Effet of Mercuric Chloride and Cadmium Chloride on Gonadal Function and Its regulation in Sexually Mature Common Carp Cyprinus carpio

Gnadal function in fish,Cyprinus carpio was significantly affected by sublethal doses of mecuric chloride(HgCl2)and cadmium chloride(CdCl2)in chronic(45days)exposure,Parameters investigated were nonesterified(NE)and esterified(E)cholesterol of ovary, liver and serum and ovarian 3β-Hydroxysteroid and 17β-Hydroxysteroid dehydrogenase enzyme activity and servum and pituitary gonadotropin(GtH)levels.Both the pollutats were able to reduce the hypothalamic extract(HE)or gonadotropin releasing hormone (GnRH)induced pituiteray GtH release in vitro.Short term(96h)exposure of the fish to the polltants had no significant effect on the gonadal founction.In addition to the deleterious effect of pollutants on the gonadal steroidogenesis and pituitary gonadotropin release,using [4-^14C] cholesterol as a tracer it was found that for 45 days exposure,HgCl2 had an adverse effect on the transport of cholesterol from circulation to ovary.     

镉诱导牡蛎金属硫蛋白的初步研究

以CdCl_2作为诱导剂,用不同浓度的CdCl_2对牡蛎进行诱导培养。对MT提取液进行紫外吸收和原子吸收测定,结果表明牡蛎金属硫蛋白的合成随着CdCl_2浓度的升高而增大,至0.005mmol·L~(-1)达到最大值,每克湿组织能获得10μgMT,诱导效果显著。     

镉与镍对豚鼠肺泡巨噬细胞膜的联合毒性

镉与镍对豚鼠肺泡巨噬细胞膜的联合毒性周晓张侠１刘世杰江泉观（北京医科大学劳动卫生学教研室，１生物数学与生物统计学教研室，北京１０００８３）为研究镉，镍的联合细胞毒性，观察，比较了不同浓度的氯化镉，氯化镍单独或联合与豚鼠肺泡巨噬细胞共同孵育后，培养上清...     

镉染毒小鼠网织红细胞微核流式细胞术研究

目的通过流式细胞术(FCM)检测外周血微核方法，研究氯化镉(CdCl2)染毒小鼠的外周血含微核网织红细胞率，评价流式细胞术在微核检测中的应用价值及探讨氯化镉的致突变作用。方法采用转铁蛋白受体CD71荧光抗体和碘化丙啶(PI)染色，并以疟原虫感染小鼠外周血红细胞为微核模式生物调校流式细肛仪．检测10～60mg／kg环磷酰胺染毒和50～400μg／kg氯化镉染毒对小鼠的外周血含微核网织红细胞率的变化。结果不同剂量环磷酰胺染毒小鼠的外周血含微核网织红细胞率和骨髓含微核网织红细胞率均明显高于对照组小鼠，且二者之间相关性良好(r=0．955)；不同剂量氯化镉染毒小鼠外周血含微核网织红细胞率未见明显升高。结论FCM测定外周血含微核网织红细胞率可替代传统显微镜检查骨髓含微核网织红细胞率用于遗传毒性评价；在本研究条件下未观察到氯化镉有明显的诱导小鼠外周血含微核网织红细胞形成的作用。     

佛波酯等3种促癌物诱导BALB/c 3T3细胞骨桥素基因表达升高

目的探讨促癌物佛波酯(12-O-tetradecanoylphorbol-13-acetate,TPA),岗田酸(okadaic acid,OA)和氯化镉(cadmium chloride,CdCl2)在促进BALB/c 3T3细胞转化过程中对骨桥素基因(OPN)转录表达的影响.方法以N-甲基-N′-硝基-N-亚硝基胍(MNNG)为启动剂,TPA,OA和CdCl2分别为促癌剂,建立BALB/c 3T3细胞转化模型.采用小鼠毒理基因芯片分别检测促癌物处理过程中和转化细胞集落中的基因表达变化,同时采用实时RT-PCR验证部分细胞样本的OPN基因表达.结果基因芯片检测结果显示,3种促癌物在作用过程中均能诱导OPN基因表达升高,其中TPA处理后4 h,7 d和17 d,OA处理后3,7 d和24d,CdCl2处理后3 d和7 d,OPN基因的表达较对照组增强;同时在促癌物诱导形成的9个转化细胞集落中,有8个转化集落检测到OPN基因表达升高.此外,实时RT-PCR检测也验证了OPN基因的表达升高.结论OPN基因与TPA,OA和CdCl2的促癌作用存在密切联系.     

体外研究牛磺酸对氯化镉致DNA损伤的保护作用

[目的]通过体外实验初步探讨牛磺酸对氯化镉所诱导DNA损伤遗传毒性的保护作用机制。[方法](1)单细胞凝胶电泳技术检测DNA损伤;(2)体外清除自由基检测。实验分5组:①阴性对照组,②氯化镉组:分别加入终浓度为10、20、40μmol/L的氯化镉。③同时处理组:终浓度为100mmol/L的牛磺酸与氯化镉10、20、40μmol/L同时加入。④后处理组:先加入终浓度为10、20、40μmol/L的氯化镉,45min后加入100mmol/L的牛磺酸。⑤预处理组:先加入终浓度为100mmol/L的牛磺酸,45min后加入10、20、40μmol/L的氯化镉。所有的处理组均培养72h。[结果]10μmol/L氯化镉即可引起细胞DNA损伤,并随着氯化镉浓度的增加而加重,呈一定的剂量-反应关系。用100mmol/L牛磺酸预处理组和同时用牛磺酸和氯化镉处理组的DNA损伤率明显低于相应的单纯氯化镉组(P<0.05),而羟自由基清除率明显高于单纯氯化镉组(P<0.05);牛磺酸预处理组的DNA损伤率明显低于同时处理组(P<0.05),而羟自由基清除率也明显高于同时处理组(P<0.05)。后处理组DNA损伤率与单纯氯化镉组比较差异无显著性。[结论]牛磺酸在体外对氯化镉引起的DNA损伤有预防作用。     

