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1.
目的 建立胰腺癌伴神经浸润的动物模型.方法 32只裸鼠分为4组,每组8只.将人胰腺癌细胞SW1990、CAPAN-2、PANC1分别注射于裸鼠的坐骨神经周围,以不做任何处理的裸鼠作为对照组.观察术后裸鼠体质量变化、成瘤情况、成瘤时间、造模成功率等指标.结果 对照组裸鼠体质量增加,各癌细胞注射组裸鼠成瘤后体质量明显下降,甚至呈现恶液质,成瘤侧肢体活动受限.CAPAN-2注射组及SW1990注射组的8只裸鼠最终均成瘤,PANC1注射组只有5只成瘤.以肿瘤最长径长至约0.8 cm为时间截点,CAPAN-2注射组、PANC1注射组、SW1990注射组裸鼠的成瘤时间分别为(49.8±5.0)、(56.6±2.4)、(25.4±3.0)d.SW1990注射组成瘤时间最短,PANC1注射组成瘤时间最长,3组间成瘤时间的差异具有统计学意义(F=73.51,P<0.01).CAPAN-2注射组、PANC1注射组、SW1990注射组裸鼠神经浸润造模成功率分别为87.5% (7/8)、20.0%(1/5)、50.0% (4/8).结论 成功建立了胰腺癌伴神经浸润动物模型,但不同的胰腺癌细胞系建立的动物模型具有不同的特点. 相似文献
2.
目的观察沉默组蛋白去乙酰化酶1(HDAC1)基因对人胰腺癌PaTu8988细胞增殖、凋亡的影响及可能机制。方法胰腺癌PaTu8988细胞株分为空白对照组(不予任何处理)、阴性对照siRNA组(予以30nmol/L阴性siRNA)、siRNA1组(予以15nmol/LHDAC1siRNA)和siRNA2组(予以30nmol/LHDAC1siRNA)。siRNA转染48h后,用相对实时定量RT-PCR法和West-ernblotting检测HDAC1基因表达情况;相对实时定量RT-PCR法检测细胞增殖凋亡相关基因p21、Bcl-2、Bax的表达;WST-8法检测细胞增殖情况;流式细胞术检测细胞凋亡变化。结果转染HDAC1siRNA48h后人胰腺癌PaTu8988细胞中HDAC1mRNA表达量在siRNA1组和siRNA2组分别为46.1%±6.1%和32.3%±1.4%,均显著低于空白对照组(100.0%±3.4%)和阴性对照siRNA组(87.4%±28.3%,P<0.05)。Westernblotting显示HDAC1蛋白表达量亦明显下降,以siRNA2组表达量最低(P<0.05)。WST-8法检测显示4组细... 相似文献
3.
目的 检测胰腺癌SPARC基因CpG岛的甲基化状态及其与临床病理参数的关系.方法 收集17例胰腺癌及相应癌旁组织、6例CP和6例正常胰腺组织以及6例健康成人外周血液标本,抽提DNA,进行亚硫酸氢盐修饰,然后行甲基化特异性PCR,检测SPARC基因第一外显子区CpG岛的甲基化状态,并分析与肿瘤病理参数的关系.结果 健康人外周血白细胞DNA中SPARC基因第一外显子区CpG位点均无甲基化.正常胰腺、CP、胰腺癌及相应癌旁组织SPARC基因第2、3、4、5、6、7 CpG位点的甲基化率分别为61.6%、47.1%、37.5%、24.7%;第1,8、9、10、11、12 CpG位点的甲基化率分别为52.0%、28.7%、16.7%和0.胰腺癌SPARC基因甲基化率与正常胰腺、CP比较均差别非常显著(P<0.001),与相应癌旁组织比较差别不显著.胰腺癌SPARC基因CpG岛甲基化与患者性别、年龄、危险诱因(如长期吸烟或饮酒、CP)、肿瘤大小、分化程度、TNM分期、淋巴结转移等均无显著差异.结论 胰腺癌SPARC基因第一外显子区CpG岛为高甲基化状态,可能为胰腺癌发生、发展的早期事件. 相似文献
4.
