转染CD40配体的卵巢癌细胞株OVHM抗卵巢癌肝转移机制的研究

Objective To examine the in vivo anti-metastatic effect of enhanced expression of CD40L cDNA in murinc ovarian cancer OVUM cells (CD4OL-OVHM) injected into the spleen on liver metastasis in mice. Methods OVUM cells were inoculated into the spleen of 6 ～ 8 week-old female B6C3F1 (C57BL/6N × C3H/He) mice. The established liver metastasis was identified by histopathology (HE staining). OVUM cells, DNA-pMKITneo-OVHM cells or CD40L-OVHM cells were inoculated into the spleen of female B6C3F1 mice and the expressions of CD11c in splenic cells were detected by flow cytometry. The specific cytotoxicity of splenic cells was detected by MTT assay, and the serum cytokines of IFN-γ, TNF-α, IL-12, IL4 and IL-10 of the mice were measured by enzyme linked immunoabsorbent assay. The liver metastases and the survival time of the mice were also recorded. Results The mouse models with liver metastasis by injecting tumor cells into the spleen of mice were established. The expression of CD11c and the specific killing rote in CD40L-OVHM cells group was significantly higher than that in the OVHM cells group and DNA-pMKITneo-OVHM cells group. The expressions of IFN-γ, TNF-α and IL-12 in the CD40L-OVHM cells group were much more increased than OVHM cells group and DNA-pMKITneo-OVHM cells group, but the expressions of IL-4 and IL-10 in the CD40L-OVHM cells group were decreased significantly (P < 0.05). The average weights of livers and spleens of mice in CD40L-OVHM cells group were significantly lower than those of DNA-pMKITneo-OVHM cells group and OVHM cells group. The survival time of mice in CD40L-OVHM cells group was also significantly longer than that in the OVHM cells group and DNA-pMKITneo-OVHM cells group (P < 0.05). Conclusion The data directly demonstrate that the expression of CD40L in ovarian cancer cells (CD40L-OVHM) can enhance the proliferation and differentiation of dendritic cells in the spleen and induce specific cytotoxic effect of T cells in the spleen, and may regulate the immune function of peripheral blood cells and the immune balance between Thl cells and Th2 cells, which maybe the possible mechanism induced by CD40L in mice inhibiting the development of liver metastasis.     

MAGE-A1 和MAGE-A3在脑胶质瘤组织中的表达及其临床意义

[摘要] 目的：探讨黑色素瘤抗原基因-A1（MAGE-A1）和MAGE-A3 在脑胶质瘤组织中的表达及其临床意义。方法：选取2006 年1 月至2010 年1 月河北医科大学第四医院神经外科手术切除的78 例脑胶质瘤组织标本和15 例车祸死亡捐献者的正常脑组织标本。用RT-PCR法检测胶质瘤组织中MAGE-A1 和MAGE-A3 的表达,分析其表达水平与患者预后的关系;用MSP-PCR术检测MAGE-A1 和MAGE-A3 基因启动子区的甲基化状态,分析两者表达与甲基化之间的关系;用RT-PCR法检测胶质瘤U251 和U87 细胞中MAGE-A1 和MAGE-A3 表达以及经DNA甲基转移酶抑制剂5-氮杂-2''-脱氧胞苷（5-Aza-CdR）和组蛋白去乙酰化酶抑制剂曲古抑菌素A（TSA）联合作用后两者的表达水平。结果：78 例胶质瘤组织中MAGE-A1 和MAGE-A3 mRNA阳性表达率分别为65.34%和38.46%,而在15 例正常脑组织中未发现2 种mRNA表达。MAGE-A1 阳性组患者5 年生存率较阴性组低（P<0.05）。MAGE-A1 和MAGE-A3 基因启动子区去甲基化水平与其在mRNA水平上的表达均有显著的相关性（均P<0.01）。未经5-Aza-CdR 和TSA处理的U87 细胞未见MAGE-A1 和MAGE-A3 mRNA的表达,U251 细胞则有少量表达。单独给予TSA不能引起MAGE-A1 和MAGE-A3 基因的表达激活,单独给予5-Aza-CdR 或与TSA合用可以引起该2 个基因的表达激活,且两者合用的作用优于单独给药。结论：脑胶质瘤组织中有不同程度的MAGE-A1 和MAGE-A3 基因表达,MAGE-A1 基因表达与患者的预后不良相关。DNA启动子区甲基化和组蛋白乙酰化是MAGE-A1和MAGE-A3基因表达激活的重要机制。     

