应用ICP-MS的ORS技术进行人体铁稳定同位素代谢示踪研究的初探

目的应用四极杆型电感耦合等离子体质谱仪(ICP-MS)配合最新的八极杆碰撞/反应池(ORS)消干扰技术进行Fe的同位素比测定研究。方法于现场进行人体代谢试验,受试者口服57Fe稳定性同位素示踪剂,以卡红为标志,粪便监测法收集试验期内的所有粪样,测定粪样中57Fe/56Fe的比值。结果运用ICP-MS的ORS技术可消除由Ar等离子体本身以及样品中存在的Ca等产生的多原子离子对Fe带来的干扰;稀释实际样品到一定范围,基体干扰可忽略不计;标准样品和实际样品短期及长期精密度均小于0.3%;测定两组受试者粪样中的57Fe/56Fe的比值,发现代谢后排泄出的57Fe遵循一定的变化趋势,从而可以测定人体对Fe的代谢吸收比率。结论该技术可准确测定粪样中57Fe/56Fe的比值,可以用来计算评价膳食中铁吸收率的情况,追踪铁在人体中的代谢过程。     

黄海葵附生真菌Penicillium thomii的化学成分

目的研究黄海葵(anemone)附生真菌Penicillium thomii的化学成分。方法用各种色谱技术进行分离纯化,根据理化性质和波谱数据进行结构鉴定。结果从黄海葵附生真菌Penicillium thomii菌丝体中分离得到5个化合物,分别为青霉酮A(I),对甲基苯甲酸(II),1-O-十六碳烷酰-2-O-(9-十八碳烯酰)-3-O-(9,12-十八碳二烯酰)甘油酯(III),5α,8α-环二氧-24ζ-甲基胆甾-6,22-二烯-3β-醇(IV)和大黄素(V)。结论青霉酮A(I)为新化合物,化合物II,III,IV和V系首次从该属中分离得到。     

淋巴细胞中钙信号的研究进展

钙信号是细胞中普遍存在的第二信使。几乎所有的细胞程序都直接或间接地受细胞内钙信号的影响。对于细胞内钙离子浓度的调节是许多生物体系所采用的最一般的信号机制。淋巴细胞中的钙信号在调控淋巴细胞的功能中起关键作用，淋巴细胞的激活、增殖以及功能的发挥都依靠钙信号的传导。本综述了淋巴细胞中钙信号的功能和分子调控机制研究的最新进展。     

海洋芽孢杆菌B-9987中抗MDR菌活性成分研究

挖掘具有优良多重耐药菌(MDR)抗菌活性的次级代谢产物,为海洋新药研发提供分子多样性。方法 对海洋芽孢杆菌B-9987进行大发酵,将发酵产物进行提取分离,每一步分离过程进行MDR活性追踪。结果 B-9987粗提物对4株MDR菌(金黄色葡萄球菌CCARM 3090、沙门氏菌CCARM 8250、大肠杆菌CCARM 1009、粪肠球菌CCARM 5203)具有良好的抗菌活性。通过HPLC分离纯化及MS、NMR等波谱分析获得了化合物1(Macrolactin F)和化合物2(Bacillaene A)。化合物1对MDR菌没有抗菌活性。由于化合物2对光、温度、氧气十分不稳定,无法直接测试活性。对含有化合物2的组分进行活性测试,确定了B-9987的MDR菌抗菌活性来自于Bacillaene类化合物。结论 鉴定了B-9987中的抗MDR菌活性成分。     

MEKC和MEEKC两种模式测定龙胆中龙胆苦苷和马钱子苷酸的含量

目的 建立胶束电动毛细管色谱(MEKC)和微乳液毛细管电动色谱(MEEKC)分析龙胆药材中龙胆苦苷和马钱子苷酸含量的方法.方法 采用加速溶剂萃取法(ASE)对龙胆药材进行提取,萃取温度:100℃,压力:9.65 Mpa,萃取时间:10 min.采用未涂层熔融石英毛细管(内径75 μm,有效长度50 cm).分别考察了两种分离模式下电泳介质的构成和电泳过程中的各操作参数对样品分离过程的影响,优化了MEKC和MEEKC的分析条件,在各自对应的缓冲液体系下,MEKC和MEEKC分离电压分别为30和22 kV,柱温均为25℃,检测波长均为238 nm.结果 在选定的工作条件下,龙胆苦苷和马钱子苷酸与其他组分达到了基线分离,两种成分的浓度与其响应信号值之间具有较好的线性相关性,加标回收率在96.3%～105.1%之间,检测限均低于10 mg·L-1,对6处不同产地的龙胆药材进行了分析,并对测定结果进行了t检验,结果表明,两种模式下,测定结果之间不存在显著性差异,而不同产地的龙胆药材的龙胆苦苷和马钱子苷酸含量之间存在较大差异.结论 本方法简便,准确,快速,重现性较好,可用于龙胆药材有效成分的含量测定和质量控制.     

