肠易激综合征患者内脏高敏感机制的实验研究

目的:研究肠易激综合征(IBS)患者肠黏膜肥大细胞 (MC)与神经肽免疫反应阳性纤维有无变化及其在IBS中的可能作用和临床意义。方法:黏膜标本取自19例正常人、22例腹泻型IBS患者和20例便秘型IBS患者的回肠末端、回盲部、升结肠、乙状结肠,应用特殊组化染色法(甲苯胺蓝改良染色法)和免疫组化染色法分别对MC和神经肽免疫反应纤维进行染色,并应用彩色病理图像分析软件及免疫组化分析软件进行分析。在回盲部和乙状结肠各加取2块黏膜标本,     

细胞外信号调节激酶在应激性溃疡发病中的作用

目的:探讨细胞外信号调节激酶1/2(extracellular signal-regulated kinase 1/2,ERK1/2)在实验性应激性溃疡发病中的作用.方法:采用浸水束缚(water-immersion restraint,WIR)应激实验复制大鼠应激性溃疡模型.检测WIR应激5 min、15 min、30 min、1 h、2 h和3.5 h各时间点的胃黏膜ERK1/2活化情况,并观察特异性ERK1/2抑制剂PD98059预处理(1 mg/kg,iv.)对胃黏膜损伤的影响.采用Western印迹检测ERK1/2和caspase-3表达,激酶活性分析方法检测ERK1/2活性,电泳迁移率变动分析(EMSA)检测转录因子活化蛋白1(AP-1)和核因子κB(NF-κB)DNA结合活性,Northern印迹检测TNF-α和IL-1β mRNA表达,采用溃疡指数(UI)计分和病理学检查评价胃黏膜病变程度, TUNEL技术检测和定量细胞凋亡.结果:正常大鼠胃黏膜仅检测到极微弱的磷酸化ERK1/2表达,WIR应激15 min后胃黏膜ERK1/2即发生活化并于3.5 h后达到峰值.PD98059抑制ERK活化后,胃黏膜AP-1和NF-κB活性及TNF-α和IL-1β mRNA表达显著下调,胃黏膜损伤程度也明显减轻,同时伴有胃黏膜caspase-3活化和凋亡轻度增加.结论:ERK1/2活化在浸水束缚应激诱导的胃黏膜损伤中发挥了重要作用.     

糖尿病等病史、家族史与胰腺癌关系的研究

探讨中国人胰腺,癌的发生与糖尿病等疾病及家族史的关系。以493例病理确诊的胰腺癌患者作为病例组，1031例非肿瘤患者年龄和性别、经济收入频数匹配的同来源病例为对照组，用病例对照研究的方法比值比（OR）及95％可信区间（CI），以估计糖尿病等病史及家族史的相对危险性。结果表明，诊断胰腺癌2年以上患糖尿病、胆石症、慢性胰腺炎、癌症、肺结核病、丝门螺杆菌感染、癌症家族史和糖尿病家族史的OR值（95％CI）分别为4.64(2.05-10.49）、4.12(2.81-6.04)、18.38(6.33-53.35)、9.47(4.97-18.06）、4.21(2.30-7.72）、1.14(0.45-2.89）、2.01(1.29-3.14)、0.83(0.15-4.56）。糖尿病和胆石症Logistic回归分析P＜0.05。因此糖尿病、胆石症、胰腺炎、癌症史、肺结核病史及癌症家族史是胰腺癌的危险因素，而糖尿病和胆石症是其独立危险因素。     