目的 探讨运动相关蛋白Fascin在胰腺癌的表达及其与临床病理特征的关系.方法 采用RT-PCR法检测SW1990、Patu8988、BxPC3、CfPAC1 4株胰腺癌细胞株Fascin mRNA表达;采用免疫组化方法 检测54例胰腺癌及42例相应癌旁胰腺组织Fascin蛋白表达.结果 胰腺癌细胞株SW1990、Patu8988、CfPAC1有Fascin mRNA表达,BxPC3无表达;54例胰腺癌组织Fascin蛋白表达阳性35例,占64.8%,42例癌旁胰腺组织中均无阳性表达.Fascin蛋白表达与肿瘤分化程度(P<0.01)和淋巴转移(P<0.05)呈显著正相关,但与肿瘤大小及远处转移无相关性(P>0.05).结论 Fascin蛋白在胰腺癌组织中有较高的阳性表达率,检测其表达有助于胰腺癌的诊断,并有助于判断胰腺癌恶性程度. 相似文献
5.
目的 构建入神经元正五聚蛋白2(NPTX2)真核表达载体.转染人胰腺癌细胞PANC1,建立稳定转染的细胞系.方法 通过双酶切的方法获得人NPTX2全长cDNA,利用Not I和EcoR I酶切位点将其插入到真核表达载体pcDNA3.1(+),经酶切和测序验证盾,用脂质体转染法转染PANC1细胞,通过G418筛选,建立稳定转染的PANC1细胞,用实时定量PCR方法筛选NPTX2 mRNA高表达克隆.结果 成功构建了pcDNA3.1(+)-NPTX2真核表达载体.并建立了稳定转染的PANC1细胞,成功表达了目的 基因.结论 真核表达载体的构建和稳定转染PANC1细胞系的建立为进一步研究NPTX2基因在胰腺癌细胞的作用奠定了良好的基础. 相似文献
6.
目的:研究乳癌相关肽(PS2)在水浸束缚应激(WRS)大鼠胃粘膜基因表达的变化,探讨其在应激胃粘膜损伤中的修复作用。方法:采用单次及单次和重复WRS制作模型,动态监测胃粘膜血流量(GMBF),大体及光镜下观察粘膜损伤程度(UI)及组织学变化,逆转录-多聚酶链反应(RT-PCR)检测PS。的基因表达变化,通过免疫组化染色法进一步证实pS2的表达。结果:①单次应激造成胃粘膜广泛损伤,但UI在2、4、8 h逐渐减小,至8 h降为64.9%,GMBF逐渐恢复,至8h上升为正常的89.8%,pS2。基因表达逐渐增强(0.51±0.14与0.77±0.11,P<0.01),免疫组化染色计分为0.95±0.00与1.41±0.04(P<0.001);②单次和重复应激后胃粘膜产生适应性,GMFB上升,损伤逐渐减轻,4次应激后,UI降低为单次应激的21.99%,GMBF上升为正常的94.2%,且胃腺区细胞增殖,pS2基因表达增强(0.37±0.02与0.77±0.01,P<0.01),免疫组织化学染色计分为0.55±0.04与2.46±0.08(P<0.01)。结论:pS2可能参与胃粘膜的早期重建(上皮移行),还有可能参与胃粘 相似文献
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胶原含量变化在食管支架术后再狭窄形成中的意义 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 研究食管支架术后再狭窄组织中胶原纤维含量的变化及其意义。方法 选择16只成年健康实验犬,均分为4组,采用“自体阔筋膜移植固定法”植入“Z”型食管支架,分别于术后1、2、4、8周处死动物,取出置架部位的食管组织,进行大体形态,光学显微镜,电子显微镜观察;经特殊染色,计算胶原纤维的体积密度,同时采用放免方法检测组织中Ⅰ、Ⅲ型胶原的含量;氨基酸成分分析法检测组织中羟脯氨酸及氨基酸总量。结果 术后1、2周,食管组织炎性反应明显,局部有广泛肉芽组织形成及部分纤维化,某些部位组织开始向管腔内生长;组织中成纤维细胞处于旺盛的增殖及分泌状态,羟脯氨酸及氨基酸总量较正常明显升高,术后4、8周,管腔明显狭窄,局部出现大量的纤维结缔组织,炎性细胞显著减少,术后4周内组织中胶原纤维的染色强度呈上升趋势,4周后胶原含量则趋向于稳定,与再狭窄的病理过程基本一致,Ⅰ型胶原羧基端肽(PICP),Ⅲ型胶原氨基端肽(PⅢNP)的检测结果变化与胶原染色基本一致,术后4周组织的氨基酸含量较术后2周升高显著,术后8击与4周的氨基酸水平基本一致。结论 再狭窄主要表现为纤维化,术后4、8周随着炎性反应的减弱,纤维化过程渐趋稳定,组织中胶原纤维尤其是Ⅰ、Ⅲ型胶原的含量在支架术后4周内呈上升趋势,4周后逐渐稳定,与再狭窄的病理过程基本一致。 相似文献
8.
