宝藿苷对人食管癌细胞增殖及细胞周期的影响

目的 研究香加皮中宝藿苷-Ⅰ对人食管癌细胞Eca-109细胞周期的影响及其作用机制.方法 采用MTT法分析不同质量浓度宝藿苷-Ⅰ(12.5、25、50 μg/mL)分别作用24、48、72 h后,对Eca-109细胞增殖的影响;流式细胞术分析宝藿苷-Ⅰ对Eca-109细胞周期的影响;RT-PCR技术检测宝藿苷-Ⅰ对Eca-109细胞Cyclin B1mRNA表达的影响;Western blotting方法检测宝藿苷-Ⅰ对Eca-109细胞Cyclin B1蛋白表达的影响.结果 25、50μg/mL宝藿苷-Ⅰ均可明显抑制Eca-109细胞的增殖(P<0.05),作用48 h的IC50为24.8μg/mL.25、50μg/mL宝藿苷-Ⅰ作用48 h后,随宝藿苷-Ⅰ质量浓度的增加,Eca-109细胞的G0/G1期细胞比例明显下降,G2/M期细胞比例明显提高,细胞的Cyclin B1蛋白及mRNA表达水平降低,与对照组相比均有显著性差异(P<0.01).结论 香加皮宝藿苷-Ⅰ可抑制Eca-109细胞增殖,使细胞周期阻滞,该作用町能与下调细胞Cyclin B1表达有关.     

六种中草药抗突变及抗肿瘤活性的试验报告

目的：探讨山楂、香菇、杏仁、大枣、板蓝根、仙鹤草等6种中草药的抗突变肿瘤作用及机制，以期进一步进行用于人群的应用研究，为肿瘤的预防提供科学依据。方法：采用抗突变和致突变同步快速试验研究了6种中草药的抗突变和致突变性，以维生素C（VitC)做抗突变阳性对照剂，丝裂霉素阴性对照剂，并做加大鼠肝脏微粒体酶（S9）和不加S9的两种试验。采用体外抑瘤试验研究了6种中草药的4个浓度组对4种肿瘤细胞（人T细胞白血病细胞株MT－Ⅱ、小鼠纤维母细胞株L929、人卵巢癌细胞株SK、人巨噬细胞白血病细胞株K562）的抑制作用，以磷酸盐缓冲液做阴性对照，顺铂做阳性对照，培养细胞加受试物37℃，培养48h后，加氚－脱氧胸腺嘧啶核苷（^3H-TdR)，再继续培养24h后，收集细胞，测^3H-TdR掺入的放射性强度。结果：经加和不加S9两种试验，6种中草药均未显示有致突变毒性，山楂、杏仁、大枣和香菇显示对MMC引起的致突变作用有拮抗效应。山楂、香菇和仙鹤草水溶性提取液的各剂量组对4种肿瘤细胞的^3H-TdR掺入的作用（P＜0．01），板蓝根水溶性提取液仅高浓度组（4mg/ml)对L929、SK细胞有抑制^3H-TdR掺入的作用（P＜0．05），大枣水溶性提取液的各浓度组对4种细胞均未显示明显的抑制^3H-TdR掺入的作用（P＞0．05）。结论：山楂、香菇、杏仁和大枣具有抗突变活性、山楂、香菇、仙鹤草对MT－Ⅱ、929、SK、K5624种细胞的DNA合成有明显的抑制作用。     

三十七年帮扶成就肿瘤防治现场

从1973年开始,河北医科大学第四医院就在磁县建立了食管癌防治现场,至今已有37年。多年来真帮实扶,把大医院的"根"扎到现场,开展了大量的防治研究工作,经过几代人的不懈努力,取得了较好的防治效果。     

塞来昔布抑制人类三阴性乳腺癌裸鼠移植瘤生长的实验研究

 【摘要】　目的　探讨塞来昔布（celecoxib）对人类三阴性乳腺癌（TNBC）肿瘤生长及细胞凋亡的影响。方法　32只裸鼠于背部皮下接种人类TNBC细胞株MDA-MB-231,随机分为空白对照组及低、中、高剂量塞来昔布组（25、50、100 mg?kg-1?d-1）。实验结束后,留取移植瘤标本,观察用药前后裸鼠肿瘤体积的变化;流式细胞术（FCM）检测肿瘤细胞凋亡率;免疫组织化学法检测NF-κB p65和p50分子的表达;Western blot法检测凋亡相关分子Caspase-3、Survivin蛋白的表达。结果　塞来昔布治疗组肿瘤体积较对照组均明显减小。中、高剂量塞来昔布治疗组凋亡率分别为（13.58±3.16）％、（21.91±4.75）％,与对照组的（3.15±1.73）％相比差异有统计学意义（t＝6.736,12.151,均P＜0.05）,塞来昔布低、中、高剂量组p65表达阳性率分别为79.3 %、46.7 %、23.9 %,与对照组（89.7 %）相比差异有统计学意义（χ2＝3.312,10.785,15.900,均P＜0.05）。Western blot结果显示,塞来昔布治疗后肿瘤组织中Caspase-3蛋白出现了裂解片段,并且随药物浓度增加,裂解片段表达量逐渐增加。Survivin蛋白随药物浓度增加表达逐渐下调。结论　塞来昔布可以诱导TNBC裸鼠移植瘤细胞凋亡,抑制肿瘤生长,其抗肿瘤作用机制可能部分与抑制p65分子以及下调Survivin蛋白表达有关。     

