香加皮乙酸乙酯提取物诱导人乳腺癌MCF-7细胞凋亡的研究

目的:研究香加皮乙酸乙酯提取物(ethyl acetate extract from Cortex Periplocae,CPEAE)诱导人乳腺癌细胞系MCF-7凋亡作用及其作用机制。方法:采用MTT法观察不同浓度CPEAE对乳腺癌细胞株MCF-7增殖的抑制作用;应用吖啶橙/溴化乙锭(AO/EB)荧光染色法和透射电镜观察凋亡细胞形态;应用流式细胞术分析CPEAE对细胞凋亡率的影响;RT-PCR法检测用药前后细胞凋亡相关基因survivin和bax的mRNA表达情况。结果:CPEAE呈浓度及时间依赖性抑制MCF-7细胞的增殖(P<0.05),作用48 h的IC50为(0.943±0.005)μg/mL。CPEAE作用48 h后MCF-7细胞发生了特征性的凋亡形态学改变,流式细胞仪检测可见典型的凋亡峰,2.0μg/mL CPEAE作用72 h时细胞的凋亡率达(30.24±1.26)%。CPEAE作用后MCF-7细胞的survivin mRNA表达降低,而bax mRNA表达增加。结论:香加皮乙酸乙酯提取物(CPEAE)可诱导乳腺癌细胞系MCF-7发生凋亡,可能通过下调survivin基因、上调bax基因的mRNA水平而发挥诱导细胞凋亡作用。     

雷氏大疣蛛毒素对人肝癌细胞SMMC-7721细胞增殖及细胞周期的影响

目的 探讨雷氏大疣蛛Macrothele raveni毒素对人肝癌细胞SMMC-7721增殖及细胞周期的抑制作用，进一步探讨其作用的分子机制。方法 采用MTT法测定雷氏大疣蛛毒素对SMMC一7721细胞增殖作用的影响；采用[^3H]TdR掺入法检测雷氏大疣蛛毒素作用前后SMMC7721细胞DNA合成的变化；采用流式细胞术（FCM）探讨雷氏大疣蛛毒素对SMMC-7721细胞凋亡率和细胞周期的影响；采用Western Blot方法研究雷氏大疣蛛毒素对细胞周期相关c-myc蛋白表达的影响。结果 MTT方法表明雷氏大疣蛛毒素对SMMC-7721细胞增殖有较强的抑制作用（P〈0．05），时效和量效关系良好。雷氏大疣蛛毒素可以抑制SMMC-7721细胞DNA的合成。流式细胞仪检测结果发现雷氏大疣蛛毒素作用后SMMC-7721细胞凋亡率增加，细胞周期阻滞在G2／M期。Western Blot方法进一步检测到雷氏大疣蛛毒素作用SMMC7721细胞72h后，c-myc蛋白表达减弱。结论 雷氏大疣蛛毒素可以抑制人肝癌细胞SMMC-7721的增殖和DNA的合成，其机制可能是诱导细胞凋亡，使细胞周期相关c-myc蛋白表达减弱，导致细胞周期的变化。     

hMAM检测乳腺癌骨髓微转移及其意义

目的：检测乳腺癌骨髓中hMAM mRNA表达，判断骨髓微转移状况，探讨其与生物学因子及预后的关系。方法：采用RT—PCR法检测骨髓组织中hMAM mRNA表达；免疫组化SP法检测乳腺癌组织中ER、PR、Cath—D及VEGF的表达。结果：102例Ⅰ～Ⅲ期乳腺癌患者骨髓组织hMAM mRNA表达阳性率37．3％。ER、PR阴性及弱阳性的患者骨髓hMAM mRNA表达率高（P〈0．001，P〈0．05）；骨髓hMAM mRNA表达随Cath—D、VEGF蛋白表达增强而呈增高趋势（P〈0．05，P〈0．05）。，乳腺癌患者骨髓hMAM阳性者易发生远处转移（P〈0．05）。结论：乳腺癌骨髓微转移与癌组织中某些生物学因子有一定相关性；骨髓hMAM阳性患者发生远处转移机会高，微转移检测可以作为判断乳腺癌预后的指标之一。     

应用氟尿嘧啶治疗胃癌患者预后与其癌组织中尿嘧啶核苷磷酸化酶基因的高表达相关性研究

目的:分析尿嘧啶核苷磷酸化酶基因表达水平与胃癌、肺癌和结肠癌的预后相关性。方法:采用RT-PCR法检测了28例胃癌、14例肺癌和22例结肠癌组织及其远癌正常组织中尿嘧啶核苷磷酸化酶(UP)基因的表达。结果:对28例胃癌组织及其远癌正常组织检测发现,有20例UP基因的表达比正常组织增高,另8例UP基因的表达比正常组织低或二者相等。所有这些胃癌患者均在手术前、后接受了氟尿嘧啶的治疗。胃癌组织中UP基因表达增高的患者比UP基因表达正常或降低的患者有较好的生存率;相反,大多数的结肠癌(16例)和所有的肺癌患者未接受氟尿嘧啶的治疗,且大部分的结肠癌(12例)和肺癌(10例)样本显示癌组织中UP基因呈低表达。肺癌和结肠癌组织相对于其远癌正常组织中UP基因的不同表达与患者的生存率不相关。结论:胃癌组织相对于其远癌正常组织的UP基因的表达水平可作为判断接受氟尿嘧啶的治疗的胃癌患者预后的一个指标。     

