TACE联合CIK治疗原发性肝癌方案分析

目的探讨对原发性肝癌患者进行肝动脉栓塞化疗（TACE）联合CIK细胞免疫治疗方案的临床价值。方法选取治疗效果明显的1例原发性肝癌病例进行分析,患者于TACE术后2周开始序贯完成3个疗程经肝动脉CIK细胞回输及3个疗程经外周静脉CIK细胞回输,同时对患者各项检查指标进行持续监测。结果 18个月后复查结果显示肝功能未见明显异常,AFP正常,HBV-DNA拷贝降低转阴,机体免疫水平提高,肝脏CT未见复发。结论 TACE联合CIK细胞免疫治疗是一种新型的原发性肝癌综合治疗方法,它在杀伤肿瘤细胞的同时还能明显降低乙肝病毒体内含量,提高机体免疫力,从而阻断致癌因素,对抑制肝癌的复发和转移具有重要意义。     

甲肝IgM抗体诊断试剂盒在甲肝病毒抗原检测中的应用

将HAV IgM-Ab诊断试剂盒用HAV-Ag标准品调控灵敏度后,用于检测HAV-Ag,并比较快速检测法和常规过夜法两种检测方法的测定效果,以选择在甲肝疫苗生产中,抗原检测的合适方法.经过调控灵敏度后,抗HAV IgM诊断试剂盒完全可以用来检测HAV-Ag.并可以正确评价HAV-Ag滴度,HAV感染性滴度.适用于甲肝疫苗的检定工作.     

OPV疫苗感染性滴度检测的影响因素分析

目的探索影响口服脊髓灰质炎减毒活疫苗(OPV)感染性滴度检测的主要因素。方法采用96孔组织培养板微量细胞病变法进行感染性滴度检测,分析对检测有影响的各种因素。结果细胞浓度在5～40万个/ml时,所测滴度差异不明显;当细胞浓度在2.5万个/ml时,所测滴度明显降低;33.5℃及35.5℃温度下检测结果之间差异无统计学意义(P>0.5);290～300代细胞所测滴度均低于150～160代细胞所测滴度,差异有统计学意义(P<0.001)。PolioⅡ+Ⅲ多克隆血清对Ⅰ型病毒的交叉抑制值为0.120±0.116;PolioⅠ+Ⅲ多克隆血清对Ⅱ型病毒的交叉抑制值为0.161±0.179;PolioⅠ+Ⅱ多克隆血清对Ⅲ型病毒的交叉抑制植为0.227±0.145。结论温度及细胞浓度不是影响检测结果的敏感因素;细胞代次是影响检测结果的敏感因素;分型滴度检测时不同血清之间交叉抑制值的高低,取决于病毒与血清之间的比例,血清含量越高,交叉抑制值越大。     

用重组SFV初免、MVA加强的方法诱导SIV特异性免疫应答

一般情况下 ,猴子在单独接种表达猴免疫缺陷病毒ｍａｃＪ5株 (ＳＩＶｍａｃ)ｅｎｖ、ｇａｐ ｐｏｌ、ｎｅｆ、ｒｅｖ和ｔａｔ基因的经修饰的痘苗病毒Ａｎｋａ ｒａ(ＭＶＡ)和重组西门利克森林病毒 (ＳＦＶ)后 ,抗体应答、Ｔ细胞增殖应答和细胞毒性Ｔ细胞应答 (ＣＴＬ)都较弱 ,甚至无法测出。作者采用另一种免疫方法 :即先接种ＳＦＶ ＳＩＶｍａｃ两次 ,然后再用ＭＶＡ ＳＩＶｍａｃ加强免疫两次 ,不仅能诱生较强的抗体应答 ,还能增强Ｔ细胞增殖应答。　　选择ＳＩＶ血清阴性的健康食蟹猴 ,分四组进行免疫 :第 1组 4只猴分别在 0、3、6月肌肉…     

人乳腺癌细胞特异性多肽跨膜转导机制初步研究

目的:初步探讨人乳腺癌细胞MDA-MB-231特异性多肽PI的跨膜转导机制.方法:合成PI肽链,并在其N端进行FITC标记;探讨FITC-PI的跨膜转导与MHC-Ⅰ表达的关系,利用MHC-Ⅰ抗体阻断MDA-MB-231细胞和Calu-1细胞表面MHC-Ⅰ抗原,聚合酶链反应-序列特异性引物法进行基因分析;探讨FITC-P...     

