含胞嘧啶脱氨酶基因的靶向腺病毒载体的构建及应用

目的　建立癌胚抗原 (CEA )启动子驱动的含胞嘧啶脱氨酶基因 (CD )自杀基因的腺病毒载体AdCEACD ,使CD基因只能在CEA阳性的细胞中表达。方法　采用同源重组法在人胚肾细胞株 2 93细胞中重组腺病毒 ,用点杂交、PCR法进行鉴定 ,并进行纯化和滴度测定 ,分别感染CEA阳性和CEA阴性的细胞 ,采用MTT法检测感染细胞对 5 Fc的敏感性。结果　重组腺病毒中含有CEA基因及CD基因 ,纯化后滴度可以达到 5 .0× 10 11pfu/ml ,CEA阴性的Hela细胞感染AdCMVCD后对 5 Fc很敏感 ,而感染AdCEACD后不能被 5 Fc杀伤 ,与之相反 ,CEA阳性的Lovo细胞感染AdCMVCD和AdCEACD后有相似的表达活性 ,均对5 Fc敏感。AdCEACD/ 5 Fc系统有明显的“旁观者”效应。结论　本实验建立的CEA启动子驱动的含CD自杀基因的腺病毒载体AdCEACD ,能使CD基因专一性地在CEA阳性细胞中表达 ,有助于对CEA阳性的肿瘤细胞靶向性自杀基因治疗。     

清肺口服液治疗小儿病毒性肺炎药效学实验研究

目的 :研究清肺口服液的主要药理作用 ,探讨其治疗病毒性肺炎的作用机制 ,为其临床疗效提供依据。方法 :用常规方法观察该药的体外抗病毒、抑菌、免疫调节、诱生干扰素等作用。结果 :该药对 3种常见呼吸道病毒、5种细菌有抑制作用 ,可提高小鼠单核巨噬细胞的吞噬指数 ,在小鼠体内有诱生γ 干扰素 (INF γ)的作用。结论 :清肺口服液有抗病毒、抑菌、免疫调节、诱生干扰素等作用 ,表明其为治疗小儿病毒性肺炎的有效药物。     

乳腺癌的生物治疗

手术切除、辅助化疗和放疗被认为是目前乳腺癌的主要治疗方法.随着现代生物工程技术的发展,以分子靶向治疗、基因治疗、免疫治疗等为主要代表的先进生物治疗技术已部分进入乳腺癌的临床研究阶段,显示出较好的耐受性和良好疗效.     

热毒宁注射液对腺病毒-3的体外抑制作用

目的:研究中草药热毒宁注射液对腺病毒-3(ADV_3)的抑制作用。方法:以阿昔洛韦为阳性对照药,采用细胞培养技术及MTT比色法,观察在热毒宁干预下,转染腺病毒E1A基因人胚肾上皮细胞(293细胞)的细胞病变效应(CPE)及光密度值(D),计算各组细胞的病毒抑制率。比较不同药物剂量及不同给药方式下热毒宁对ADV_3的抑制作用效果。结果:热毒宁注射液半数中毒浓度TC_(50)为15.58 g·L~(-1)。预防、直接灭活及治疗给药方式下,CPE法测定的半数有效浓度EC_(50)分别为1.452、1.321、1.193 g·L~(-1),治疗指数TI分别为10.73、11.79、13.06;MTT法测定的EC_(50)分别为2.356、1.494、1.144g·L~(-1),TI分别为6.61、10.43和13.62。结论:热毒宁对ADV_3有直接灭活及抑制增殖作用,对其感染靶细胞有阻断作用,且呈明显量效关系。热毒宁对ADV_3的抑制作用,以预防给药更明显。     

人疱疹病毒6型与白血病关系的初探

目的　研究人疱疹病毒6型(HHV -6)感染与白血病的关系。　方法　用间接免疫荧光试验及聚合酶链反应,分别检测白血病22例和对照组15例血清中抗HHV- 6 IgG及外周血单个核细胞中HHV 6 DNA序列。　结果　白血病患者血清抗HHV -6 IgG的阳性率和滴度与对照组之间均无显著差异(P>0 .05);其HHV -6 DNA的检出率与对照组也无显著差异(P>0. 05)。　结论　HHV 6感染可能与白血病的发病无关。     

