地塞米松对小鼠颅颌面部发育的影响

目的:探讨妊娠期注射地塞米松对胎鼠颅颌面部发育的影响。方法:将孕鼠随机分为实验组和对照组,妊娠11.5d实验组给予50mg/kg地塞米松腹腔注射,对照组给予相同剂量的生理盐水。于妊娠14.5、15.5、16.5d取胚胎,记录腭裂数、活胎数及死胎数,切取胎头在体视学显微镜下作头颅颌面组织侧貌分析,采用H-E染色和免疫组织化学显色观察腭部形态变化及骨形态蛋白(BMP)-2和甲状腺转录因子(TTF)-2在鼻中隔软骨中的表达情况。结果:实验组出现明显颅颌面部畸形,下颌体缩短,上颌突角、下颌突角后缩;免疫组织化学检测显示BMP-2和TTF-2在腭裂胎数鼻中隔软骨中持续表达;妊娠14.5～16.5d实验组鼻中隔软骨细胞中BMP-2表达水平依次增强,且同时间实验组表达低于对照组;对照组鼻中隔软骨TTF-2表达呈现波动性,妊娠15.5d表达最高,而实验组在妊娠16.5d仍持续增高,数值高于对照组。结论:地塞米松抑制颅颌面部骨骼发育;BMP-2和TTF-2在鼻中隔软骨持续表达提示其与分化转归相关。     

CT表现为T1期高、低量化混合性磨玻璃样变肺癌肺内周围区淋巴结清扫意义

目的 探讨术前高分辨CT下表现为50％≤实性成份＜90％的高量化和10％≤实性成份＜50％的低量化混合性磨玻璃样变(mixed ground glass opacity,mGGO)的T1期(肿瘤最大径d≤3 cm)原发性周围型非小细胞肺癌的淋巴结转移规律.方法 回顾性分析2015年1月至2016年6月于大连医科大学附属大连市中心医院胸外科就诊,术前高分辨CT表现为混合型磨玻璃样变,并行肺癌根治术患者60例的临床资料.其中男24例,女36例,年龄34～76 (58.40±7.93)岁.根据CT表现,测量计算并分为50％≤实性成份占比＜90％的高量化组和10％≤实性成份占比＜50％的低量化组,共两组.统计分析清扫淋巴结的数目和转移情况.结果 60例患者共清扫淋巴结1038枚,平均每例患者18.54枚.其中转移淋巴结共计40枚,总体转移率为3.85％.mGGO高量化组转移率为6.80％;mGGO低量化组转移率为1.55％.本研究发现3例患者存在单纯的第12和(或)13和(或)14组淋巴结转移,检出率为5.00％.结论 CT表现为T1期混合性磨玻璃样变原发性周围型NSCLC,其淋巴结转移率与病灶内实性成份的占比以及肿瘤的病理类型有关.肺内周围区的第12、13、14组淋巴结病理活检有助于发现常规淋巴结清扫方式不能发现的单纯肺内淋巴结转移,对T1期原发性NSCLC的分期的准确划定和治疗方案的选择具有重要意义.     

公立医院转变发展方式实现科学发展的探索与思考简

探讨公立医院发展方式问题。总结分析实践经验,提出：公立医院要顺应改革大势,坚持公益性,不断深化医院体制改革,转变发展方式,持续提升医院管理和医疗服务水平,提升医院综合实力和创新发展能力,实现科学发展。     

和男同事出差之后

你有过与男同事出差的经历吗?你与他熟悉吗?相互了解吗?和他相处你是紧张还是随意?你对他有好感吗?你们行动一致吗?下次你是否还希望和他一起出差?     