塞来昔布对人三阴性乳腺癌细胞MDA-MB-231迁移、侵袭及黏附性的影响

背景与目的:三阴性乳腺癌(triple-negative breast cancer,TNBC)由于其高侵袭和高转移特性,是目前乳腺癌中预后最差的一种亚型.大量研究表明塞来昔布(celecoxib)具有很好的抗肿瘤活性,可以抑制肿瘤生长、减少肿瘤血管发生,防止肿瘤的早期转移.为了进一步明确塞来昔布与TNBC细胞侵袭活性之间的关系,本实验研究塞来昔布作用下人TNBC细胞MDA-MB-231黏附、迁移及体外侵袭能力的变化,并初步探讨其可能的机制.方法:以不同浓度的塞来昔布(0、40、80、120 μmol/L)作用MDA-MB-231细胞24 h后,采用细胞基质黏附实验检测塞来昔布对MDA-MB-231细胞黏附能力的影响;采用细胞划痕实验检测塞来昔布对MDA-MB-231细胞平面迁移能力的影响;采用Transwell侵袭小室实验检测塞来昔布对MDA-MB-231细胞体外侵袭能力的影响;RT-PCR检测塞来昔布作用前后基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMPs)MMP-2和MMP-9 mRNA的表达情况.结果:经80、120 μmol/L塞来昔布作用24 h后,MDA-MB-231细胞与基质的黏附能力分别为(50.2±7.3)%和(31.5±2.2)%,与对照组(96.8±10.9)%相比显著下降,差异具有统计学意义(P<0.05).Transwell侵袭小室实验结果显示,经80、120 μmol/L塞来昔布作用后MDA-MB-231细胞趋化运动明显减少,穿过人工基底膜的细胞较对照组显著降低(P<0.05).划痕实验结果显示,经塞来昔布作用后MDA-MB-231细胞平面迁移到损伤区的细胞数明显减少(P<0.05).RT-PCR结果显示,经塞来昔布作用MDA-MB-231细胞后,MMP-2和MMP-9 mRNA的表达水平显著降低(P<0.05).结论:塞来昔布能显著地抑制MDA-MB-231细胞黏附、细胞体外的迁移和侵袭能力,该作用可能与抑制MMP-2和MMP-9 mRNA的表达有关.     

间充质干细胞对移植物抗宿主病的免疫调节作用

间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)是骨髓中具有自我更新和多向分化潜能的一种非造血干细胞,其免疫原性很低,在体外能抑制丝裂原或同种异基因抗原刺激的T细胞增殖。移植物抗宿主病(graft versus host disease,GVHD)是异基因造血干细胞移植(allogeneic hematopoietic stem cell transplantation,alloHSCT)后最主要的并发症,主要由供者T细胞所介导,是多种机制共同参与的复杂过程。在动物实验和临床试验中,MSCs具有较强的免疫调节作用,能显著抑制GVHD的发生,缓解其症状,提高受者的存活率;其机制为MSCs通过抑制T细胞的增殖,阻断DCs的分化和成熟,并通过增加CD4+CD25+调节性T细胞的比例来提高干细胞移植的成功率,使GVHD造成的病理损伤明显减轻,从而达到预防和治疗GVHD的目的。相关研究为MSCs有效应用于GVHD等临床免疫性疾病治疗提供了理论指导,并展现出极大的应用前景。     

