汞或镉及其联合应用对去卵巢大鼠的雌激素样作用

目的探讨HgCl2和CdCl2对去卵巢大鼠的雌激素样作用及不同剂量CdCl2对HgCl2雌激素样作用的影响。方法 SD大鼠行双侧去卵巢手术制备模型,按照分组,每天ip给予生理盐水(去卵巢模型对照组),雌二醇0.08mg·kg-1(阳性对照组),HgCl20.04,0.20和1.00mg·kg-1;CdCl20.08,0.40和2.00mg·kg-1;以及HgCl2+CdCl2(0.04+0.08),(0.04+0.40)和(0.04+2.00)mg·kg-1组,连续3d。观察子宫增重作用、子宫内膜细胞有丝分裂指数(MI)和嗜银染色(Ag-NORs)颗粒数。结果与去卵巢模型对照组相比,HgCl21.00mg·kg-1组和CdCl22.00mg·kg-1组均能显著诱导去卵巢大鼠子宫增殖(P<0.05);HgCl20.04mg·kg-1能够明显提高CdCl20.08和2.00mg·kg-1组子宫脏器系数(P<0.05)。HgCl2和CdCl2组MI随着染毒剂量的增加而递增,且呈剂量-效应关系,除CdCl20.08mg·kg-1组外,其余各组与去卵巢模型对照组相比较,MI均有明显差异(P<0.05);与去卵巢模型对照组相比,HgCl20.04mg·kg-1能够提高CdCl20.08,0.40和2.00mg·kg-1组MI(P<0.05);HgCl21.00mg·kg-1和CdCl22.00mg·kg-1大鼠子宫内膜Ag-NORs颗粒数明显增高(P<0.05),HgCl20.04mg·kg-1能够明显提高CdCl20.08和2.00mg·kg-1组Ag-NORs颗粒数(P<0.05)。结论 HgCl21.00mg·kg-1和CdCl22.00mg·kg-1单独应用具有雌激素样活性;HgCl20.04mg·kg-1与不具有雌激素样活性的CdCl20.08mg·kg-1和0.40mg·kg-1联合应用表现出雌激素样作用。     

体外染镉对大鼠卵巢孕激素合成的影响及其机制

目的 研究镉对孕激素合成过程中类同醇激素合成急性调节蛋白(StAR)、细胞色素P450胆固醇侧链裂解酶(P450scc)基因表达的影响及其与环磷腺苷(cAMP)的关系,为研究镉对孕激素合成影响的分子机制提供科学依据.方法 未成年Wistar大鼠皮下注射孕马血清促性腺激(PMSG)100U,48 h后取出卵巢颗粒细胞体外培养,备用.(1)取备用细胞随机分成4组,染镉剂量分别为0、10、20、40μmol/L,孵化30 min后,放射免疫方法测黄体酮、cAMP含量,用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法 测P450scc、StAR的mRNA表达水平.(2)再取备用细胞随机分为3组,分别为空白对照组、40μmol/L CdCl_2、l mmol/L 8-Br-cAMP(cAMP类似物)+40 μmol/L,CdCl_2,培养2 h后,测黄体酮含量及P450scc、StAR的mRNA表达水平.结果 (1)不同剂量染镉组卵巢颗粒细胞孵育液中黄体酮含量明显下降,差异有统计学意义(P<0.01);随着染镉剂量的增加,cAMP含量逐渐减少;各染镉剂量组StARmRNA和P450scc mRNA表达强度均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.01).(2)加入1 mmol/L 8-Br-cAMP共同培养后,黄体酮含量增加,高于染镉(40 μmol/L)组和对照组.差异均有统计学意义(P<0.01);StAR mRNA和P450scc mRNA表达强度均高于40μmol/L染镉组,低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).结论 镉可通过直接和(或)间接途径影响孕激素合成过程StAR和P450scc的表达,进而干扰孕激素的合成;镉对细胞内cAMP的影响可能是其干扰StAR和P450scc基因表达的机制之一.     