DNA甲基转移酶1和组蛋白脱乙酰基酶1在胰腺组织中的表达及其临床意义 总被引:1,自引:0,他引:1
背景:近年针对DNA甲基化和组蛋白乙酰化修饰的表观遗传学研究是探索胰腺癌发生机制的新热点。目的:研究DNA甲基转移酶1(DNMT1)和组蛋白脱乙酰基酶1(HDAC1)在胰腺上皮内瘤变(PanIN)和胰腺癌组织中的表达.探讨其可能的临床意义。方法:以免疫组化SP法检测DNMT1、HDAC1在10例正常胰腺组织、39例证实含有PanIN的胰腺癌旁组织和54例胰腺导管腺癌(PDAC)组织中的表达。结果:DNMT1和HDAC1在胰腺组织中的阳性表达率均随组织异型程度的增加而逐渐增高,即正常胰腺导管(0%)〈PanIN—IA(7.2%±1.2%,10.7%±5.0%)〈PanIN-1B(24.5%±9.6%,40.1%±8.0%)〈PanIN-2(30.0%±11.9%,51.2%±13.4%)〈PanIN-3(46.7%±11.2%,73.1%±11.3%)〈PDAC(56.7%±27.5%,82.5%±19.4%),差异均有统计学意义(P〈0.05)。结论:DNMT1和HDAC1表达增强是胰腺癌发生的早期事件.两者共同促进了胰腺癌的进展,可能成为胰腺癌早期诊疗的新靶点。 相似文献
9.
目的:研究内镜逆行胰胆管造影(ERCP)下胰管擦拭法细胞学检查(简称刷检)对胰腺肿瘤诊断的临床应用价值。方法:在ERCP检查的同时采用胰管细胞刷刷取细胞涂片并结合,ERCP对临床疑诊为胰腺肿瘤的27例患者进行研究。结果:细胞学检查阳性率为55.6%,且头、体部胰腺癌胰管刷检细胞学检查阳性率较高,分别为69.2%和60%,ERCP诊断正确率为77.8%,两者结合诊断正确率达100%,结论:该诊断方法快速,经济实用,安全和准确性高,可与ERCP结合进行,提高胰腺恶性肿瘤的检出率。 相似文献
10.
胰管刷检标本P53蛋白检测在胰腺癌诊断中的价值 总被引:5,自引:0,他引:5
目的:探讨胰管刷检标本p53蛋白检测在胰腺癌诊断中的价值。方法:应用免疫组化法检测26例胰腺及壶腹疾病患者胰管刷检标本p53蛋白的表达,并与常规细胞学检查作比较。结果:苏木精-伊红染色常规细胞学检查诊断胰腺癌的敏感性为53%,特异性为100%,准确性为70%。胰管刷检标本p53蛋白检测诊断胰腺癌的敏感性为59%,特异性为100%, 准确性为74%。二者联合诊断胰腺癌的敏感性为71%,特异性为100%,准确性为81%,与单项细胞学检查相比差异有非常显著性(P<0.01)。结论:胰管刷检标本细胞学检查的同时,进行p53检测可提高胰腺癌的诊断率,有助于胰腺良、恶性疾病的鉴别。 相似文献