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目的建立用于检测黄病毒属的TaqMan探针荧光定量RT-PCR方法。方法从GenBank中检索黄病毒属代表株的全基因序列,通过DNAstar进行序列比对和blast进行保守序列搜索和分析,用Beacon Designer 7.0软件进行引物和TaqMan探针设计,以乙脑毒株MB090509 RNA为模板,优化反应条件并应用于现场蚊虫标本检测。结果确定黄病毒属TaqMan探针荧光定量RT-PCR反应条件为:45℃15 min,95℃10 min,95℃10 s→54℃45 s,40次循环,引物和探针终浓度为200 nmol/L。灵敏度为常规RT-PCR方法 100倍,检出限2.9×10-3噬斑形成单位(PFU)/mL,与甲病毒属、东南亚十二节段RNA病毒属、布尼亚病毒属均无交叉反应。从161份现场蚊虫标本中检测出11份阳性标本,经病毒分离、测序均被证实为乙脑病毒。结论本研究建立的黄病毒属TaqMan探针荧光定量RT-PCR方法具有广泛应用价值。 相似文献
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目的调查广州市居民亚健康及其与广州市居民饮用水选取之间的关系,为有关部门制定相关政策提供参考依据。方法针对调查目的与要求设计调查问卷,问卷内容包括广州市居民亚健康及其各组成因子的调查,也包括个人一般情况、与健康有关的饮用水知识及其知晓情况等。随机抽取广州市10个区的966位居民进行问卷调查,并对有效问卷877份调查数据采用SPSS13.0软件进行统计分析。结果调查发现,与饮水种类选取有关的因素分别为:性别、年龄、学历、职业、收入、居住地、吸烟、饮食习惯、体育锻炼、工作压力、饮食、第三者性生活和熬夜等(P<0.05)。广州市居民饮用水种类的选取不同与亚健康发生率之间具统计学意义(P<0.05),其中选自来水者其亚健康发生率为85.2%,而选活化水者其亚健康发生率为55.6%。在对各饮用水种类分层的亚健康因子分析结果显示,不管选择何种饮用水,感觉疲劳、尤其活动后与用脑后疲劳的亚健康因子评分最高,表明发生亚健康的可能性大。除感觉耳鸣之外,各饮用水种类选取与其他健康因子的亚健康评分之间均有统计学差异(P<0.05),其中选自来水者其各亚健康因子的亚健康评分均比较高,而选活化水者其各亚健康因子的亚健康评分相对较少。结论广州市居民亚健康的发生与饮用水种类的选取有关,选自来水者发生亚健康的可能性较大,而选活化水者其发生亚健康的可能性较小。 相似文献
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目的通过观察体外培养人卵巢癌细胞在灵芝三萜干预后多耐药蛋白的表达,探讨灵芝三萜增强化疗药物疗效,减低药物不良反应的机制。方法体外培养人卵巢上皮癌细胞HO-8910,分为灵芝三萜高剂量组(200 ng/mL)、中剂量组(20 ng/mL)、低剂量组(2 ng/mL)和空白对照组,荧光定量和蛋白印迹检测细胞ABCB1mRNA和蛋白的表达。加入顺铂共培养后,MTT检测细胞凋亡率。结果 (1)ABCB1 mRNA表达灵芝三萜高剂量组为19.019 7±0.161 7,中剂量组为22.660 7±0.066 6,低剂量组为24.809 2±0.136 2,空白对照组为29.321 9±0.112 3,灵芝三萜高剂量组、中剂量组、低剂量组与空白对照组间比较,差异均有统计学意义(P=0.000)。(2)ABCB1蛋白表达灵芝三萜高剂量组为0.08±0.01,中剂量组为0.11±0.01,低剂量组为0.13±0.01,空白对照组为0.14±0.01,灵芝三萜高剂量组、中剂量组、低剂量组与空白对照组间比较,差异均有统计学意义(P=0.000)。(3)加入顺铂共培养后,细胞凋亡率灵芝三萜高剂量组为0.730 9±0.444 8,中剂量组为0.720 9±0.435 1,低剂量组为0.698 9±0.421 1,空白对照组为0.060 5±0.015 5,灵芝三萜高剂量组、中剂量组、低剂量组与空白对照组间比较,差异均有统计学意义(P=0.001)。结论灵芝三萜可能通过影响ABCB1表达增强化疗药物疗效。 相似文献
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检索2008年至2018年的相关文章,发现运动可以预防或延缓阿尔茨海默病(AD)患者认知能力退化,改善患者精神症状和日常生活活动能力;但也有研究显示运动疗法对认知、精神症状、日常生活活动能力没有改善的作用。可能涉及多种作用机制,但仍有待进一步研究。 相似文献
