EBV-LMP2A重组腺病毒体外转染树突状细胞激发特异性CTL的研究

目的：用EBV潜伏膜蛋白2A(EBV-LMP2A)重组腺病毒转染树突状细胞(DC)激发特异性细胞毒性T细胞(CTL)，分析CTL的特性。方法：用AdS-LaMP2A重组腺病毒转染EBV健康携带者及鼻咽癌患者的DC，与自体来源的外周血单个核细胞(PBMC)混合培养，激发LMP2A特异性CIL。用LDH释放法检测CIL杀伤活性；流式细胞术(FACS)检测培养细胞群体中CD3^ 、CD4^ 、CD8^ 、CD56^ 细胞的组成；生物活性法检测细胞培养上清中IFN-γ含量；RT-PCR分析CTL的FasL mRNA表达。结果：EBV健康携带者及鼻咽癌患者的PBMC，经AdS-LMP2A转染的自体DC两次刺激后，都能诱导出显著的EBV-LMP2A特异的CIL。EBV健康携带者CTL的杀伤活性，随DC刺激次数的增加而逐渐增强，诱导的CTL细胞群体以CD^4 和CD8^ 细胞组成为主，且CD4^ 细胞比例高于CD8^ 细胞，另含少量CD56^ 细胞；在不同时段所诱导的CTL上清中，均含一定量的IFN-γ并随刺激次数和诱导时间的延长呈上升趋势；RT-PCR研究表明，所诱导的CTL有FasL mRNA的表达。结论：以腺病毒载体介导EBV-LMP2A基因转染的成熟DC，在体外能激发较强的LMP2A特异的功能性CTL，可用于EBV相关NPC的免疫治疗。     

Partial Sequence Analysis of the Genome of Human Herpesvirus 7 YY5 Isolated from Saliva Samples

Ｈｕｍａｎｈｅｒｐｅｓｖｉｒｕｓ 7(ＨＨＶ 7)ｉｓｏｎｅｏｆｔｈｅｍｏｓｔｒｅｃｅｎｔｌｙｄｉｓｃｏｖｅｒｅｄｍｅｍｂｅｒｏｆｔｈｅｈｅｒ ｐｅｓｖｉｒｕｓｆａｍｉｌｙ .Ｉｔｗａｓｆｉｒｓｔｉｓｏｌａｔｅｄｆｒｏｍａｃｔｉｖａｔ ｅｄＣＤ4 Ｔｃｅｌｌｓｆｒｏｍｐｅｒｉｐｈｅｒａｌｂｌｏｏｄｍｏｎｏｎｕ ｃｌｅａｒｃｅｌｌｓ (ＰＢＭＣｓ)ｏｆａｈｅａｌｔｈｙｉｎｄｉｖｉｄｕａｌ[1] ,ａｐａｔｉｅｎｔｗｉｔｈｃｈｒｏｎｉｃｆａｔｉｇｕｅｓｙｎｄｒｏｍｅ(ＣＦＳ) [2 ] ,ａｎｄｆｒｏｍｓａｌｉｖａｏｆｈｅａｌ…     

人类疱疹病毒6、7型体外感染淋巴细胞对CD抗原表达的影响

人类疱疹病毒6 、7型(HHV-6、HHV-7)是近年发现的人类疱疹病毒家族的新成员,它们对淋巴细胞具有高度的亲嗜性,同属于人类β-疱疹病毒.HHV-6根据体外生长特点,对单抗的反应性及限制性酶切图谱等方面特征又分为2种类型:A型和B型[1].本文研究了HHV-6A型株GS及我室分离的HHV-6 B型株 CN5、HHV-7YY5 3株病毒感染淋巴细胞对CD抗原表达的影响[2,3],并对其免疫机理作了初步探讨.     

城乡社区慢性病患者的消费及服务需求调查

目的调查了解城乡慢性病患者的医疗消费能力以及在"4P"医学模式上对社区卫生服务的服务需求,提出加大医疗投入及加强医患沟通等建议。方法以封闭式调查问卷以及面对面访谈的形式进行调查;回收问卷后,对问卷进行描述,SPSS17.0统计学软件统计、分析并处理。结果城乡慢性病患者的社区卫生服务消费能力不足,社区卫生服务不能从服务质量、心理服务等方面满足城乡慢性病患者的看病需求。结论加大力度解决患者看病问题和从"4P"医学模式上更好地为广大慢性病患者服务。     

氯化物硫氰酸汞比色法测定的若干问题

氯化物硫氰酸汞比色法测定的若干问题彭光勇，刘文虎（解放军第八一医院生化科，南京２１０００２）目前一些实验室多采用硫氰酸汞比色法测定血清氯。本文就该法测定过程中常碰到的一些问题，如Ｈｇ（ＮＯ３）２用量的选择、温度对显色的影响、标准管与标准曲线的选择及稳...     

Epstein—Barr病毒潜伏膜蛋白2A重组痘苗病毒转染DC及特异性CTL的体外诱导

通过ＥＢ病毒ＬＭＰ２Ａ重组痘苗病毒转染的ＤＣＳ体外诱导ＬＭＰ２Ａ特异性ＣＴＬ,并通过ＧＭ－ＣＳＦ、ＩＬ－４和ＴＮＦ－ａ培养体系,我们诱导出了人外周血单核细胞来源的ＤＣ。同时选用在鼻咽癌患者中表达的ＥＢ病毒潜伏蛋白之一ＬＭＰ２Ａ作为靶基因,利用重组痘苗病毒转染诱导的ＤＣＳ。ＤＣＳ与自体ＰＢＭＣＳ混合培养,在ＩＬ－２的刺激作用下获得特异性ＣＴＬ。结果如下：１．人外周血单核细胞经ＧＭ－ＣＳＦ、ＩＬ－４、ＴＮＦ－ａ的混合培养,１０天可获得成熟的功能性ＤＣＳ。ＦＡＣＳ检测显示ＤＣ表面相对特异性标志ＣＤ８３…     

逆转录病毒介导乙型肝炎病毒C基因在树突状细胞中的转移

目的：探讨逆转录病毒介导乙型肝炎病毒核心抗原(HBcAg)基因在骨髓来源的树突状细胞(DC)的转移效率，以及对DC成熟和功能的影响。方法：用含有HBV C基因的重组逆转录病毒载体，感染处于分裂期的小鼠骨髓祖细胞，感染后的骨髓细胞在GM—CSF和IL—4存在的条件下继续培养获得成熟的DC，用PCR、RT—PCR，分析目的基因的整合与转录；用Western blot和流式细胞仪，分析HBcAg的表达及基因转移效率，以及检测感染前后DC CD80和MHC—Ⅱ类分子的表达以及分泌IL—12能力的变化；通过将基因转移后的DC与淋巴细胞进行混合培养，检测其体外诱导CTL的能力。结果：逆转录病毒感染后并不影响骨髓来源的DC成熟，对其表面分子CD80和MHC-Ⅱ类分子的表达和分泌IL-12的能力没有影响。目的基因能整合到DC的基因组DNA中，并能转录和翻译。约28％的DC能表达HBcAg，感染后的DC体外能诱导T细胞应答。结论：逆转录病毒能有效地将HBV C基因转移到骨髓来源的DC中，对DC的成熟和功能无明显影响，并能诱导CTL应答，这将有助于开展以DC为基础的慢性乙肝的免疫治疗。