促红细胞生成素对荷瘤小鼠免疫功能的影响

目的:检测促红细胞生成素(Erythropoietin,EPO)对荷黑色素瘤小鼠免疫功能的影响.方法:将C57BL/6小鼠随机分为3组:正常对照组、盐水处理组和EPO处理组,盐水处理组和EPO处理组小鼠皮下接种黑色素瘤细胞B16.17天后,检测各组小鼠外周血中红细胞(RBC)、血红蛋白(Hb)、红细胞压积(Hct)和白细胞(WBC)数量及脾脏脏器指数;应用流式细胞术检测脾细胞CD4+、CD8+T细胞亚群的分布;ELISA检测血清中IL-2和TNF-α细胞因子的水平.结果:盐水处理组荷瘤小鼠外周血中RBC、Hb和Hct含量明显低于正常对照组小鼠(P＜0.05),应用EPO可明显提高荷瘤小鼠外周血中RBC、Hb和Hct含量及脾脏脏器指数(P＜0.05),三组小鼠外周血中WBC数量无明显差别(P＞0.05);盐水处理组及EPO处理组荷瘤小鼠脾脏CD4+T细胞百分率及CD4+/CD8+T细胞比值明显低于正常小鼠(P＜0.05).EPO处理组与盐水处理组相比,CD4+T细胞百分率无差别(P＞0.05),而CD8+T细胞百分率下降(P＜0.05),致使EPO处理组小鼠CD4 +/CD8+T细胞比值升高(P＜0.05);盐水处理组及EPO处理组荷瘤小鼠血清中TNF-α、IL-2含量明显低于正常小鼠(P＜0.05),EPO处理组小鼠血清中IL-2水平与盐水处理组相比增高(P＜0.05),但该两组小鼠血清中TNF-α含量无明显差别(P＞0.05).结论:EPO在改善荷瘤小鼠贫血状态的同时,还可通过提高外周血CD4 +/CD8+T细胞比值和IL-2含量而增强小鼠的免疫功能.     

四种蛛毒抑制人肝癌BEL-7402细胞增殖作用的实验研究

近年来，在动物毒素的抗肿瘤作用研究中，以蛇毒、蜂毒居多，未见蜘蛛蛛毒对肿瘤细胞作用的报道。本研究目的是从海南捕鸟蛛、虎纹捕鸟蛛、敬钊缨毛蛛、雷氏大疣蛛四种蜘蛛毒素中筛选出抗人肝癌细胞株BEL-7402作用强的一种，并探讨其量效及时效关系，以便进行更深入的研究。     

卡介苗提取物体外诱导小鼠脾淋巴细胞对人膀胱癌细胞的杀伤作用

目的 分离活卡介苗(Bacille Calmette-Guérin,BCG)的有效组分,分析其有效组分诱导的小鼠脾淋巴细胞体外对人膀胱癌细胞株T24细胞的杀伤作用.方法 采用酶裂解法和超声波破碎法对活BCG进行裂解,通过Sephadex G100凝胶层析对其有效组分进行分离及分子量的测定,用SDS-PAGE凝胶电泳进行纯度鉴定;采用四氮唑盐(MTT)法测定BCG有效组分BCGE2诱导的小鼠脾淋巴细胞对人膀胱癌细胞株T24细胞的杀伤活性.结果 BCGE2可体外诱导小鼠脾淋巴细胞对膀胱癌细胞株T24细胞的杀伤作用,在效靶比为20:1时对T24细胞的抑制率为42.31％,而对照组仅为13.32％,两者比较差异有统计学意义(P＜0.01).结论 BCGE2诱导的小鼠脾淋巴细胞对人膀胱癌细胞株T24的杀伤作用很显著,且随着效靶比的增加而增强.     

拓扑替康对视网膜母细胞瘤细胞凋亡的影响

Objective: Livin and phosphatase and tensin homolog (PTEN) expressions in the retinocytoma (RB) were explored, along with their relationship with RB clinicopathologic features. The effects of Topotecan (TPT) were also studied on human RB cell strain HXO-Rb44 cell apoptosis and on Livin and PTEN expressions. Method: Max-VisionTM rapid immunohistochemistry was adopted to detect Livin and PTEN expressions in the normal retina and in RB, and their relationship with RB clinicopathologic features was analyzed. Human RB cell strain HXO-Rb44 was cultivated and passaged. MTT method was used to measure the survival rates of HXO-Rb44 cell strains under various TPT concentrations. IC50 values were calculated. Flow cytometry was used to detect the effects of various TPT concentrations on HXO-Rb44 cell apoptosis. Western blot was used to detect the differences of Livin and PTEN protein expressions during cell apoptosis. Result: The positive expressions of Livin and PTEN in the RB group were obviously different from those in the normal control group. In RB tissue, Livin expression was relevant to PTEN expression. TPT could significantly induce the occurrence of cell apoptosis and had a dependent relationship with drug concentration. Livin and PTEN expression levels varied with the extension of the effect time of TPT based on Western blot analysis. Conclusion: Livin and PTEN have high and low expression levels in the RB tissue, respectively. Both have a key role in RB occurrence and development. TPT could induce human RB cell strain HXO-Rb44 cell apoptosis, and its mechanism is associated with the inhibition of Livin and PTEN expressions.