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1.
自杀基因联合化疗药物治疗结肠癌的体外研究 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 研究胞嘧啶脱氨酶基因(CD)联合化疗药物对结肠癌的治疗作用。方法 以重组腺病毒AdCMVCD为载体转移CD基因,在体外研究病毒感染对顺铂(CDDP)、丝裂霉素(MMC)敏感性的影响,化疗药物对AdCMVCD/5-FC直接杀伤作用及“旁观者效应”的影响。结果 病毒感染并不影响Lovo细胞对CDDP、MMC的敏感性;低剂量CDDP、MMC即可明显增强AdDMVCD/5-FC系统的直接杀瘤作用,5-FC的IC50明显降低(P<0.05),并且增强AdCMVCD/5-FC系统的“旁观者效应”。结论 化疗药物可以增强自杀基因系统对结肠癌的治疗作用,自杀基因和化疗药物有望联合应用于结肠癌的治疗。 相似文献
2.
应用不连续密度梯度法分离获得人肝癌浸润性单个核细胞(TIM),RNA斑点杂交提示TIM中有明显的TNFαmRNA转录。经RT-PCR扩增反应分离得到一特异的700bp左右的DNA片段,DNA序列分析证实这一DNA片段中包含编码人TNFα成熟肽所需的全部cDNA序列。将这一人TNFαcDNA克隆到真核细胞表达质粒pSVK3,获得真核细胞表达重组质粒pSVK3-tnf,用磷酸钙沉淀法将pSVK3-tn 相似文献
3.
腺病毒介导的肿瘤血管靶向的体外自杀基因治疗研究 总被引:3,自引:0,他引:3
本工作在血管内皮细胞中分别建立了HSV-tk/GCV和EC-cd/5-FC自杀基因系统,用于抑制实体肿瘤中血管生成的研究.构建含自杀基因的重组腺病毒AdCMVtk和AdCMVcd,滴度均1×10~(12)pfu/ml.病毒感染小鼠血管内皮细胞lGll(MOI=100),并鉴定自杀基因的表达,测定原药对它们的杀伤.生长抑制试验表明,GCV对lGll/Ad-tk细胞杀伤的IG_(50)为0.2μmol/ L,5-FC对lGll/Ad-cd细胞杀伤的IC_(50)为20μmol/L.电镜下显示被原药杀伤的血管内皮细胞有明显的细胞凋亡现象.同时混合细胞实验证明两系统均存在明显的旁杀伤效应.从而在体外水平证明了HSV-tk/GCV和EC-cd/5-FC自杀基因系统杀伤增生血管内皮细胞的有效性. 相似文献
4.
人TNFα基因转染的人肝癌细胞稳定高表达克隆SMMC7721-TNF体外抗瘤活性及其可能机制的初步研究 总被引:1,自引:0,他引:1
应用逆转录病毒载体介导人TNFα基因感染人肝癌细胞株SMMC7721,经G418筛选获得一稳定高表达SMMC7721-TNF,观察SMMC7721-TNF细胞及其培养液上清对SMMC7721和BEL7404肝癌细胞的抗瘤效应,结果表明SMMC7721-TNFα细胞本身对两种细胞均无明显的杀伤作用,但其培养液上清对这两种细胞均具有明显的抑制作用, 相似文献
5.
将含人肿瘤坏死因子(TNFα)cDNA的不同逆转录病毒载体(LNS-tnfα、L-tnfαSN及LNC-tnfα)和质粒型真核细胞载体(pSVK3-tnfα),分别用磷酸钙法导入肝癌细胞SMMC-7721中,观察TNF的表达水平。结果:重组质粒型表达载体pSVK3-tnfα表达好,24小时开始分泌TNFα(50U/ml),48~72小时达最高值(90U/ml),96小时后下降(40U/ml)。将pSVK3-tnfα重组DNA用磷酸钙包裹后直接进行瘤内注射,发现裸鼠外周血TNFα水平有一过性增高,3周后测量瘤体大小,发现实验组的肿瘤体积明显小于对照组(2.5±1.6cm比3.2±1.8cm,n=6,P<0.05),实验组荷瘤裸鼠的生存时间亦明显延长(44.0±3.3d比28.2±2.0d,n=6,P<0.01)。结果表明,应用TNFα基因转移进行肝癌的基因治疗是一条值得探索的途径。 相似文献
6.