南极细菌Pseudoalteromomas sp.S-15-13的分子鉴定及其胞外多糖促进小鼠脾淋巴细胞转化的作用

目的探讨产胞外多糖南极细菌的筛选，对高产糖菌株S-15—13进行分子鉴定。并测定其胞外多糖的体外免疫活性。方法采用显微镜检测以厦细菌胞外多糖染色方法对南极产糖菌进行了筛选；通过16SrDNA对菌株S-15—13进行了分子鉴定并采用Heek方法测定了该菌胞外多糖促进小鼠脾淋巴细胞增殖的作用。结果与结论从南极科学考察采集、分离的57株细菌中．通过胞外多糖染色法筛选获得27株产胞外多糖的菌株，16SrDNA鉴定菌株S-15—13为Pseudoalteromonas sp．。胞外多糖分离、纯化后获得的组分Ⅰ（EPSⅠ）单独或联合Con A使用可明显促进脾淋巴细胞增殖。     

MEKC和MEEKC两种模式测定龙胆中龙胆苦苷和马钱子苷酸的含量

 目的建立胶束电动毛细管色谱(MEKC)和微乳液毛细管电动色谱(MEEKC)分析龙胆药材中龙胆苦苷和马钱子苷酸含量的方法。方法采用加速溶剂萃取法(ASE)对龙胆药材进行提取,萃取温度:100℃,压力:9.65MPa,萃取时间:10min。采用未涂层熔融石英毛细管(内径75μm,有效长度50cm)。分别考察了两种分离模式下电泳介质的构成和电泳过程中的各操作参数对样品分离过程的影响,优化了MEKC和MEEKC的分析条件,在各自对应的缓冲液体系下,MEKC和MEEKC分离电压分别为30和22kV,柱温均为25℃,检测波长均为238nm。结果在选定的工作条件下,龙胆苦苷和马钱子苷酸与其他组分达到了基线分离,两种成分的浓度与其响应信号值之间具有较好的线性相关性,加标回收率在96.3%～105.1%之间,检测限均低于10mg·L^-1,对6处不同产地的龙胆药材进行了分析,并对测定结果进行了t检验,结果表明,两种模式下,测定结果之间不存在显著性差异,而不同产地的龙胆药材的龙胆苦苷和马钱子苷酸含量之间存在较大差异。结论本方法简便,准确,快速,重现性较好,可用于龙胆药材有效成分的含量测定和质量控制。     

HPLC指纹图谱应用于炙甘草的炮制研究

目的:应用HPLC指纹图谱规范炙甘草的炮制。方法:采用反相高效液相色谱法,DENALI C18色谱柱(VYDAC238DE5415,120A,5μm,4.6mm×150mm),以3%(v/v)HAc溶液和甲醇为流动相,梯度洗脱,柱温40℃,检测波长252nm。结果:炙甘草的HPLC指纹图谱有20个共有峰。传统炒制法炮制的炙甘草样品有一部分峰的重现性RSD值>3%;烘制法炮制的样品重现性有2个共有峰相对峰面积比的RSD>3%;微波法炮制的样品重现性符合指纹图谱的要求,20个共有峰相对峰面积比的RSD值均小于3%。结论:烘制和微波加热的炮制方法,可控性强,样品的指纹图谱重现性高,可以作为替代传统炒制工艺的新工艺。     

南极适冷菌Pseudoalteromonas sp.S-15-13胞外多糖EPS-Ⅱ对小鼠S180肉瘤抑制作用的研究

目的 研究南极适冷菌Pseudoalteromonas sp．S-15—13胞外多糖EPS-Ⅱ的抑瘤作用。方法 不同浓度的EPS-Ⅱ腹腔注射于荷S180肉瘤小鼠，通过荷瘤小鼠的脾重和瘤重变化来测定EPS-Ⅱ的抑瘤效果；采用免疫组化方法，测定荷瘤小鼠增殖细胞核抗原（PCNA），三联组氨酸（FHIT）和S-100蛋白阳性表达的情况。结果 （1）不同剂量的EPS-Ⅱ均具有提高荷瘤小鼠脾脏重量，有效抑制肿瘤生长的作用，最高抑瘤率可达45．1％。（2）免疫组织化学结果表明，不同剂量的EPS-Ⅱ均能抑制PCNA表达，促进FHIT和S-100蛋白表达的作用。结论 南极适冷菌S-15—13胞外多糖EPS-Ⅱ可能通过调节PCNA，FHIT和S-100的表达来发挥抑瘤作用。     

新鲜黄芩炮制工艺研究

目的:研究新鲜黄芩的炮制工艺并测定黄芩苷的含量。方法:采收黄芩,于自然条件下贮存43d后,以切片、炮制、干燥温度和时间为4个因素,采用正交试验设计,初步确定新鲜黄芩炮制工艺规范。结果:在自然条件下新鲜黄芩自身酶解变化不显著。炮制工艺参数为:斜片、酒炙黄芩、25℃下干燥1.5h,此时黄芩苷收率最大,为9.836%。结论:本研究可为新鲜黄芩的采后处理和炮制规范的制订提供依据。