镉致成骨细胞增殖、分化及矿化损伤的预后效应

[目的]探讨镉染毒和染毒中止后成骨细胞增殖、分化及矿化等生物学功能的改变。[方法]采用混合酶消化法,分离sD大鼠颅盖骨成骨细胞,在5％CO2、37℃条件下培养24h后,持续镉染毒组以不同浓度的氯化镉（0～2．000μmol／L）持续染毒72h;间断镉染毒组以同样浓度的氯化镉染毒48h后,更换成无镉培养液继续培养24h,以噻唑蓝（MTT）法测定细胞增殖能力改变,用对硝基苯磷酸二钠盐（PNPP）偶氮法检测碱性磷酸酶（ALP）活性。同时,成骨细胞培养7d后,以0．500μmol／L氯化镉持续作用3—13d,然后分别停止作用10、8、6、0d,采用茜素红S进行矿化结节染色并计算面积以观察镉暴露中止后成骨细胞矿化能力损伤的恢复情况。[结果]氯化镉可明显抑制成骨细胞增殖、ALP活性及矿化能力。间断镉染毒组在停止作用24h后,成骨细胞的增殖、分化仍然明显低于对照组（P〈0．05）,与持续作用组比较没有明显改善。同样,间断镉染毒组在停止作用不同时间后,成骨细胞矿化结节数量和面积仍然明显低于对照组（P〈O．05）,与持续作用组相比没有明显恢复。[结论]镉暴露中止一定时间后,镉对成骨细胞的影响作用仍明显存在,表现为对成骨细胞增殖、分化及矿化能力的持续抑制。     

ERK信号转导通路在CdCl2诱导HEK293细胞低剂量兴奋效应中的作用

目的 探讨ERK信号转导通路在CdCl2诱导HEK293细胞低剂量兴奋效应过程中的作用.方法 以0、0.0005、0.005、0.05、0.5、5、50和500μmol/L浓度的氯化镉(CdCl2)分别染毒HEK293细胞12h和24h;在染毒前分别用ERK1/2抑制剂PD98059(100μmol/L)、U0126(...     

体外染镉对大鼠卵巢孕激素合成的影响及其机制

目的 研究镉对孕激素合成过程中类同醇激素合成急性调节蛋白(StAR)、细胞色素P450胆固醇侧链裂解酶(P450scc)基因表达的影响及其与环磷腺苷(cAMP)的关系,为研究镉对孕激素合成影响的分子机制提供科学依据.方法 未成年Wistar大鼠皮下注射孕马血清促性腺激(PMSG)100U,48 h后取出卵巢颗粒细胞体外培养,备用.(1)取备用细胞随机分成4组,染镉剂量分别为0、10、20、40μmol/L,孵化30 min后,放射免疫方法测黄体酮、cAMP含量,用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法 测P450scc、StAR的mRNA表达水平.(2)再取备用细胞随机分为3组,分别为空白对照组、40μmol/L CdCl_2、l mmol/L 8-Br-cAMP(cAMP类似物)+40 μmol/L,CdCl_2,培养2 h后,测黄体酮含量及P450scc、StAR的mRNA表达水平.结果 (1)不同剂量染镉组卵巢颗粒细胞孵育液中黄体酮含量明显下降,差异有统计学意义(P<0.01);随着染镉剂量的增加,cAMP含量逐渐减少;各染镉剂量组StARmRNA和P450scc mRNA表达强度均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.01).(2)加入1 mmol/L 8-Br-cAMP共同培养后,黄体酮含量增加,高于染镉(40 μmol/L)组和对照组.差异均有统计学意义(P<0.01);StAR mRNA和P450scc mRNA表达强度均高于40μmol/L染镉组,低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).结论 镉可通过直接和(或)间接途径影响孕激素合成过程StAR和P450scc的表达,进而干扰孕激素的合成;镉对细胞内cAMP的影响可能是其干扰StAR和P450scc基因表达的机制之一.     

驱动蛋白家族成员5A介导的溶酶体功能在镉神经毒性中的作用

目的 探讨驱动蛋白家族成员5A(kinesin family member 5A,KIF5A)介导的溶酶体功能损伤在镉神经毒性中的作用.方法 以原代培养的SPF级C57BL/6J小鼠皮层神经元为模型,分为对照组和镉暴露组.检测氯化镉暴露24h后皮层神经元的半数抑制浓度(IC50).进一步用1、2、3μmol/L氯化镉处...     

