甲基化特异性微阵列法定量检测恶性血液病患者p16基因甲基化

DNA甲基化是细胞的一种表观遗传现象,也是一种重要的影响基因表达的机制.当DNA异常甲基化时会导致癌基因的激活和抑癌基因的沉默,促使肿瘤的发生[1].     

新型亚甲基四氢叶酸还原酶单核苷酸多态性研究方法检测恶性血液病易感性

本研究探讨一种新型亚甲基四氢叶酸还原酶（MTHFR）单核苷酸多态性（SNP）检测方法，并用其检测恶性血液病遗传易感性。根据cDNA芯片原理制作一种目的基因芯片，利用双色荧光探针杂交进行SNP位点检测，测序法对该芯片检测结果的准确性进行验证，并以此对来自中国江苏地区的157例健康对照和127例恶性血液病患者（30例多发性骨髓瘤，28例非霍奇金淋巴瘤，22例急性淋巴细胞白血病，40例急性髓系白血病，7例慢性髓系白血病）的MTHFR基因C677T多态位点进行检测。结果表明，为野生型、杂合型和突变型的叠加荧光分别显示为绿色、黄色和红色。测序结果与芯片结果吻合。677C和677T在病例和对照组的基因频率分别为58．7％、66．9％、41、3％和33、1％，差异有显著性（χ^2=4．077，P=0．043）。677TT基因型发生MM相对风险明显增加（OR=4．21；95％CI=1．50-11．83；P=0．006）。结论：本芯片检测方法准确、高通量且价格低廉，适用于大规模样本SNP调查；C677T多态改变影响恶性血液病的发病风险。677TT基因型是MM的易感因素。     

非生长因子依赖的MDS细胞系的建立及其生物学特性研究

本研究的目的是从骨髓增生异常综合征-慢性粒-单核细胞白血病(MDS—CMML)病人获取骨髓细胞，建立非生长因子依赖的细胞株。该细胞株在不添加任何生长因子的含15％胎牛血清的RPMI 1640和DMEM混合培养液中进行了培养，并分别从细胞株的形态、细胞表面抗原分子、细胞增殖、分化、凋亡等方面检测其生物学特性。结果表明：在不添加任何生长因子的培养条件下该细胞株可以长期存活和生长，并能向单核及巨核细胞分化。结论：成功建立了一株非生长因子依赖的MDS—JSN04(MDS-江苏南京04)细胞株，并阐明了其部分生物学特性。     

ProMACE/CytaBOM方案治疗难治性复发性淋巴瘤疗效观察

目的：观察ProMACE／CytaBOM方案治疗难治性复发性淋巴瘤的疗效。方法：对12例难治性复发性淋巴瘤患者采用Pro-MACE／CytaBOM方案治疗，并随访半年。结果112例患者完全缓解3例，部分缓解5例，稳定2例，进展2例。结论：ProMACE／CytaBOM方案是治疗难治性复发性淋巴瘤的一种可行性方案。     

以长春地辛取代长春新碱的DOP方案治疗急性淋巴细胞白血病的近期初步观察

长春地辛(VDS）是长春花硷(VLB）的半合成衍生物,主要用于实体瘤的治疗,有关用VDS代替DOP方案中的VCR组成新的DOP方案治疗成人急淋(ALL）的报道不多。我科自1999年8月至2000年8月用新方案治疗初治及难治复发ALL患者获得较为满意的疗效,现报告如下。1 材料与方法1．1 临床资料本组共计8例ALL患者,男女各占4例。初发3例,难治复发5例。年龄范围20～50岁,平均年龄38岁。1．2治疗方法诱导方案中DOP用法：DNR 80mg d1～3。VDS 4mg d1,8。强的松80mg d1～14。缓解后治疗DOP用法：DNR 80mg d1～2。VDS 4mg d1,8。强的松80…     

氨磷汀与峰龄多糖对外周血造血干细胞的刺激增殖及协同作用

目的研究氨磷汀(WR-2721)和峰龄多糖(FLPS)对人外周血造血干/祖细胞的刺激增殖及协同作用.方法分离单个核细胞(MNC),进行甲基纤维素半固体培养,观察氨磷汀和峰龄多糖对骨髓粒-巨噬细胞集落(CFU-GM)的作用.结果经0.01～5.0 mmol/L氨磷汀37℃作用30分钟的MNC以及峰龄多糖0.5～25μg/ml时CFU-GM集落数均显著高于对照组(P＜0.05),且集落较大.CFU-GM平均集落数在对照组、WR-2721(1 mmol/L)组、FLPS(5μg/ml)组和AMF+FLPS组每105MNC分别为91.4±50.4、119.8±62.9、143.2±76.4和179.2±97.6,各组与对照组相比,差异有显著性(P＜0.05);AMF+FLPS组CFU-GM集落数显著高于AMF和FLPS组(P＜0.01和＜0.05).结论氨磷汀和峰龄多糖对CFU-GM具有明显的刺激增殖及协同作用.     

