去甲肾上腺素预处理对大鼠供心热休克蛋白70、一氧化氮及一氧化氮合酶表达的影响

目的:探讨去甲肾上腺素预处理是否可诱导心肌热休克蛋白70(HSP70)的合成,并研究其对供心一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)的影响,探讨去甲肾上腺素预处理心肌保护作用机制。方法:Wistar大鼠18只,分为2组:对照组(C,n=9),腹腔注射0.9%氧化钠注射液0.5 mL,24 h后取离体心脏灌注(Histidine-tryptophan-ketoglutarte,HTK)心脏保护液,4℃保存3 h后建立Langendorff离体心脏灌注模型,灌注(Krebs-Henseleit,K-H)液2 h;实验组(E,n=9)腹腔注射重酒石酸去甲肾上腺素(溶于0.9%氯化钠液中)3.1μmol/kg(0.53 mg/kg),腹腔注射24 h后取离体心脏,处理方法同C组。测定心肌HSP70、NO、NOS的含量以及相关生化指标并做统计学处理比较。结果:HSP70含量E组较C组明显增高(P<0.01),NO、NOS的含量E组较C组明显增多(P<0.01),生化指标E组明显优于C组。结论:去甲肾上腺素预处理能诱导供心心肌组织HSP70、NO、NOS高表达,其对供心具有明显的保护效应,并且其促进心肌NO、NOS的表达,这可能是去甲肾上腺素预处理发挥供心保护作用的机制之一。     

钙预处理对未成熟心肌细胞凋亡与凋亡相关蛋白的影响

目的探讨Ca^2＋预处理对未成熟心肌细胞凋亡和凋亡相关蛋白的影响。方法实验于2000年6月至2001年12月在武汉大学人民医院心血管外科完成。日本长耳大白兔12只,雌雄不限,14~21 d,体重230~300 g。按随机数字表法分为2组,每组6只。缺血-再灌注组（I/R组）：常规建立Langendorff模型,灌注重碳酸氢盐缓冲液（Krebs-Henseleit,KH）20 min,停灌45 min,复灌120 min;钙预处理组（CP组）：建立Langendorff模型,灌注KH液20 min后无钙KH液灌注45 s,反复3次,KH液灌注5 min,停灌45 min,复灌120 min。采用凋亡细胞原位标记和半定量分析检测心肌细胞凋亡率,琼脂糖凝胶电泳检测DNA片段梯,Western blot法检测bcl-2、bax和fas的表达。结果 CP组的心肌细胞凋亡率低于I/R组（4.53%±1.22%vs.12.30%±2.12%,t=7.780,P=0.000）。CP组琼脂糖凝胶电泳检测的DNA片段梯与I/R组比较明显减弱（光密度值：56460±1640 vs.135212±3 370,t=51.460,P=0.000）。I/R组bcl-2表达与CP组比较明显减少（光密度值：13217±1 770 vs.31790±1 018,t=22.280,P=0.000）,I/R组bax（光密度值：30 176±1025 vs.7954±730,t=43.260,P=0.000）和fas（光密度值：29 197±1 233vs.8140±867,t=34.220,P=0.000）表达与CP组比较均明显增高。结论 Ca^2＋预处理能影响bcl-2、bax和fas的表达,可减少未成熟心肌细胞凋亡。     

急性心肌梗死合并心源性休克手术治疗六例

目的总结急诊冠状动脉旁路移植术（CABG）救治急性心肌梗死（AMI）合并心源性休克（CS）患者的早期临床结果和经验,以评估手术疗效。方法自2006年10月至2008年10月中国海洋大学附属青岛市市立医院共对6例急性心肌梗死合并心源性休克患者施行急诊CABG,其中男4例,女2例;年龄62-78岁（68.3±7.9岁）;从发生休克距开始手术时间为1-7 h（4.1±3.1 h）;冠状动脉狭窄90%以上病变支数1-3支（2.5±1.3支）。1例采用非体外循环（off-pump CABG）技术,5例采用体外循环心脏停跳（on-pump CABG）技术,心肌保护采用顺行性灌注结合经冠状静脉窦逆行灌注心肌保护方式。结果每例患者平均移植血管3支（1-4支）,安装主动脉内球囊反搏（IABP）3例。1例患者术后第3 d死于循环衰竭合并肾功能衰竭,病死率16.67%（1/6）,5例治愈出院。围手术期发生呼吸功能不全2例,急性肾功能不全1例。出院3个月后随访,心功能分级（NYHA）Ⅲ级3例,Ⅱ级2例;1年后随访心功能Ⅲ级1例,Ⅱ级2例,Ⅰ级2例。结论急诊CABG可以有效提高急性心肌梗死合并心源性休克患者的生存率。     