Nrf2对氯化镉所致大鼠睾丸和卵巢内质网应激的反馈调节作用

目的 探讨转录因子NF-E2相关因子2(nuclear factor erythroid 2-related factor 2,Nrf2)对氯化镉所致大鼠睾丸和卵巢内质网应激的反馈调节作用。方法 将48只SD大鼠随机分为对照组,氯化镉低、中、高剂量组,叔丁基对苯二酚(tert-butylhydroquinone, tBHQ)组,tBHQ+氯化镉低、中、高剂量组,共8组,每组6只。对照组、tBHQ组分别给予腹腔注射0.9%生理盐水、20 mg/kg体重tBHQ溶液;氯化镉低、中、高剂量组分别腹腔注射1.14、2.28、4.56 mg/kg体重氯化镉溶液;tBHQ+氯化镉低、中、高剂量组于氯化镉染毒前120 min先行腹腔注射20 mg/kg体重tBHQ溶液后,分别腹腔注射1.14、2.28、4.56 mg/kg体重氯化镉溶液。染毒48 h后处死动物,取睾丸、卵巢组织,采用RT-PCR和Western blot法测定Bip、PERK、Nrf2 mRNA和蛋白的表达水平。结果 与tBHQ组比较,tBHQ+氯化镉中剂量组大鼠睾丸Nrf2 mRNA和蛋白表达明显上调(F值分别为144.47、30...     

氯化镉抗雄激素样作用的Hershberger实验研究

目的研究氯化镉的抗雄激素样作用。方法将40只成年雄性Sprague-Dawley大鼠去势,随机分为阴性对照组,0.080、0.200、2.000 mg·kg-1氯化镉+丙酸睾酮(TP)组,氟他胺+TP组,每组8只。各组大鼠均皮下注射TP,剂量为0.4 mg·kg-1,连续染毒10 d。在此基础上阴性对照组经腹腔注射花生油,剂量为10 mL·kg-1;不同剂量氯化镉+TP组分别经腹腔注射0.080、0.200、2.000 mg·kg-1氯化镉(10 mL·kg-1);氟他胺+TP组给予50 mg·kg-1的氟他胺灌胃。最后一次给药24 h后经股动脉采血,处死动物,测雄性激素依赖器官的质量并计算脏器系数,采用放射免疫法检测血清睾酮水平。结果 2.000 mg·kg-1氯化镉+TP组大鼠体质量增长幅度明显低于阴性对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。与阴性对照组相比,氟他胺+TP组各雄性激素依赖器官的脏器系数及血清睾酮浓度降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论氯化镉在实验剂量下可能不具有抗雄激素样作用。     

镉铅汞对小鼠精子畸形试验的影响

本文采用精子畸形试验，观察了氯化镉、醋酸铜、氯化汞对小鼠生殖细胞的影响．结果表明，三种金属化合物在１／２ＬＤ５０和１／６ＬＤ５０剂量染毒小鼠中，观察到精子畸形增高，且呈剂量─—反应关系．提示镉、铅、汞对哺乳动物的生殖细胞具有潜在的诱变能力．     

氯化镉对小鼠免疫功能的影响

本实验观察氯化镉对小鼠免疫功能的影响。在小鼠免疫后不同时间一次灌胃１５ｍｇ／ｋｇＣｄＣｌ２时，对Ｄ２组ＤＴＨ有明显抑制作用。在不同剂量多次灌胃试验中，２．４ｍｇ／ｋｇ和４．８ｍｇ／ｋｇ组，镉对ＤＴＨ．ＰＦＣ和淋巴细胞转化均明显抑制作用，以上结果表明氯化镉对小鼠免疫功能有抑制作用。     

氯化镉对雄性生殖系统生理机能的影响

目的 探讨氯化镉对雄性生殖系统生理机能的影响。方法 采用职业流行病学调查与动物实验相结合的方法分析镉作业男工精液中的微量元素；40只小鼠随机分为4组：氯化镉3．5，7．0，14、0mg／kg实验组和蒸馏水对照组，灌胃染毒。观察睾丸的病理组织学改变，测定睾丸细胞DNA含量和睾丸中微量元素含量。结果 接触组作业男工精液中镉含量明显高于对照组(P＜0．01)。实验组小鼠睾丸中铜含量增高(P＜0．05)。睾丸的超微结构出现改变，单倍体细胞DNA含量下降(P＜0．01)。结论 氯化镉可影响雄性生殖系统的生理机能，导致生育力下降。     

氯化镉染毒小鼠肝、肾、睾丸的病理组织学观察

镉及其化合物对生产环境和生活环境的污染以及对人类健康的危害 ,早已引起人们的重视。现将我们对氯化镉毒性的观察报告如下。1　材料与方法1 1　半数致死量的测定选用体重为 17～ 30 ｇ 的健康昆明种小鼠 6 0只 ,雌雄各半 ,随机分为 6组 ,每组 10只。以氯化镉溶液灌胃染毒 ,灌胃量为 10ｍｌ/ｋｇ体重。染毒剂量分别为 :37 5 ,75 ,15 0 ,30 0 ,6 0 0 ,12 0 0ｍｇ/ｋｇ。计算 3ｄ的ＬＤ50 。1 2　小鼠肾、睾丸重量及肝肾睾丸病理组织学观察选用体重为 18～ 2 5 ｇ的健康昆明种雄性小鼠4 0只 ,随机分为 4组 :3 5 ,7 0 ,14 0ｍｇ/ｋｇ氯化镉组…