恶性肿瘤患者术后随访

近年来,随着改革开放的深入,国民经济的发展和生活条件的改善,人们的住址迁移、人事变动等使医院的随访工作面临着前所未有的困难。然而,现代医学的飞速发展和高质量的医疗需要更加完善准确、详实丰富的信息资料。随访作为恶性肿瘤诊治的重要组成部分,目前已引起肿瘤界一线医师和病案人员的广泛关注。     

△Np73与人类肿瘤

△Np73是近年发现的p73基因（p53家族新成员）的一种亚型,由位于p73基因内含子3下游的P2启动子转录生成,含7种变异体（△Np73α、β、γ、δ、e、ξ、η）。因缺乏p73基因的氨基末端反式激活区域,其转录活化功能完全丧失。随着对肿瘤细胞凋亡研究的深入,△Np73在肿瘤发生发展机制中的角色显得扑朔迷离,它在肿瘤中的作用究竟是癌基因还是抑癌基因,     

白细胞介素-23的研究进展

白细胞介素-23(IL-23)是造血细胞因子家族成员,它是由p19和p40两个亚基组成的活性复合体,IL-23受体由IL-12β1和IL-23R构成,IL-23的信号途径与白细胞介素-12(IL-12)有相同的Jak-Stat信号分子,IL-23的功能与IL-12也存在许多相同之处,但也有其独特的功能。IL-23可作用于活化的T细胞、记忆性T细胞和树突状细胞,产生γ干扰素(IFN-γ)和IL-12等细胞因子,在炎症性疾病、自身免疫性疾病的发病以及抗肿瘤和抗感染等方面发挥重要作用,有望成为新的免疫治疗因子。     

含幽门螺杆菌特异性抗体牛奶清除幽门螺杆菌效果的临床随机试验

目的:比较观察抗幽门螺杆菌抗体牛奶根除幽门螺杆菌的效果。方法:用4 株幽门螺杆菌(1 株为标准菌株,3 株为本地流行菌株)免疫奶牛,制备出抗幽门螺杆菌抗体牛奶。本次试验共筛选148 例患者,C-14 呼气试验阳性的患者为72 例,最后符合入选标准的为39 例,将符合标准的患者随机分为试验组和对照组,分别为21 例和18 例,试验组饮用含特异性幽门螺杆菌抗体的牛奶,对照组饮用普通牛奶,连续饮用2 个月后,观察结果。结果:试验组的21 名对象中,9 人C-14 呼气试验转为阴性,10 人降低。有效清除率达42.86%,而对照组未有清除,两组清除率有统计学意义(P =0.005,P<0.05)。结论:抗幽门螺杆菌抗体牛奶具有多克隆性和很高的效价,能够有效清除胃内幽门螺杆菌。     

木鳖子对羟基桂皮醛对黑素瘤B16细胞分化的影响及其机制

目的 探讨木鳖子Momrodica cochinchinensis中单体化合物,尤其是对羟基桂皮醛诱导黑素瘤B16细胞分化的作用.方法 以对羟基桂皮醛、松柏醛、对羟基苯甲醛、3-甲氧基对羟基苯甲醛和ligballinol处理B16细胞48 h后,磺酰罗丹明B(SRB)法检测细胞生长抑制率.以对羟基桂皮醛处理B16细胞24、48、72 h后,倒置相差显微镜和经瑞氏-吉姆萨染色法观察细胞形态;比色法检测给药后48 h B16细胞中黑色素量和酪氨酸酶活性;RT-PCR法检测酪氨酸酶基因表达.结果 5个单体化合物对B16细胞生长均具有抑制作用,其中对羟基桂皮醛对细胞生长的抑制作用最为明显,且具有浓度和时间相关性.对羟基桂皮醛处理B16细胞48 h后,经染色观察到细胞呈树突样生长,表现为典型的细胞分化形态特征,黑色素的量显著增加,酪氨酸酶活性显著增强,上述作用与对照组相比差异显著(P＜0.05).以对羟基桂皮醛处理B16细胞6、12、24h后,酪氨酸酶、酪氨酸相关蛋白-1和酪氨酸相关蛋白-2的基因表达明显上调(P＜0.01),且呈时间相关性.结论 对羟基桂皮醛能够抑制黑素瘤B16细胞增殖,其机制与诱导B16细胞分化相关.     

