%。 结论 血清CYFRA21-1、MMP-9、TTF-1水平在诊断肺恶性肺肿瘤方面具有一定的潜在价值，其中以CYFRA21-1最高。      

头颈区黏膜淋巴瘤的WHO分类更新及诊断方法

2017年1月与9月，《WHO头颈肿瘤分类》（第4版）与《WHO造血淋巴组织肿瘤分类》（修订第4版）两本蓝皮书相继面世，笔者也有幸受邀参与了《WHO头颈肿瘤分类》（第4版）一书中淋巴造血组织肿瘤有关章节的编写工作，分别对这两个新分类中关于头颈区黏膜淋巴组织增生性疾病的内容更新、头颈区黏膜淋巴瘤的诊断方法以及该区域常见淋巴瘤类型的诊断与鉴别诊断要点作一简介。     

腹腔镜阑尾切除术治疗小儿阑尾炎术后感染研究

目的探究开腹与腹腔镜阑尾切除术治疗小儿阑尾炎术后感染及对血清炎症因子、免疫功能及T淋巴细胞亚型的影响。方法选取2013年1月-2016年12月医院收治的200例小儿阑尾炎患儿作为研究对象,按照手术类型分为开腹切除组和腹腔镜切除组,每组100例;统计两组患儿的手术指标;术后出现切口感染、腹腔脓肿及粘连性肠梗阻的概率;血清炎症因子及可溶性细胞间黏附分子-1(sICAM-1)的含量;统计两组患儿手术前及术后1周外周血中的白细胞(WBC)数目、中性粒细胞(N)数目及淋巴细胞(L)数目及CD_4~+、CD_8~+T细胞的比例。结果与开腹切除组患儿相比,腹腔镜切除组患儿的术后排气时间、抗菌药物使用时间及住院时间减少;术后发生切口感染、腹腔脓肿及粘连性肠梗阻的比例均减少(P<0.05);手术后1周,腹腔镜切除组患儿血清中炎症因子水平降低(P<0.05);sICAM-1含量显著降低(P<0.05);CD_4~+T细胞百分比及CD_4~+/CD_8~+增加(P<0.05)。结论腹腔镜切除术治疗小儿阑尾炎具有良好的临床效果,术后并发症较少且恢复较快,能够显著改善患儿术后炎症因子、免疫功能及T淋巴细胞亚型。     

甘欣锦辨治滤泡性淋巴瘤经验

甘欣锦主任医师认为,滤泡性淋巴瘤乃本虚标实之证,以正气不足为本,痰毒瘀邪为标。在临床上,针对未达到西医治疗指征的滤泡性淋巴瘤患者,甘老师以“养正积自消”为治疗原则,扶正贯穿于治疗的始终,并加用抗肿瘤药物,以达扶正抗瘤之效。甘老师多采用补益药物充养先后天之本,从而改善肿瘤患者的虚损,以达阴平阳秘、气血调畅、正气充足的状态。甘老师常以主方为基础结合治疗变证的方法改善局部症状,并减轻放化疗、靶向治疗所带来的不良反应。临证时,在中医辨证的基础上结合辨病分层治疗,调节扶正与解毒的主次。另外,对于出现的各种变证当灵活化裁以改善症状,通过中医的治疗手段改善患者生活质量,延长患者生存时间。     

结外NK/T细胞淋巴瘤患者鼻腔菌群失调与预后的关系

目的 探讨鼻腔菌群失调与结外NK/T细胞淋巴瘤（extranodal NK/T-cell lymphoma，ENKTCL）预后的相关性。方法 回顾性分析244例初治ENKTCL患者的临床资料及鼻拭子培养结果，根据是否存在鼻腔菌群失调将患者分为菌群正常组（n=114）和菌群失调组（n=130），并分析菌群失调与患者临床病理特征、治疗效果及预后的关系。结果  菌群失调组患者共培养出409株优势菌株，以金黄色葡萄球菌、草绿色链球菌、表皮葡萄球菌及铜绿假单胞菌为主。菌群失调组患者的乳酸脱氢酶升高比例高于菌群正常组（P=0.044），预后评分PINK≥1的中危或高危患者比例亦高于菌群正常组（P=0.003）。治疗结束时，菌群失调组患者的完全缓解率显著低于菌群正常组（45.5% vs 61.4%，P<0.05），5年无疾病进展生存率亦低于菌群正常组（48.4% vs 63.9%，P=0.048）。亚组分析显示，早期及PINK低危患者中，菌群失调与否与患者的无疾病进展生存期有关（P=0.022， 0.011）。结论 鼻腔菌群失调与ENKTCL患者预后密切相关，针对鼻腔菌群失调的措施可能进一步改善ENKTCL的治疗效果及预后。     

