大鼠脑源性神经营养因子基因重组真核表达载体的构建及其表达

背景：脑源性神经营养因子对多种神经元的发育、存活及轴突再生中起着重要作用，但由于血脑屏障的存在，限制了其应用。 目的：构建大鼠脑源性神经营养因子基因重组真核表达载体，观察其在真核细胞内的表达。 设计、时间及地点：单一样本实验。于2005—09／2006—09在昆明医学院神经科学研究所完成。 材料：清洁级健康雄性8周龄SD大鼠，体质量250g。 方法：①以反转录聚合酶链反应从大鼠脑组织总RNA扩增脑源性神经营养因子基因编码序列，将其克隆到真核表达载体pcDNA3中，构建重组表达载体pcDNA3／BDNF。②将L939细胞分为pcDNA3／BDNF转染组、pcDNA3转染组和未转染组，以FuGeneHD转染试剂介导相应质粒转染。 主要观察指标：①重组质粒pcDNA3／BDNF的酶切鉴定与序列分析。②免疫细胞化学和western blot鉴定脑源性神经营养因子在L929细胞中的表达。 结果：①重组质粒pcDNA3／BDNF经酶切产生783bp和5．2kb的片段，DNA测序证实783 bp片段的碱基序列与大鼠脑源性神经营养因子基因编码序列完全一致。②基因转染后，免疫细胞化学、western blot结果表明脑源性神经营养因子能在真核细胞中正确表达。 结论：成功构建了重组真核表达质粒载体pcDNA3／BDNF，为后续研究奠定了基础。     

经皮肾镜钬激光碎石并发症的防治

目的 探讨微创经皮肾镜下钬激光治疗肾及输尿管上段结石的并发症及处理方法.方法 B超或X线定位下,行患肾穿刺造瘘,扩张后置入F18剥皮鞘,输尿管镜在持续冲洗下,用钬激光将结石击碎,碎石从剥皮鞘中冲、取出.结果 34例患者中,2例在扩张经皮肾通道时出血,视野不清,留置肾造瘘管后行二次手术.穿刺时未损伤周围脏器.但术后有3例患者有大出血,经DSA下栓塞后止血,无导致肾切除的病例.1例术后有肾盂输尿管交界处狭窄,行肾盂整形术.1例在穿刺时有集合系统撕裂,术后经引流无其他并发症.结论 微创经皮肾镜下钬激光碎石有可能出现各种并发症,但均可防治,是安全、有效的结石治疗方法,值得推广.     

青年性大肠癌临床病理特点及遗传背景分析

目的：分析青年人大肠癌的临床特点及遗传背景。方法：收集昆明医学院第一附属医院1989年～2007年间收治的229例年龄≤40岁青年性大肠癌患者的资料，与同期收治的年龄60岁以上的818例老年大肠癌患者作为对照，进行回顾性分析。结果：青年人大肠癌占同期大肠癌的13．65％；临床症状以大便性状改变和血便为主，但与老人组相比，发生率差异无统计学意义（P〈0．05）；发病部位直肠为主；组织学类型以黏液腺癌和印戒细胞癌、低分化腺癌、未分化癌为主占66．4％；TNM分期以Ⅲ期和Ⅳ期为主，占71．7％；遗传背景分析发现，有家族史的青年性大肠癌患者占14．0％，与老年组相比，差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论：青年性大肠癌发病隐匿，临床症状不明显，早期诊断困难。组织类型分化较差；遗传在青年性大肠癌发病上起重要作用。     

细胞穿透肽在基因调节中的应用

细胞穿透肽(cell penetrating peptides,CPPs)[1]是一种能有效穿透细胞脂质层膜的短肽,由于它的这一特性,可作为载体在体内外运载不同的生物活性物质。1994年,文献[1]首次提到CPPs用作载体转运各种物质,从微小物质到整个质粒。CPPs能单独或运载"货物"有效穿透细胞质膜或核膜。CPPs可以运载     

腹腔镜在肾上腺外科手术中应用

腹腔镜手术是一种侵袭性较小的微创外科手术,近年来在泌尿外科发展及其迅速,尤其在肾上腺手术上,被认为是金标准。本文就腹膜后腹腔镜在肾上腺外科手术中的应用进展作一综述。     

原发性输尿管肿瘤的临床诊治研究

目的 提高原发性输尿管肿瘤的临床诊治水平.方法 回顾性分析19例原发性输尿管肿瘤的临床特征,诊断和治疗方案.结果 19例病例均行手术治疗.术后病理:13例尿路上皮癌,2例低分化癌,3例输尿管息肉,1例输尿管结核. 结论肉眼血尿、腰痛和肾积水是本病三大临床特征,联合应用B超、静脉尿路造影、逆行肾盂造影、CT、膀胱镜、输尿管镜及尿脱落细胞等多项检查可提高肿瘤的诊断符合率.原发性输尿管肿瘤中输尿管癌多见,患侧肾、输尿管和膀胱袖状切除是其首选治疗方法.良性息肉考虑行保留肾脏的输尿管部分切除术较合适.     

猪小肠粘膜下层治疗兔背部皮肤缺损的实验研究

目的运用猪小肠粘膜下层治疗日本大耳兔背部全层皮肤缺损.方法将冻干、灭菌过的SIS膜水合后覆盖日本大耳兔背部全层皮肤缺损,术后1周、2周、1月观察缺损皮肤修复的情况.结果猪小肠粘膜下层治疗治疗日本大耳兔背部全层皮肤缺损疗效满意（P〈0.05）.结论猪小肠粘膜下层可作为治疗皮肤缺损的支架材料.     

人乳腺癌细胞特异性多肽跨膜转导机制初步研究

目的:初步探讨人乳腺癌细胞MDA-MB-231特异性多肽PI的跨膜转导机制.方法:合成PI肽链,并在其N端进行FITC标记;探讨FITC-PI的跨膜转导与MHC-Ⅰ表达的关系,利用MHC-Ⅰ抗体阻断MDA-MB-231细胞和Calu-1细胞表面MHC-Ⅰ抗原,聚合酶链反应-序列特异性引物法进行基因分析;探讨FITC-P...