氯化镉对人全血细胞程序外DNA合成的影响

背景与目的:进一步明确镉对人类细胞DNA 的损伤效应以及对损伤修复的干扰作用。材料与方法: 利用简化人全血细胞检测法研究了 CdCl2诱导人全血细胞(主要是淋巴细胞和单核细胞参与反应)程序外 DNA 合成 (unscheduled DNA synthesis,UDS)的能力及其对该细胞经 N-甲基-N'-硝基-亚硝基胍(MNNG)或紫外线(UV)处理后DNA 修复合成的影响。结果: 0.1～10 μmol/L的CdCl2单独作用,细胞DNA 修复合成前体物3H-TdR的掺入量与镉浓度量呈高度正相关的剂量-效应关系,其中10 μmol/L剂量组与对照组相比差异有显著性;CdCl2在对人全血细胞UDS无明显诱导的剂量水平下即可使MNNG作用后DNA的修复合成受抑;与之相反, 1 μmol/L CdCl2与UV共同作用对人全血细胞UDS的诱导存在明显的协同作用。 结论: 较高浓度的镉对DNA 具有损伤作用;而在较低浓度下,镉干扰DNA修复过程的作用较明显。上述直接和间接的遗传毒作用可能是镉致癌的机制之一。     

驱动蛋白家族成员5A介导的溶酶体功能在镉神经毒性中的作用

目的 探讨驱动蛋白家族成员5A(kinesin family member 5A,KIF5A)介导的溶酶体功能损伤在镉神经毒性中的作用.方法 以原代培养的SPF级C57BL/6J小鼠皮层神经元为模型,分为对照组和镉暴露组.检测氯化镉暴露24h后皮层神经元的半数抑制浓度(IC50).进一步用1、2、3μmol/L氯化镉处...     

Nrf2对氯化镉所致大鼠睾丸和卵巢内质网应激的反馈调节作用

目的 探讨转录因子NF-E2相关因子2(nuclear factor erythroid 2-related factor 2,Nrf2)对氯化镉所致大鼠睾丸和卵巢内质网应激的反馈调节作用。方法 将48只SD大鼠随机分为对照组,氯化镉低、中、高剂量组,叔丁基对苯二酚(tert-butylhydroquinone, tBHQ)组,tBHQ+氯化镉低、中、高剂量组,共8组,每组6只。对照组、tBHQ组分别给予腹腔注射0.9%生理盐水、20 mg/kg体重tBHQ溶液;氯化镉低、中、高剂量组分别腹腔注射1.14、2.28、4.56 mg/kg体重氯化镉溶液;tBHQ+氯化镉低、中、高剂量组于氯化镉染毒前120 min先行腹腔注射20 mg/kg体重tBHQ溶液后,分别腹腔注射1.14、2.28、4.56 mg/kg体重氯化镉溶液。染毒48 h后处死动物,取睾丸、卵巢组织,采用RT-PCR和Western blot法测定Bip、PERK、Nrf2 mRNA和蛋白的表达水平。结果 与tBHQ组比较,tBHQ+氯化镉中剂量组大鼠睾丸Nrf2 mRNA和蛋白表达明显上调(F值分别为144.47、30...     

氯化镉抗雄激素样作用的Hershberger实验研究

目的研究氯化镉的抗雄激素样作用。方法将40只成年雄性Sprague-Dawley大鼠去势,随机分为阴性对照组,0.080、0.200、2.000 mg·kg-1氯化镉+丙酸睾酮(TP)组,氟他胺+TP组,每组8只。各组大鼠均皮下注射TP,剂量为0.4 mg·kg-1,连续染毒10 d。在此基础上阴性对照组经腹腔注射花生油,剂量为10 mL·kg-1;不同剂量氯化镉+TP组分别经腹腔注射0.080、0.200、2.000 mg·kg-1氯化镉(10 mL·kg-1);氟他胺+TP组给予50 mg·kg-1的氟他胺灌胃。最后一次给药24 h后经股动脉采血,处死动物,测雄性激素依赖器官的质量并计算脏器系数,采用放射免疫法检测血清睾酮水平。结果 2.000 mg·kg-1氯化镉+TP组大鼠体质量增长幅度明显低于阴性对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。与阴性对照组相比,氟他胺+TP组各雄性激素依赖器官的脏器系数及血清睾酮浓度降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论氯化镉在实验剂量下可能不具有抗雄激素样作用。     