氯化镉诱发肾上腺皮质细胞凋亡与蛋白激酶B活力的关系

目的 了解氯化镉(CdCl2)诱发肾上腺皮质细胞凋亡的发生与蛋白激酶B(protein kinase B,PKB,又称Akt)活力变化的关系.方法 体外分离培养豚鼠肾上腺皮质细胞,以蛋白因子添加素V和碘化丙啶联合标记,流式细胞仪检测,观察CdCl2诱发细胞凋亡的特征;采用免疫沉淀-化学发光法测定PKB/Akt活力.结果 6.25～100.00 μmol/L剂量CdCl2处理肾上腺皮质细胞2 h,细胞凋亡发生率随剂量增加而增加,25.00 μmol/L及更高剂量组与对照组比较,差异有统计学意义(P＜0.01);回归分析表明,CdCl2剂量与凋亡发生率呈剂量-效应关系.以50.00 μmol/L CdCl2处理细胞,细胞凋亡发生率随时间的延长而增加,CdCl2作用15 min～4h,平均凋亡率为5.58%-73.08%,其中1、2、4h时间点与对照相比,差异有统计学意义(P＜0.05);CdCl2处理时间与凋亡发生率呈时间-效应关系.6.25～200.00 μmol/L剂量CdCl2处理30 min,显示CdCl2可引起肾上腺皮质细胞PKB/Akt表达降低,在一定剂量范围内呈线性关系.结论 CdCl2诱发肾上腺皮质细胞凋亡的同时引起细胞内PKB/Akt表达水平的降低.     

错配修复基因在氯化镉致16HBE细胞转化中作用

目的 探讨氯化镉诱发人支气管上皮(16HBE)细胞系恶性转化过程中错配修复基因hMSH2和hMLH1的mRNA和蛋白动态变化情况.方法 用反转录-聚合酶链反应(PT-PCR)和免疫组织化学(SP法)检测16HBE细胞、氯化镉恶性转化16HBE细胞系不同阶段(第5,15,35代细胞及成瘤细胞)hMSH2基因和hMLH1基因的mRNA和蛋白的表达情况.结果 随着转化代数的增加,hMSH2基因mRNA和蛋白的表达逐渐降低,至第35代细胞后表达明显下降(P<0.01);而hMLH1基因的mRNA和蛋白表达水平在氯化镉恶性转化16HBE细胞过程中无明显变化差异(P>0.05).结论 错配修复基因hMSH2表达水平的下调可能是镉化物分子致癌的重要机制.     

镉对HEK 293细胞线粒体损伤作用

目的 探讨线粒体在镉诱导人胚胎肾细胞(HEK 293)凋亡中的作用.方法 分离HEK293细胞的线粒体,采用分光光度法检测线粒体膜通透性转运孔(MPTP)的开放程度;电镜观察线粒体的形态改变;荧光分光光度法测定线粒体膜电位(MMP)和活性氧(ROS)含量的变化;ATP酶、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)的活性及丙二醛(MDA)含量的测定.结果 随着CdCl2浓度的增加,MFTP开放程度增加,并且这种增加能被MPTP特异性的抑制剂环孢素A(CSA)所抑制.电镜观察发现线粒体染镉后肿胀变形;中、高浓度CdCl2处理组线粒体膜电位都显著下降(P＜0.05),ROS含量也显著增加(P＜0.05和P＜0.01).在高浓度组,Na -K -ATP酶、Ca2 -Mg2-ATP酶活性下降,MDA含量随Cdcl2处理浓度增高而增加,LDH、SOD、GSH-Px活性随CdCl2处理浓度增高而下降,差异均有统计学意义(P＜0.01).结论 CdCl2破坏线粒体结构,引起MPTP的开放,MMP的降低,ROS含量增加,引起多种与凋亡相关的应激性损伤的发生.     

低剂量氯化镉亚慢性染毒对大鼠精子运动功能的影响

[目的]应用计算机辅助精子分析(computer assisted sperm analysis,CASA)技术研究低剂量氯化镉(Cd-Cl2)亚慢性染毒对大鼠精子运动能力的影响. [方法]40只健康雄性SD大鼠分成4组,剂量分别为0(生理盐水)、0.1、0.2、0.4 mg/kg·bw,腹腔注射染毒,每周染毒5 d(次),共染毒8周,实验结束颈椎脱臼处死,用扩散法收集大鼠附睾尾精子制成精子悬液.1:9稀释液后甩CASA仪测定反映精子活率、精子运动能力及运动方式的各项参数. [结果]各剂量组的精子活率间差异无统计学意义(P>0.05).高剂量组的快速运动精子、中速运动精子、低速运动精子百分比与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05).高剂量组的VAP、VSL值与对照组比较均降低,差异有统计学意(P<0.05).高剂量组的BCF与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05).LIN随染毒剂量增加而降低(r=-0.399,P<0.05).STR、ALH、ELON在各组间的差异无统计学意义(P>0.05). [结论]0.4 mg/kg·bw的氯化镉染毒可以引起大鼠精子运动功能的下降.