p16基因在K562/A02细胞株表达情况的研究

目的:研究p16基因在K562/A02细胞株的表达情况及其与耐药的关系。方法:用PCR法对慢性髓系白血病细胞株K562及其耐药细胞株K562/A02进行p16基因缺失检测。结果:K562及K562/A02细胞株经PCR扩增后,均未扩出相应条带。结论:K562/A02细胞株与K562细胞株一样,均表现为p16基因缺失。     

环孢菌素A、汉防己甲素及两者联合逆转K562/A02 细胞的多药耐药

目的:探讨环孢菌素A(CsA)、汉防己甲素(Tet)及两者联合应用对人白血病耐药细胞系K562/A02多药耐药的逆转作用。方法:采用MTT法测定柔红霉素(DNR)对细胞的半数抑制量(IC50),流式细胞仪检测细胞凋亡率和细胞内DNR浓度。结果:DNR对K562细胞和K562/A02细胞IC50分别为0.27和21.22 mg.L-1;CsA(1 mg.L-1)及Tet(0.1 mg.L-1)单独和联合处理K562/A02后,DNR的IC50分别为7.83、5.32和2.32 mg.L-1;CsA和Tet对DNR作用K562的IC50无明显影响;K562/A02细胞48 h凋亡率为2.19%,DNR(1 mg.L-1)作用K562/A02细胞凋亡率为2.70%,CsA和Tet单独及联合处理后凋亡率分别为10.27%、17.64%和52.79%;两药处理后细胞内化疗药物DNR浓度亦明显增加。结论:CsA及Tet均可逆转耐药,且联合作用逆转效果更强。     

异搏定对非p-gp高表达细胞株的增敏及耐药逆转作用

目的 :观察异搏定 (verapamil ,Ver)对非p -gp高表达细胞株的增敏及耐药逆转作用。方法 :使用二甲氧唑黄比色法 (XTT法 )检测药物敏感性 ,观察Ver对鬼臼乙叉甙 (etoposide ,VP16)的增敏及耐药逆转作用。结果 :单独Ver对HL 60和HL 60 /Adr细胞株的IC50 分别为 2 6.13mg·L-1和 3 9.0 0mg·L-1,单独VP 16对HL 60细胞的IC50 为 2 47.17μg·L-1,而加用Ver 5mg·L-1预处理 1h后 ,VP16对HL 60细胞的IC50 值下降为原来的 1/1.73 ;单独VP 16对HL -60 /Adr细胞的IC50 为872 .97μg·L-1,而加用Ver 5mg·L-1预处理 1h后 ,IC50 下降至 2 0 8.45 μg·L-1,为原来的 1/4.19,与VP16对HL 60敏感株的IC50 接近。结论 :Ver对非p gp高表达细胞株具有增敏及耐药逆转作用     

移植前选择性去除同种异体反应供者淋巴细胞预防移植物抗宿主病的实验研究

目的探讨在移植前选择性去除同种异体反应的供者淋巴细胞预防移植物抗宿主病(GVHD)的效果。方法以(BALB/c×C57BL/6)F1雌性小鼠(H-2d/b)为受鼠,于第0天接受亚致死量的60Coγ射线全身照射(TB I),总剂量为4 Gy,第1天接种P388D1白血病细胞,第2天输注由C57BL/6雄性小鼠(H-2b)为供鼠提供的不相匹配的供者脾淋巴细胞,第6天再次TB I 9 Gy,第7天输注由(BALB/c×C57BL/6)F1雄性小鼠(H-2d/b)提供的骨髓造血干细胞。结果以TB I选择性去除同种异体反应供者淋巴细胞组的小鼠无白血病和GVHD的发生,生存期超过了210 d。对照组的小鼠出现了明显的GVHD、白血病或因出血、感染导致的死亡,生存期短,为20~36 d(P<0.01)。结论在造血干细胞移植前输注不相匹配的供者淋巴细胞诱导移植物抗白血病(GVL)效应,然后再选择性去除同种异体反应的供者淋巴细胞来预防GVHD的发生是可行的。