氯化镉对裸鼠皮下移植人肝癌SMMC-7721细胞的抑制作用及其对线粒体酶的影响

目的：研究氯化镉对裸鼠皮下移植人肝癌SMMC-7721细胞的抑制作用及对线粒体乳酸脱氢酶（LDH）、ATP酶活性的影响,阐明氯化镉抑制肿瘤生长的机制。方法：建立人肝癌裸鼠皮下荷瘤模型,分别腹腔注射生理盐水（阴性对照组）、5-氟尿嘧啶（阳性对照组）、氯化镉0.5、1.0和2.0 mg.kg^-1(氯化镉组),10 d后测定荷瘤体积、脏器指数和血清ALT、AST水平及荷瘤组织线粒体LDH、ATP酶的活性。结果：与阳性对照组比较,氯化镉0.5、1.0和2.0 mg?kg-1组肿瘤抑制率增加,但差异无统计学意义（P>0.05）;各组脏器指数变化不明显,其中氯化镉各剂量组肾脏指数高于阳性对照组（P<0.05）;与阴性对照组比较,氯化镉各剂量组ALT水平及LDH酶活性显著降低(P<0.05),0.5和1.0 mg.kg^-1组AST水平显著降低（P<0.05）;1.0和2.0 mg.kg^-1组Ca ²⁺ -Mg ²⁺ -ATPase活性与阴性对照组比较差异具有统计学意义(P<0.05),0.5和2.0 mg.kg^-1组Na⁺-K⁺-ATPase活性与阳性对照组比较差异具有统计学意义（P<0.05）。结论：氯化镉可能干扰线粒体能量代谢,并通过线粒体途径抑制肿瘤生长。     

氯化镉对小鼠骨髓间充质干细胞微核率和染色体畸变率的影响

背景：氯化镉对骨髓间充质干细胞遗传方面影响的研究暂无报道。目的：观察化学毒性物质氯化镉对骨髓间充质干细胞微核率和染色体畸变率的影响。方法：贴壁培养小鼠骨髓间充质干细胞细胞株,显微镜下观察空白对照组及氯化镉诱导组骨髓间充质干细胞的形态学变化,微核实验检测两组微核率,染色体分析检测两组染色体畸变率。结果与结论：显微镜下观察,空白对照组细胞呈成纤维细胞样贴壁生长,胞体透亮,折光性强;氯化镉诱导组细胞呈凸起回缩,细胞变小、变圆,贴壁不牢,悬浮细胞增多。与空白对照组比较,氯化镉诱导组骨髓间充质干细胞微核发生率和染色体畸变率均显著增加（P〈0.05）。提示氯化镉可引起小鼠骨髓间充质干细胞遗传物质的损伤。     

正常细胞与镉转化细胞抑制消减cDNA文库构建

目的 构建正常人支气管上皮细胞(16HBE)与氯化镉诱导转化16HBE细胞间差异表达基因的消减cDNA文库.方法 以16HBE为驱动子,氯化镉诱导转化16HBE细胞为检测子,应用抑制性消减杂交(SSH)方法构建cDNA文库,经2次消减杂交和2次PCR后,将巢式PCR产物插入载体,随机挑选克隆进行鉴定.结果 得到纯度高及完整性好的总RNA和mRNA,并扩增出良好的双链cDNA,cDNA与接头的连接效率＞25％,最终使差异表达基因得到富集;经蓝白菌落筛选,获得1 200余个白色阳性克隆;随机挑选50个白色克隆进行PCR扩增,显示96％克隆均有100 ～ 600 bp的插入片段,这些片段可能是差异表达基因cDNA片段,提示用SSH法及T/A克隆技术有效构建了两细胞株间差异表达基因的消减cDNA文库.结论 成功创建正常16HBE细胞与镉转化16HBE细胞差异表达基因消减cDNA文库.     

藏边大黄对大鼠肾功能的影响

有关藏边大黄Rheum emodi的肾保护作用鲜有报道。作者研究了该植物甲醇提取物的水溶(W-S)和水不溶(W-INS)部位对氯化镉、氯化汞、重铬酸钾和庆大霉素诱导的大鼠肾毒性的作用及对正常大鼠肾功能的影响。在对各种模型进行的试验中,Wistar大鼠均分为4组。第1组为正常对照组,仅服赋