新配方甲型肝炎灭活疫苗的安全性和免疫原性

法国ＰａｓｔｅｕｒＭé-ｒｌｅｕｘＣｏｎｎａｕｇｈｔ公司的甲型肝炎灭活疫苗Ａｖａｘｉｍ由甲型肝炎病毒（ＨＡＶ）ＧＢＭ株制备，在成人中有较好的安全性和免疫原性。本研究中，对１８月龄～１５岁儿童接种２剂该疫苗，剂量为成人剂量的一半〔即８０抗原单位/0．5ｍｌ，加０．１５ｍｇＡＩ（ＯＨ）_3］，然后检测他们的血清阳转率和抗ＨＡＶ抗体几何平均浓度（ＧＭＣ），并观察局部和全身反应。将１８９名儿童按年龄分为三组：1８月龄～３岁４２人，４～８岁５９人，９～１５岁８８人。３岁以下年龄组行大腿肌肉注射，３岁以上行三角肌…     

乳腺癌特异性多肽介导的HSV-TK/GCV系统的构建及其靶向杀伤效应

目的:研究乳腺癌MDA-MB-231细胞特异性转导多肽PI介导的HSV-TK/GCV抗瘤系统对乳腺癌MDA-MB-231细胞的体外靶向杀伤作用。方法:以PCR从质粒pORF-HSV-TK中扩增目的基因PI-TK,克隆到原核表达载体pET-28a(+)中,构建pET-28a(+)-PI-TK载体,转化宿主菌,经IPTG诱导表达PI-TK融合蛋白,利用His-Tag对其进行纯化,SDS-PAGE和Western blotting鉴定PI-TK融合蛋白。将不同质量浓度的PI-TK融合蛋白与MDA-MB-231细胞共培养,联合更昔洛韦(ganci-clovier,GCV)作用后,倒置显微镜下观察细胞的形态变化,CCK-8法检测MDA-MB-231细胞的增殖。结果:成功构建了重组原核表达载体pET-28a(+)-PI-TK,获得纯化的PI-TK融合蛋白,SDS-PAGE及Western blotting鉴定PI-TK融合蛋白表达正确。单独PI-TK融合蛋白不影响MDA-MB-231细胞的形态和增殖,但PI-TK融合蛋白联合GCV能剂量依赖性靶向抑制MDA-MB-231细胞的增殖,200μg/ml PI-TK+10 mg/LGCV作用的抑制率达(68.9±7.57)%;PI-TK联合GCV抑制MDA-MB-231细胞的IC50值为152.64μg/ml。上述各作用对MDA-MB-435细胞均无影响(P<0.05)。结论:乳腺癌特异性转导多肽PI介导的HSV-TK/GCV抗瘤系统可靶向杀伤MDA-MB-231细胞。     

快速检测甲肝减毒活疫苗滴度方法的建立

目的　通过利用对甲肝病毒(HAV)RT -PCR产物的半定量分析建立快速检测甲肝减毒活疫苗滴度的方法,并比较该方法与细胞培养(CCID50 )检测法的相关性。方法　运用RT -PCR的方法,以保守的HAVVP3-VP1部分基因区为目标区对甲肝疫苗病毒进行核酸扩增,利用PharmaciaImageMaster○RVDS凝胶成像分析系统进行产物的半定量分析得出结果,并与常规细胞培养法所测感染性滴度(CCID50 )进行比较。结果　本检测方法比细胞培养法缩短了2 0余天,与细胞培养法的灵敏度相似,与细胞培养法结果的差异无统计学意义。结论　所建立的方法具有操作简便、快速的优点,有望替代细胞培养法作为用于检测甲肝减毒活疫苗滴度的常规方法。     

OPV疫苗糖丸在-20℃以下保存的稳定性

目的:考察口服脊髓灰质炎减毒活疫苗糖丸(OPV)在-20℃温度下保存的稳定性。方法:将存放在-20℃以下1999~2003年生产的疫苗糖丸样品各随机抽取10个批号,分别进行3价总病毒含量及I、II、III型分型病毒含量检测,根据检测结果,分析糖丸存放于-20℃以下1~5年其病毒含量及其变化。结果:糖丸存放于-20℃以下2年,其3价总病毒含量及I、II、III型分型病毒含量4个指标均达到2000年版《中国生物制品规程》的要求;-20℃以下保存5年,3价总病毒含量及I、II、III型分型病毒含量(log CCID50/粒)平均值分别为5.59±0.12、5.57±0.08、5.02±0.24及4.85±0.29;在3个型中,III型病毒含量下降值最多,I型次之,II型最少(P<0.01)。结论:口服脊髓灰质炎减毒活疫苗糖丸存放于-20℃以下1~5年的稳定性良好。     

丙型肝炎疫苗研究进展

HCV是引起慢性肝炎的主要病原之一,严重危害人类健康.据统计,在世界范围内约有1.7亿感染者[1].75%左右的HCV急性感染者转为慢性,其中10%～20%的慢性丙型肝炎患者发展至肝硬化,1%～5%发展为肝细胞癌[2].我国约有3800万人感染HCV,超过60%的HCV感染者可发展为慢性感染,而慢性HCV感染与肝硬化和肝细胞癌直接相关.在美国、澳大利亚等西方国家,慢性HCV感染已成为终末期肝病的首位病因.世界卫生组织评估东部地中海国家约有2.13亿HCV携带者,这个数字相当于美国和欧洲的总人数.有证据显示,基因型不同可影响抗病毒治疗的效果[3].目前首选的治疗方法仅40%～50%的感染者应答良好,彻底清除病毒者更为鲜见.因此丙型肝炎疫苗的研制已成为国际研究热点之一.