血管紧张素Ⅱ诱导大鼠胰星状细胞增殖和胶原合成

目的:研究血管紧张素Ⅱ(angiotensin Ⅱ,Ang Ⅱ)对大鼠胰星状细胞(pancreatic stellate cells,PSCs)增殖和活化的影响.方法:取第4～7代培养的大鼠PSCs,采用无血清DMEM培养液培养48 h使细胞同步静止化后,换含1、10和100 nmol/L Ang Ⅱ的无血清培养液继续培养24 h或48 h;另外,在加入100 nmol/L Ang Ⅱ无血清培养液前加入100 nmol/L AT1受体拮抗剂ZD7155或AT2受体拮抗剂PD123319.分别采用[3H]-胸嘧啶核苷掺入、[3H]-脯氨酸掺入、Western印迹和Northern印迹法动态检测细胞DNA合成速率、胶原合成速率、α-平滑肌动蛋白和Ⅰ型前胶原mRNA表达.结果:与正常对照组比较,1 nmol/L Ang Ⅱ刺激24 h后细胞DNA合成率无显著增加(P>0.05),而10和100 nmol/L处理组细胞DNA合成率显著增加(P值均<0.05);刺激48 h后,1、10和100 nmol/L Ang Ⅱ处理组细胞胶原合成率和Ⅰ型前胶原mRNA表达水平均明显增加(P值均<0.05),但α-平滑肌动蛋白表达无明显变化(P值均>0.05).与Ang Ⅱ(100 nmol/L)处理组比较,Ang Ⅱ(100 nmol/L) ZD7155(100 nmol/L)处理组细胞DNA合成率、胶原合成率和Ⅰ型前胶原mRNA表达水平均显著下降(P值均<0.01),而Ang Ⅱ(100 nmol/L) PD123319(100 nmol/L)处理组均无明显变化(P值均>0.05).结论:Ang Ⅱ通过AT1受体介导,可剂量依赖性诱导大鼠PSCs增殖和胶原合成,从而参与胰腺纤维化的发生.     

曲古菌素A对人胰腺癌PaTu-8988细胞增殖和细胞周期的影响

目的 观察曲古菌素A(tfichostatin A,TSA)对人胰腺癌PaTu-8988细胞增殖及细胞周期的影响.方法 不同浓度(0.1、0.5、2.0 μmol/L)TSA处理人胰腺癌PaTu-8988细胞,并设空白对照组.采用WST-8法检测细胞存活率;流式细胞仪检测细胞周期的变化;实时定量PCR检测细胞周期相关基因p21和cyclin DI mRNA的表达.结果 对照组、TSA 0.1μmol/L、0.5μmol/L和2.0μmol/L组的细胞存活率分别为(100.0±4.2)%、(88.5±4.2)%、(79.7±5.0)%和(64.3±7.2)%,各TSA组均显著低于对照组(P<0.01).TSA 0.1μmoL/L、0.5μmol/L组的细胞以G1期居多,2.0μmol/L组(50.29±7.53)%细胞阻滞在G2/M期.TSA各组p21 mRNA表达值分别为5.29±1.16、7.79±0.41、8.61±0.73,较对照组l,00±0.08显著升高(P<0.01);cyclin DI mRNA表达值分别为1.13±0.12、0.42±0.06、0.19±0.06,较对照组1.00±0.07表达降低(P<0.05).结论 TSA通过上调p21及下调cyclin D1基因的表达,导致细胞周期阻滞.     

cagⅠ在中国人群感染幽门螺杆菌中的分布及意义

探讨一新的毒力因子相关基因群－ｃａｇ致病岛中ｃａｇ Ⅰ部分在中国人群感染幽门螺杆菌（Ｈｐ）中的检出率及其与临床疾病的关系。采用ＰＣＲ方法检测了１０７例临床分离培养的Ｈｐ菌株,扩增ｃａｇ Ⅰ中的１７０ｂｐ片段。结果：ｃａｇ Ⅰ的阳性检出率为８６．９％,在慢性胃炎、消化性溃疡、胃癌等疾病间的检出无显著差异（Ｐ〉０．０５）。并且与胃粘膜组织的淋巴细胞、浆细胞、嗜中性粒细胞等炎症细胞的浸润程度无关（Ｐ〉０．０５）。结论：ｃａｇⅠ在中国人群感染Ｈｐ中的检出率很高,在慢性胃炎、消化性溃疡、胃癌等疾病中均有相当高的检出率,但其检出率在疾病间比较无统计学差异。     