乳腺癌肿瘤研究中的热点分子STAT5

信号传导和转录激活因子5(STAT5)是一类能与磷酸化的酪氨酸结合的Src同源区2(SH2)的蛋白质分子,广泛参与细胞增殖和分化,调节细胞的凋亡,并与白血病、自身免疫性疾病、乳腺癌等多种疾病的发生、发展和预后密切相关.因此,STAT5异常活化与疾病的关系已成为目前研究的热点.     

CIK细胞的生物学特性及荷瘤鼠体内分布特点研究

目的:探讨细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK细胞)在荷瘤鼠体内的分布规律。方法:用MTT比色法测定CIK细胞对Hela-luc细胞的杀伤作用。以人宫颈癌细胞Hela-luc接种BALB/c裸鼠建立动物模型。体外培养CIK细胞后以荧光染料CFSE标记,经不同途径注射入荷瘤鼠体内。用激光共聚焦显微镜和流式细胞技术检测方法分析CIK细胞在各器官的分布情况。结果:CIK细胞在体外培养14～18天时,细胞数量生长达高峰,此时CD3+CD56+T细胞的数量也达最高值。以10∶1、20∶1、40∶1的比例将效、靶细胞作用48小时后,CIK细胞对Hela-luc细胞的杀伤率分别为(24.08±3.18)%、(51.16±2.64)%、(72.14±4.21)%。CIK细胞经腹腔注射,肿瘤组织24小时达到最高(20.56%),瘤旁注射,肿瘤组织3小时达到最高(25.75%)。结论:CIK细胞在体外对宫颈癌Hela-luc细胞有较强的杀伤作用。CIK细胞在体内分布于肺、肝、肿瘤部位,其分布在各脏器中浓度规律与不同的输注途径有一定关系。针对不同解剖部位的肿瘤可以选择不同的CIK细胞输注途径以最大限度地提高疗效。     

运用MALDI-TOF MS方法建立食管癌患者血清蛋白指纹图谱诊断模型

 目的 本研究利用基质辅助激光解析离子化飞行时间质谱（matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry,MALDI-TOF MS）技术检测食管癌患者血清蛋白指纹图谱,建立食管癌诊断模型,探讨其临床应用价值。方法采用弱阳离子蛋白芯片（WCX磁珠）对血清进行分析前处理,运用MALDI-TOF MS技术检测119例标本（75例食管癌和44例健康对照）血清蛋白质谱图,通过蛋白芯片数据分析系统进行数据处理,以遗传算法结合支持向量机运算建立食管癌与健康对照组、早期食管癌与中晚期食管癌组诊断模型,随机抽取79例建模标本（50例食管癌和29例健康对照）进行训练与交叉验证,并选择新病例（30例食管癌和23例健康对照）血清标本进行测试。结果采集食管癌患者和健康对照者的血清蛋白质纹图谱,经数据分析找到75个有显著性差异的质荷比峰（P<0.05）和71个有非常显著性差异的质荷比峰（P<0.01）;软件包运算后,建立两个诊断模型：模型1：区分食管癌与健康对照组,由11个蛋白质峰（2 087,2 210,3 258,3 973,4 283,4 645,4 092,4 210,1 985,2 818和2 046 Da）组成,该诊断模型检测食管癌的敏感度为92.4%,特异性为87.4%;模型2：区分早期食管癌与中晚期食管癌组,由8个蛋白质峰（4 195,4 074,4 268,2 106,4 905,5 965,2 863 和 3 953 Da）组成,该诊断模型检测食管癌的敏感度为87.5%,特异性为89.7%。结论运用MALDI-TOF MS技术结合磁珠分选的方法可检测食管癌血清质谱图,建立具有较高的敏感度和特异性食管癌诊断模型。