卡介苗治疗膀胱癌的免疫机制与研究进展

卡介苗(BCG)是最早用于肿瘤治疗的生物制剂，尤其在浅表性膀胱癌的治疗与防止膀胱癌术后复发有显疗效。但由于其副作用，使得人们不断地探索其治疗膀胱癌的免疫机制；以及从BCG里提取有效成分并利用重组BCG等方法来提高BCG在膀胱癌的治疗效果并降低其副作用。本对有关献进行综述。     

五加皮Age蛋白在正常小鼠与荷瘤小鼠体内的组织分布

目的探讨五加皮抗肿瘤成分A ge蛋白在正常小鼠与荷瘤小鼠体内的组织分布。方法用氯胺T法对A ge蛋白进行125I标记(形成125I-A ge),由尾iv小鼠后,于不同时间取组织和血液标本,测定放射cpm比值。以放射参与量(即脏器与血液中cpm比值)作为125I-A ge在组织中分布的依据。结果在一次性快速iv125I-A ge 2 h后,正常小鼠和荷瘤小鼠体内均以肾脏中125I-A ge的分布量最高,肝脏和肺部放射参与量也较高,与心脏、脾脏等其他脏器相比差异有显著性(P<0.01);尿中125I-A ge的量很高。iv同等剂量125I-A ge后,荷瘤小鼠的肾脏、肝脏和肺部组织的放射参与量比正常小鼠偏高(P<0.05)。结论五加皮A ge蛋白在小鼠体内主要分布于血流丰富的组织,主要通过泌尿系统排泄,不易透过血脑屏障。     

中药北豆根抗肿瘤活性的体外实验

背景与目的 :探讨中药北豆根(Rhizomamenispermi)提取物的抗肿瘤作用并分离其活性物质。材料与方法 :采用MTT法测定了北豆根提取物对肿瘤细胞增殖反应的影响 ;用三步法初步分离、纯化了北豆根提取物的抗肿瘤有效部位。结果 :北豆根提取物对多种组织来源的肿瘤细胞增殖有较强的抑制作用 ,量效关系良好 ,并且对原代培养肿瘤组织细胞增殖反应有抑制作用,IC50 多在9μg/ml以下 ,最低可达0.7μg/ml。并找到了其有效部位。结论 :北豆根水提物和北豆根醇提物体外均有很强的抗肿瘤作用 ;醇提物的作用高于水提物 ;PE2是北豆根醇提物抗肿瘤的有效部位 ;PE2不仅对各肿瘤细胞株有广泛的杀伤作用 ,而且对原代培养肿瘤细胞也有杀伤作用 ;北豆根作为抗肿瘤药物有待进一步开发     

香加皮水提取物诱导人胃癌细胞BGC-823凋亡及其作用机制

目的研究香加皮水提取物(CPE)诱导人胃癌细胞BGC-823凋亡及其作用机制。方法采用G iem sa染色观察细胞凋亡形态学变化;电子显微镜观察凋亡细胞的超微结构变化;流式细胞术和琼脂糖凝胶电泳方法检测BGC-823细胞凋亡率、细胞周期和细胞凋亡的DNA水平变化;RT-PCR方法检测细胞凋亡相关基因bcl-2、bax和surv iv in mRNA表达水平变化;免疫细胞化学方法检测bcl-2、bax和surv iv in蛋白表达的变化。结果经CPE作用后,人胃癌细胞BGC-823出现明显的细胞凋亡形态学变化及超微结构改变,细胞DNA琼脂糖凝胶电泳呈现梯形图。经250μg/mL CPE处理48 h后,多数BGC-823细胞被阻滞在G2/M期,而且细胞发生明显的凋亡变化,BGC-823细胞凋亡率可达18.9%。CPE可抑制BGC-823细胞bcl和surv iv in mRNA及蛋白的表达,促进baxmRNA及蛋白的表达。CPE可明显延长S180荷瘤小鼠生存期,且具有剂量依赖性。结论CPE通过阻滞BGC-823细胞于G2/M期及诱导BGC-823细胞凋亡发挥抗肿瘤作用,其作用机制与抑制细胞的bcl-2和surv iv in基因mRNA及蛋白表达、促进bax基因和蛋白的表达有关。     

△Np73与人类肿瘤

△Np73是近年发现的p73基因（p53家族新成员）的一种亚型,由位于p73基因内含子3下游的P2启动子转录生成,含7种变异体（△Np73α、β、γ、δ、e、ξ、η）。因缺乏p73基因的氨基末端反式激活区域,其转录活化功能完全丧失。随着对肿瘤细胞凋亡研究的深入,△Np73在肿瘤发生发展机制中的角色显得扑朔迷离,它在肿瘤中的作用究竟是癌基因还是抑癌基因,