1,25-维生素-D3体外诱导骨髓间充质干细胞向心肌样细胞分化的最适浓度

目的 探讨1,25-维生素D₃（1,25-vitamin-D₃）体外诱导骨髓间充质干细胞（BMSCs）向心肌样细胞分化的最适浓度。 方法 采用全骨髓贴壁法结合密度梯度离心法分离培养SD大鼠BMSCs,应用3、6、12、24 nmol/L 1,25-vitamin-D₃对第2代BMSCs进行定向诱导,倒置相差显微镜下动态观察细胞生长状况。运用流式细胞仪对BMSCs进行鉴定。应用免疫细胞化学、免疫荧光及Western blotting法检测诱导后4周的BMSCs原肌球蛋白（TPM）、间隙连接蛋白43（Cx43）、心肌肌钙蛋白T（cTnT）的表达情况。运用透射电子显微镜观察分化细胞与心肌细胞类似的超微结构。在诱导后1、2和4周这3个时间点,以Real-time PCR法检测细胞心肌早期转录因子GATA结合蛋白4（GATA4）、Nkx2.5的表达。 结果 1.倒置相差显微镜下观察,原代细胞培养72 h后,大部分细胞呈短梭形;培养1周后,细胞呈现出多样化的形态;诱导4周的BMSCs,相邻细胞间联系紧密,排列具有明显的方向性。不同浓度1,25-vitamin-D₃诱导后的BMSCs,其数量及形态存在差异。2.流式细胞术的鉴定结果显示,CD29、CD45、CD90的阳性表达率分别为97.4%、3.3%和91.4%。3.免疫细胞化学、免疫荧光及Western blotting法检测不同浓度1,25-vitamin-D₃诱导4周后的BMSCs均可见TPM、Cx43及cTnT的阳性表达,其中6 nmol/L组的表达均最高,而未诱导组细胞呈弱阳性或阴性表达,差异具有统计学意义（P＜0.05）。4.透射电子显微镜观察,细胞诱导培养至4周,胞质内可见较多平行排列的肌丝及线粒体、核糖体、粗面内质网等细胞器。5.Real-time PCR检测结果显示,GATA4及Nkx2.5基因于诱导后1周表达增强,2周表达减弱,4周表达增强;4个诱导组相比较,6 nmol/L组明显优于其他3组（P＜0.05）。 结论 1,25-vitamin-D₃可以诱导BMSCs获得心肌分化表型,其诱导分化最适浓度为6 nmol/L。     

针刺四神聪、风池穴对VD模型大鼠病理形态学及PTEN、Akt表达的影响*

摘要：观察针刺四神聪、风池穴对血管性痴呆（VD）大鼠海马区病理形态学及PTEN、Akt表达的影响,探讨针刺对VD治疗的潜在作用机制。方法：将Morris水迷宫试验筛选后75只SD大鼠随机分为5组（15只/组）,分别为正常组、假手术组、Pulsinelli四血管阻断法（4-VO）的VD大鼠模型组、手针组（毫针组）和电针组。造模成功7天针刺干预,手针组予四神聪穴、风池穴进行针刺干预,每次30 min;电针组选取相同穴位,连接电疗仪于同侧穴位,选取连续波,调节波幅大小以见到大鼠肢体微颤,留针30min;均每日1次,共干预3周。采用光镜观察各组大鼠海马组织病理形态学变化;采用RT-PCR技术检测各组大鼠海马区PTEN mRNA、Akt mRNA表达水平。结果：HE染色结果显示：正常组大鼠海马区神经细胞排列紧密,神经元形态规整,核仁清晰;假手术组各时间点大鼠海马区神经细胞排列较紧密,神经元形态尚规整,核仁清晰,散见少量凋亡小体和炎细胞;模型组各时间点大鼠海马区神经细胞排列紊乱,神经元形态欠规整,核仁不清晰,胶质细胞数目明显增多,可见大量神经元凋亡小体和炎细胞;经过手针和电针治疗后,大鼠海马区病理改变较模型组相应时间点有明显改善。主要表现为神经细胞排列较规整,核仁较清晰,胶质细胞数目有所减少,凋亡小体和炎细胞数量有所减轻。这种改变随治疗时间的延长表现更为明显。与正常组、假手术组相比较,模型组大鼠在治疗第7d、治疗第14d、治疗第21各时点PTEN mRNA均明显升高（P＜0.01）,Akt mRNA均明显降低（P＜0.01）;与模型组比较,手针组、电针组大鼠在治疗第7d、治疗第14d、治疗第21各时点PTEN mRNA明显降低（P＜0.05,P＜0.01）,Akt mRNA明显升高（P＜0.05,P＜0.01）;与手针组比较,电针组大鼠在治疗第14d、治疗第21d时点PTEN mRNA降低更为显著（P＜0.05）,在治疗第7d、治疗第14d、治疗第21d各时点Akt mRNA升高更为显著（P＜0.05）。结论：针刺四神聪、风池穴能够减轻血管性痴呆（VD）大鼠海马区炎症反应,改善病变程度,其机制可能与其下调PTEN mRNA表达、上调Akt mRNA表达有关。     