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目的探讨环磷酰胺(CP)不同剂量、不同取材时间对NIH小鼠骨髓红细胞微核率的影响。方法对小鼠一次性腹腔注射不同剂量的CP(25、50、100mg/kg.BW)后,于不同时间(给药后12、18、24、36、48、72h)取材股骨制作骨髓涂片,观察CP对NIH小鼠骨髓红细胞微核率的影响。结果高、中、低3个剂量组的小鼠骨髓红细胞微核率与溶剂对照组相比较,其差异具有统计学意义(P〈0.05),且3个剂量组之间两两比较差异均有统计学意义(P〈0.05),并表现出明显的剂量-反应关系;不同取样时间对小鼠骨髓细胞微核率的影响具有统计学意义(P〈0.05)。本实验室条件下,给NIH小鼠一次性腹腔注射CP后12~48h股骨取材均可取得较高的微核率,其中以24h微核率最高。结论CP作为微核试验的阳性对照其剂量范围为50~100mg/kg.BW,给药后24h取材最佳,给药12~48h股骨取材均可获得较高的微核率。 相似文献
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广州市居民饮水健康知识知信行调查 总被引:1,自引:0,他引:1
目的调查广州市居民对饮用水健康知识的认知、态度、行为与信念现状,为预防因健康饮用水知识缺乏而导致的疾病及不良健康状况提供一定的理论依据。方法针对调查目的与要求设计调查问卷,问卷内容包括个人一般情况、与健康有关的各饮用水知识及其知晓情况等。随机抽取广州市十区的966位居民进行问卷调查,并对调查数据采用SPSS13.0软件进行统计分析。结果有效调查问卷877份,应答率为90.79%。调查发现广州市居民对关于饮水常见知识的知晓率较高如对重金属对人体危害知识等回答正确率最高为98.52%,对饮水正确提法知晓率次之为78.34%,自来水发黄有味道原因知晓率为76.74%,利于饮水健康习惯知晓率为61.57%,而饮用水时最看重身体有益者占45.38%。然而居民对专业性较强的饮水知识,如饮水净化过程、喝水时间、活化水及矿融生态水知识知晓率普遍较低,分别为2.96%、7.18%、11.29%、10.83%。在调查的居民中,对饮水知识掌握情况比较好者占27.36%,认为掌握一般者则占55.53%,而掌握较差者占17.10%,对目前提供的饮水满意者为216人,满意度仅为24.63%,表明居民对饮水知识掌握情况一般及对提供的饮水满意度偏低。经调查和指导后,广州市居民对饮用水种类选取的意愿有所变化。选择矿泉水的意愿明显增加,增至首位;而选择纯净水及自来水的意愿则有所下降。结论广州市居民饮用水健康知识的知晓率普遍偏低,居民对饮水知识掌握情况一般及对提供的饮水满意度也偏低,加强饮水相关宣传教育有利于居民的健康饮水。 相似文献
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基孔肯雅病毒荧光定量PCR检测方法的建立 总被引:1,自引:0,他引:1
目的建立一种快速、敏感、特异的实时荧光定量PCR方法,检测基孔肯雅病毒。方法通过序列比对挑选出基孔肯雅病毒基因组中高度保守的序列,在此序列上设计引物及TaqMan探针,建立实时荧光定量PCR反应体系。结果经优化的荧光定量PCR方法有较好的灵敏度和特异性,对阳性对照质粒标准品的灵敏度可达21拷贝/μl,通过检测与传播媒介相似的流行性乙型脑炎病毒、黄热病毒、登革热病毒无交叉反应。结论该方法的建立在基孔肯雅热的疾病防控方面有较好的应用前景。 相似文献
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目的建立一种快速、敏感、特异的实时荧光定量PCR方法,用于裂谷热病毒的检测。方法通过序列对比在裂谷热病毒L基因保守区设计引物及Taqman探针,建立实时荧光定量PCR反应体系。结果经优化的荧光定量PCR方法有较好的灵敏度和特异性,对阳性对照质粒标准品的灵敏度可达37拷贝/μl,通过检测同为蚊媒传播的日本脑炎病毒、黄热病毒、登革病毒、基孔肯亚病毒无交叉反应。结论本方法的建立在国境口岸传染病的防控方面有较好的应用前景。 相似文献
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〔目的〕掌握中越河口—老街边境地区鼠携带汉坦病毒、钩端螺旋体和鼠疫杆菌的情况。〔方法〕2008年11月和2009年4月在云南省河口县和越南老街市的居民区用鼠笼捕鼠,取鼠肺、肝和肾脏组织。从鼠肺中提取RNA,用RT-PCR方法扩增汉坦病毒核酸;从鼠肝和肾脏中提取DNA,用PCR方法分别扩增鼠疫杆菌和钩端螺旋体核酸。〔结果〕在河口—老街边境地区捕获黄胸鼠、褐家鼠、大足鼠、小家鼠、臭鼳鼱和斯氏家鼠共198只,黄胸鼠数量最多,占总数的79.8%;从老街黄胸鼠鼠肺中检测到3份汉坦病毒核酸,阳性率为4.41%;从河口黄胸鼠、褐家鼠和大足鼠鼠肾中共检测到7份钩端螺旋体核酸,河口黄胸鼠钩端螺旋体核酸阳性率为11.36%;未检测到鼠疫杆菌核酸。〔结论〕中越河口—老街边境地区鼠传疾病病原有汉坦病毒和钩端螺旋体,应加强当地鼠传疾病的监测。 相似文献