肠易激综合征肥大细胞与P物质免疫反应阳性神经纤维的实验研究

目的　探讨肠易激综合征 (IBS)患者回盲部 (ICJ)肥大细胞 (MC)、P物质 (SP)免疫反应阳性神经纤维有无变化及其在IBS中的可能作用和临床意义。方法　黏膜标本取自 2 0名正常人和 31例IBS患者回盲部 ,应用特殊组化染色法 (甲苯胺蓝改良染色法 )和免疫组化染色法分别对MC和SP免疫反应性神经纤维进行染色 ,并应用彩色病理图像分析软件及免疫组化分析软件进行分析 ;电镜观察MC与神经纤维的关系。结果　IBS患者回盲部MC明显增多 (P <0 .0 1 ) ,SP免疫反应阳性纤维表达增强(P <0 .0 1 ) ,两者密切相关 (r =0 .646 7,P <0 .0 1 ) ;SP免疫反应阳性纤维与MC靠近或毗邻 ,神经纤维属无髓纤维。结论　MC与SP免疫反应阳性神经纤维关系密切 ,MC、SP免疫反应阳性神经纤维及其相互作用在IBS的病理生理中具有重要意义 ,并为研究神经内分泌与免疫调节的双向交流提供了形态学基础。     

人胰腺癌及癌旁组织中血管紧张素Ⅱ1型受体蛋白的表达

目的检测血管紧张素Ⅱ 1型受体(angiotensin Ⅱ type 1 receptor,AT1)在人胰腺癌和癌旁组织中的表达.方法应用免疫组织化学方法检测30例胰腺癌及癌旁组织中AT1的表达.结果 AT1在胰腺癌及癌旁组织中均有表达,其阳性表达率分别为56.7%(17/30)、13.3%(4/30).两者有显著性差异(P<0.01),其表达强度也有显著性差异(P<0.001).结论 AT1对维持人胰腺癌的生长发挥重要作用,选择性AT1拮抗剂对胰腺癌可能是一种有用的预防和治疗策略.     

ZD7155对人胰腺癌抑制作用的体内研究

目的最近的研究表明,血管紧张素Ⅱ1型受体在胰腺癌组织和细胞中存在高表达,本研究观察血管紧张素Ⅱ1型受体拮抗剂对人胰腺癌细胞系裸鼠移植瘤模型的肿瘤抑制作用.     

非糜烂性反流病患者食管内脏高敏感性与食管下括约肌局部降钙素基因相关肽阳性神经纤维的关系

背景：食管内脏高敏感性是非糜烂性反流病（NERD）最重要的病理生理特征之一，但引起食管内脏感觉过敏的确切机制仍不甚清楚。目的：通过测定NERD患者食管对机械扩张刺激和对酸刺激的敏感性变化和降钙素基因相关肽（CGRP）在食管下括约肌（LES）局部组织中的表达，探讨食管感知阈值与LES局部黏膜CGRP表达之间的关系。方法：采用Synectics内脏刺激器／电子气压泵行食管气囊扩张术以检测食管对机械扩张刺激的敏感性；采用食管酸灌注试验（betastein test）检测食管对酸的敏感性；采用免疫组化法和罔像分析技术观察LES局部组织中CGRP的表达。结果：根据对酸刺激和（或）机械扩张刺激的感知过敏，NERD患者可分为感知过敏组（21例）和感知正常组（10例）。感知过敏组患者食管对气囊扩张刺激的初始感知闽值和最大耐受疼痛阈值较感知正常组和正常对照组显著降低（P〈0．05）。感觉过敏组LES黏膜中CGRP阳性纤维数和平均吸光度（A）值较感知正常组和正常对照组显著增高（P〈0．05）。LES局部组织中CGRP阳性产物A值与食管初始感知阈值和最大耐受疼痛阈值呈直线负相关（r分别为-0．68和-0．79．P〈0．03）。结论：多数NERD患者存在对食管机械扩张刺激和（或）对食管酸刺激感知过敏；感知过敏的NERD患者其LES局部黏膜中CGRP表达增加，提示LES肽能神经的改变可能与食管内脏高敏感性有关。