肝癌生物治疗研究新进展

生物治疗作为肿瘤治疗的新概念正倍受关注,靶向治疗、基因治疗、免疫治疗均属生物治疗中较活跃的研究领域。现综述生物治疗在肝癌治疗中最新研究与应用进展。     

雷公藤多甙和白细胞介素-1 0对人树突状细胞表面人类白细胞抗原-DR和CD80表达及白细胞介素-12 p40转录和分泌的影响

目的：研究雷公藤多甙和IL－10对人树突状细胞（DC）表面人类白细胞抗原－DR（HLA－DR）和CD80表达及IL－12p40转发洋和分泌的影响。方法：通过粒细胞－巨噬细胞型集落刺激因子（GM－CSF）、IL－4和肿瘤坏死因子α（TNF-α）体外培养体系,从人外周血单个核细胞中获得DC,细胞表面HLA－DR和CD80表达采用流式细胞仪分析,IL－12p40转录和分泌分别采用逆转录多聚酶链反应（RT－PCR）技术和ELISA法。结果：雷公藤多甙（5－20ug/ml）、IL－10（50－200ng/ml）能下调DC表面HLA－DR和CD80的表达,同时雷公藤多甙、IL－10能抑制DC内IL－2p40mRNA的转录和分泌。结论：雷公藤多甙、IL－10能通过抑制表面分子的表达和细胞因子的合成而干扰DC的成熟和功能。     

癌胚抗原启动子驱动的含大肠杆菌嘧啶脱氨酶自杀基因腺病毒载体的构建及初步鉴定

自杀基因治疗是一种富有希望的肿瘤治疗新方法。自杀基因导入细胞后可通过直接杀伤作用及“旁观者效应”(ｂｙｓｔａｎｄｅｒｅｆｆｅｃｔ)发挥作用。大肠杆菌嘧啶脱氨酶 (ＣＤ) / 5 ＦＣ自杀基因系统是继ＨＳＶ ＴＫ/ＧＶＣ系统后得到广泛关注的新的基因治疗系统 ,导入ＣＤ基因的细胞可将无毒的前药氟胞嘧啶 (5 ＦＣ)代谢成细胞毒性产物——— 5氟脲嘧啶 (5 ＦＵ)从而杀死细胞。控制自杀基因的靶向性保护正常细胞组织不受伤害是自杀基因临床应用的重要前提。癌胚抗原(ＣＥＡ)是胃肠道肿瘤特异性标志物 ,在结肠癌合并肝转移或复发时 ,常…     

人疱疹病毒6型感染与神经胶质瘤关系的初步研究

目的:研究人疱疹病毒6型(human herpesvirus-6,HHV-6)感染与神经胶质瘤的关系?方法:巢式PCR法检测40例神经胶质瘤样本和13例正常脑组织样本中HHV-6?人巨细胞病毒(human cytomegalovirus,HCMV)?HHV-7 DNA序列?免疫组化染色法检测神经胶质瘤样本和正常脑组织样本中HHV-6?HCMV?HHV-7抗原的表达?结果:巢式PCR法检测结果显示,神经胶质瘤组织HHV-6 DNA阳性率为42.5%,正常脑组织HHV-6 DNA阳性率为7.7%(P = 0.020),神经胶质瘤组织HCMV?HHV-7 DNA阳性率分别为20.0%和5.0%,正常脑组织未检测到HCMV和HHV-7 DNA(P值分别为0.087和0.566)?进一步用免疫组化染色法检测HHV-6早期抗原p41的表达,神经胶质瘤组织阳性率为27.5%,正常脑组织未见阳性表达(P = 0.030)?同时检测HHV-6晚期抗原gp116/64/54的表达,神经胶质瘤组织阳性率为32.5%,正常脑组织未见阳性表达(P = 0.014)?用HCMV pp65抗体进行免疫组化染色后发现其在神经胶质瘤中阳性率为12.5%,正常脑组织未见阳性表达(P = 0.229)?HHV-7 pp85抗原在神经胶质瘤样本和正常脑组织样本中均未检出阳性表达?结论:根据PCR和免疫组化的检测结果,HHV-6感染在神经胶质瘤和正常脑组织中具有显著性差异,HHV-6感染在神经胶质瘤的病因和发展过程中起了一定作用?     

人疱疹病毒6型感染与口腔鳞癌相关性的研究

目的 :研究人疱疹病毒 6型 (HHV 6)感染与口腔鳞癌的关系。方法 :用间接免疫荧光试验及聚合酶链反应 ,分别检测口腔鳞癌和对照组患者血清中抗HHV 6IgG及外周血单个核细胞中HHV 6DNA序列 ;用免疫组化染色法 ,检测口腔鳞癌组织标本中HHV 6抗原。结果 :16例口腔鳞癌患者和 16例其他口腔疾病患者血清中抗HHV 6IgG的阳性率分别为 10 0 .0 %和 75 .0 % ,几何平均滴度分别为 1∶118和 1∶64 ,差异有显著意义 (P <0 .0 5 )。上述 2组患者HHV 6DNA的检出率分别为 62 .5 %和 12 .5 % (P <0 .0 5 )。其中 12例口腔鳞癌组织标本经免疫组化染色检测 ,9例 ( 75 % )HHV 6抗原阳性 ,而 8例对应癌旁组织中 ,阳性者仅 2例( 2 5 % ) ,两者间差异有显著性 (P <0 .0 5 )。结论 :HHV 6可能是口腔鳞癌发生的诱因 ,在肿瘤发生发展中起一定作用