为从分子水平来阐明药物对肾阳虚证的主要调节点。采用逆转录多聚酶链反应化学发光定量法、放射免疫及细胞免疫技术,观察补肾,健脾,活血三类复方分别对下丘脑-垂体-肾上腺-胸腺轴受抑制模型的下丘脑促肾上腺皮质激素释放因子mRNA表达,神经内分泌和免疫功能的影响。 相似文献
7.
以阳离子脂质体lipofectin介导含人白细胞介素一2(IL-2)基因的真核表达质粒pME18S-IL-2转染体外培养和体内成瘤的小鼠肝癌HAC细胞,观察IL-2基因转染的肝癌细胞表达IL-2情况及对肝癌的治疗作用。结果:体外转染IL-2基因48小时后在培养上清中可测得人IL-2活性,96小时达最高峰(76U/ml);瘤体内转染后,发现治疗组小鼠生存时间明显延长(32.1±9.4d比20.9±7.5d,P<0.01),肿瘤体积明显小于对照组,瘤组织内可检出IL-2的mRNA。实验表明,脂质体-IL-2基因复合物直接注射人瘤体后可获局部IL-2基因表达,从而诱生机体抗肿瘤效应,这为肝癌基因治疗提供了一种简便实用的模式。 相似文献
8.
聚乙二醇(PEG-8000)化学修饰重组人白细胞介素-2(PEG-rIL-2)显著地延长了rIL-2的循环半衰期。本研究比较了不同剂量方案的PEG-rIL-2和rIL-2的体内抗小鼠宫颈癌作用,采用局部用药抗移植的小鼠腹水瘤型和皮下实体瘤型宫颈癌U14。结果表明:腹腔内注射一定剂量的PEG-rIL-2(4500IU,QD×5)能较相同剂量的rIL-2显著延长荷腹水瘤小鼠的存活期(23.1±3.6天比16.5±2.0天,P<0.01),但PEG-rIL-2剂量过低则无明显疗效。在小鼠皮下移植肿瘤的局部并于肿瘤移植后的第4天开始注射给药,不同剂量的PEG-rIL-2(1500~13500IU,QD×5)对皮下移植瘤的生长抑制作用显著强于相同剂量的rIL-2(P<0.01),且抗肿瘤作用呈剂量依赖效应。本研究提示,PEG-rIL-2的抗小鼠宫颈癌作用优于rIL-2,对人宫颈癌的局部免疫治疗具有潜在的临床价值。 相似文献
9.
目的建立人γ-干扰素(IFN-γ)基因修饰的结肠癌细胞株方法用逆转录病毒质粒pL(IFN-γ)SN将人IFN-γ基因转导入人结肠癌细胞株Lovo中,用G418进行筛选结果筛选得到抗性克隆Lovo/IFN-γ,能在0 6 g.L1GG418中稳定生长;Lovo/IFN-γ生长曲线与野生型Lovo无异;RT-PCR证实IFN-γ基因在Lovo/IFN-γ中表达;Lovo/IFN-γ能分泌人IFN-γ,细胞内水平为3.0fg.d-1.结论成功建立了人IFN-γ基因修饰的结肠癌细胞株,为进一步研究奠定了基础. 相似文献
10.
目的:研究胞嘧啶脱氨酶基因(EC鄄CD)联合干扰素-酌(INF鄄酌)基因对大肠癌的治疗作用。方法:以重组腺病毒载体AdCMVCD转导EC鄄CD基因;AdCMVINF鄄γ转导鼠INF鄄γ基因。采用体外培养和小鼠移植瘤实验,研究EC鄄CD基因联合INF鄄γ基因对CT26大肠癌细胞的杀伤作用。结果:AdCMVIFN鄄γ感染对CT26细胞生长有明显的抑制作用。AdCMVCD/5鄄FC联合AdCMVINF鄄γ可以增强对CT26细胞的杀伤作用,IC50明显变小(P<0.01),肿瘤生长明显抑制(P<0.01)。组织学检查显示,EC鄄CD基因与INF鄄γ基因联合治疗后肿瘤内有大量淋巴细胞浸润。结论:EC鄄CD基因联合INF鄄γ基因可以明显增强抗肿瘤效应,局部淋巴细胞浸润增加可能起到一定作用。 相似文献