PFT-α与BMP-2联合诱导大鼠BMMSCs分化为心肌样细胞

目的探讨p53抑制剂(PFT-α)与骨形态发生蛋白2(BMP-2)联合诱导对骨髓间充质干细胞(BMMSCs)向心肌样细胞分化的影响。方法分离大鼠BMMSCs进行培养、传代及纯化,分别应用PFT-α、BMP-2及两者联合对第2代BMMSCs定向诱导,不加诱导剂为对照组。倒置显微镜下观察并记录对数增殖期细胞的形态变化;流式细胞计数法鉴定BMMSCs表面联合标记物;免疫组化法检测c Tn I、Cx43及TPM的表达;免疫荧光检测技术对c Tn I和Cx43进行荧光标记;透射电镜观察分化细胞的超微结构变化。结果经诱导后的BMMSCs以梭形为主,细胞体积变大。CD45、CD29和CD90的阳性率分别为0.3%、86.5%和84.7%。诱导组细胞的c Tn I、Cx43及TPM均呈阳性表达,对照组为阴性。诱导组细胞胞质内Cx43免疫荧光染色表达呈红色,c Tn I则呈绿色,胞核椭圆位于细胞中央,胞质内可见平行排列的肌丝、线粒体和糖原等。结论 PFT-α和BMP-2均可单独诱导BMMSCs分化为心肌样细胞,两者联合应用更加高效、安全。     

酶联合消化法培养小鼠主动脉平滑肌原代细胞

目的建立一种适用于体外有效分离培养小鼠主动脉血管平滑肌细胞的技术方法。方法分离主动脉,用优化的酶联合消化法获取主动脉平滑肌细胞,用形态学法、免疫细胞化学法鉴定。结果该方法所分离的主动脉平滑肌细胞生长旺盛,细胞活性好,7～9d后细胞总量可达到5×105个/瓶,细胞纯度可达85%以上,细胞呈长梭形、放射状、束状生长,平行排列呈峰谷状,免疫荧光显示胞浆内α-SMA蛋白表达阳性。结论该酶联合消化法可在体外短时间内获取数量可观、高纯度的主动脉平滑肌细胞。     

广西农村居民慢性肾脏病流行病学调查

目的:了解广西农村居民慢性肾脏病(CKD)流行情况及危险因素,为做好CKD防治工作提供有力依据。方法:采用分层多级随机抽样方法,对广西18～74岁农村居民进行CKD抽样调查。被调查者均接受问卷调查,检测尿白蛋白/肌酐比率、血尿(离心后尿沉渣显微镜检查)和肾脏B超,结果异常者3个月后进行复查。用国人校正的简化MDRD公式计算估计肾小球滤过率(eGFR)。同时调查了CKD的相关危险因素。结果:广西农村居民白蛋白尿患病率5.35%,血尿患病率0.97%,肾结石患病率10.73%,肾功能下降率4.08%,CKD患病率9.47%。农村居民CKD危险因素依次肾结石、高血压、糖尿病、年龄、高尿酸血症、慢性扁桃体炎和HBsAg阳性。居民CKD知晓率6.27%。结论:农村居民CKD发病率分别为9.47%,居民CKD知晓率,CKD相关危险因素肾结石、高血压、糖尿病、年龄、高尿酸血症、慢性扁桃体炎和HBsAg阳性。