非小细胞肺癌中与PD-L1和PD-L2表达相关的基因

背景程序性细胞死亡配体1(programmed cell death ligand-1,PD-L1)和配体2(programmed cell death ligand-2,PD-L2)与程序性细胞死亡受体1(programmed cell death protein-1,PD-1)的相互作用是一个介导免疫逃逸的免疫抑制检查点,因此是癌症中基于阻滞的免疫治疗的重要靶点。在非小细胞肺癌(nonsmall-celllungcancer,NSCLC)中,有必要对PD-1检查点阻滞反应生物学进行深入了解,并确定生物标志物以预测其对免疫疗法的临床反应。在本研究中,我们系统描述了NSCLC中PD-L1和PD-L2表达相关基因。方法我们进行了回顾性比较分析,来确定NSCLC中PD-L1和PD-L2 mRNA表达相关基因。为此,我们考察了肿瘤细胞系百科全书(Cancer Cell Line Encyclopedia,CCLE)数据库中肺–非小细胞(lung non-small-cell,Lung_NSC)和癌症基因组图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)数据库中肺腺癌(lung adenocarcinoma,LUAD)和鳞状细胞癌(lung squamous cell carcinoma,LUSC)的可用数据集。结果通过对CCLE数据集Lung_NSC的分析确定了PD-L1和PD-L2之间的表达相关性。此外,我们发现了489个基因与PD-L1相关、191个基因与PD-L2相关,以及111个基因与二者均有表达相关性。在TCGA数据集LUAD和LUSC中对PD-L1和PD-L2也进行了表达相关研究。在LUAD中,我们发现了257个基因与PD-L1相关、914个基因与PD-L2相关以及211个基因与二者均有表达相关性。在LUSC中,我们发现了26个基因与PD-L1相关、326个基因与PD-L2相关以及13个基因与二者均有表达相关性。只有少数基因表达在CCLE和TCGA数据集中均表现为与PD-L1和PD-L2相关。涉及干扰素信号转导基因的表达尤其与Lung_NSC中的PD-L1、LUSC中的PD-L2以及LUAD中的PD-L1和PD-L2的表达相关基因汇聚。在LUSC,PD-L1的表达,以及PD-L2的表达(相比之下相关程度较小)与染色体9p24区的基因相关,表明染色体9p24拓扑相关结构域是LUSC中PD-L1表达特别重要的驱动力。对PD-L1和PD-L2的受体PD-1、分化群80(cluster of differentiation,CD80)和排斥导向分子B(repulsive guidance molecule B,RGMB)的表达相关分析表明,在LUAD中PD-1和CD80表达与PD-L1和PD-L2均相关。在LUSC中CD80表达与PD-L2相关。结论我们提出了与NSCLC中PD-L1和PD-L2 mRNA表达相关的基因特征,这可能对于了解PD-1检查点阻滞反应生物学和开发基于基因特征的生物标志物以预测免疫疗法的临床反应具有重要意义。     

土木香内酯对人骨肉瘤143B细胞恶性生物学行为的影响

目的：探讨土木香内酯（alantolactone，ALT）对人骨肉瘤143B细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响及其作用机制。方法：用不同浓度（0、4、6、8、10 μmol/L）的ALT处理人骨肉瘤143B细胞后，用结晶紫染色法和MTT实验检测细胞的增殖能力，用划痕愈合实验、Transwell 小室法、Hoechst33258 染色法分别检测细胞的迁移、侵袭和凋亡水平，用qPCR及Western blotting（WB）分别检测细胞中E-cadherin 和N-cadherin、caspase-3、cleaved-caspase-3（c-caspase-3）、PARP和cleaved-PARP（c-PARP）mRNA和蛋白表达水平。用荧光素酶报告基因实验检测T细胞淋巴因子或淋巴增强因子（T cell lymphocyte factor/lymphoid enhancer factor,TCF/LEF）转录活性，qPCR及WB检测β-catenin 及MMP-7、c-Myc mRNA和蛋白表达水平。结果：ALT能够抑制骨肉瘤143B 细胞的增殖、迁移和侵袭，同时促进细胞凋亡（P<0.05 或P<0.01）。经8、10 μmol/L ALT处理后，143B细胞中PARP mRNA和蛋白水平显著上调，c-caspase-3 和c-PARP 蛋白水平表达增加（均P<0.05）；E-cadherin mRNA 和蛋白水平表达上调、N-cadherin mRNA 和蛋白表达水平下调，同时TCF/LEF 转录活性明显下降（P<0.05 或P<0.01），β-catenin、MMP-7 和c-Myc mRNA和蛋白表达水平显著下调（P<0.05 或P<0.01）。结论：ALT通过抑制Wnt/β-catenin 信号通路的活性从而抑制人骨肉瘤143B细胞增殖、迁移和侵袭，并促进其凋亡。     

RG108 调控 TFPI-2 甲基化/TMPRSS4 表达对 NSCLC 细胞增殖和凋亡的影响

目的：探讨RG108对人非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer, NSCLC）A549和H1299细胞增殖、凋亡的影响及其可能的作用机制。方法：体外培养A549和H1299细胞，经不同浓度RG108处理后，采用MTT法、流式细胞术分别检测细胞增殖率、细胞周期和凋亡水平；qPCR和Western blotting（WB）法检测细胞内TFPI-2 mRNA和蛋白的表达及TMPRSS4的表达量，以甲基化特异性PCR和比色法检测细胞中TFPI-2启动子区域甲基化的状态和程度；分别采用siRNA-TFPI-2和pcDNA3.0-TMPRSS4质粒敲减TFPI-2或过表达TMPRSS4，然后检测细胞增殖率及凋亡率的变化。结果：RG108处理后，A549和H1299细胞的增殖率显著降低（均P<0.05）、细胞周期阻滞于G1/S期（均P<0.05）而凋亡率显著增加（均P<0.01），细胞中TFPI-2 mRNA及蛋白表达水平均显著升高（P<0.01和P<0.05），同时细胞中TFPI-2启动子区域甲基化程度显著降低（均P<0.05）、TMPRSS4的表达也明显减少（P<0.05）。沉默TFPI-2表达后，A549和H1299细胞的增殖水平显著增加（均P<0.05），而转染pcDNA3.0-TMPRSS4质粒则显著降低细胞的凋亡率（均P<0.05）。结论：RG108能够通过抑制TFPI-2甲基化负向调控TMPRSS4表达进而抑制A549和H1299细胞的增殖，并促进其凋亡。