酸性HEPES-KH液对离体未成熟心肌的作用

目的 观察不同pH值HEPES-KH复灌液对离体未成熟心肌的影响.方法 建立Langendorff离体灌注模型,分为2组:缺血/再灌(I/R,n=8),用pH 7.4 HEPES-KH液灌流20 min,缺血60min,恢复灌注30min;酸性灌注组(E,n=8),用pH7.4HEPES-KH液灌流20min,缺血60min后,应用pH 6.8、7.1和7.4 HEPES-KH液顺次灌注5、5、20 min.以血流动力学指标、生化指标作为观察指标.结果 E组与I/R组比较,左心室功能恢复、三磷酸腺苷含量(ATP)(0.93±0.12比0.56±0.04,P＜0.01)、超氧化物歧化酶活性(183.47±9.72比120.17±6.21,P＜0.01)、心肌线粒体Ca2+-ATP酶活性(16.74±1.42比6.78±0.64,P＜0.01)和心肌线粒体合成ATP的能力(105.37±9.51比50.83±4.75,P＜0.01)明显增强,在心肌含水量(74.56±1.68比86.20±2.33,P＜0.01)、丙二醛含量(1. 97±0.17比2.88±0.32,P＜0.01)、肌酸激酶(64.56±4.69比88.48±5.86,P＜0.01)和乳酸脱氢酶漏出率漏出率(96.41±6.57比128.42±9.80,P＜0.01)、心肌细胞内Ca2+含量(2.25±0.28比4.48±0.74,P＜0.01)和心肌线粒体Ca2+含量(36.10±4.05比68.29±6.90,P＜0.01)明显减少.结论 复灌初期应用梯度酸性复灌液对离体未成熟心肌具有明显保护作用.

Abstract：

Objective To study the protective effects of different pH HEPES-KH reperfusate solutions on immature myodium. Methods The isolated Langendorff perfused model from immature rabbit hearts was established. The rabbits in ischemia/reperfusion (I/R) group were perfused with pH7.4HEPES-KH solutions preischemia and postischemia. In experimental (E) group, pH 6. 8, pH 7. 1 and pH 7. 4 HEPES-KH solutions were perfused for 5, 5 and 20 min postischemia, respectively. The hemodynamics and biochemistry were tested. Results The left ventricular function was significantly improved, adenosine triphosphate (ATP) content (0. 93 ±0. 12 vs 0. 56 ±0. 04,P ＜0. 01 ), superoxide dismutase activity ( 183.47 ±9. 72 vs 120. 17 ± 6. 21, P ＜ 0. 01 ), Ca2+ -ATPase activity of mitothondia ( 16. 74 ± 1.42 vs 6. 78 ± 0. 64, P ＜ 0. 01 ), ATP activity of mitochondria ( 105.37 ± 9. 51 vs 50. 83 ± 4. 75, P ＜ 0. 01 ) were significantly increased in E group as compared with those in I/R group. Myocardial water content (74. 56 ± 1.68 vs 86. 20 ±2. 33 ,P ＜0. 01 ), malondialdehyde content ( 1.9710. 17 vs 2. 88 ±0. 32,P ＜0. 01 ), dehydrogenase (64. 56 ± 4. 69 vs 88. 48 ± 5. 86, P ＜ 0. 01 ) and creatine kinase leakage (96. 41 ±6.57 vs 128.42 ±9.80,P＜0.01), myocardial cell Ca2+ content (2.25 ±0.28 vs 4.48 ±0.74,P＜0.01) and mitochondrial Ca2+ content (36. 10 ±4.05 vs 68.29 ±6.90,P＜0.01) in E group were reduced as compared with those in I/R group. Conclusion pH paradox might be one of important mechnisms for immature myocardial I/R injury, and acidic perfusate, at the beginning of reperfusion, might attenuate pH paradox and ameliorate functional recovery on isolated immature rabbit hearts.     

大鼠外周血单个核细胞体外向内皮细胞诱导分化时的表型变化

背景:内皮祖细胞在贴壁分化过程中其干细胞标记以及内皮细胞表型的变化过程将有助于了解内皮祖细胞的分化特性.但日前还未找到区别于成内皮细胞特异性的细胞标记.目的:观察大鼠外周血单个核细胞外分化为内皮细胞的过程中干细胞标志物以及内皮细胞表型的变化.设计、时间及地点:细胞观察实验,2004 06/2008-12在青岛市市立医院心脏外科实验室完成.材料:抽取雄性SD大鼠外周血,应用Ficoll 密度梯度离心的方法获得单个核细胞.方法:单个核细胞体外培养于纤连蛋白处理的培养皿中,同时应用血管内皮生长因子和碱性成纤维细胞生长因子诱导,使之向内皮细胞转化. 主要观察指标:以免疫组织化学方法检测细胞CD31、CD34、Flk-1、vWF在第1～7大的表达.结果:贴擘细胞的0D31、CD34、FIk-1、vWF在不同时段呈不同程度的表达.干细胞标志物CD31、CD34在培养的第2天开始表达,第4天最强,以后逐渐弱,第6天消失.而Flk-1在第3天开始表达,以后逐渐增强,第7天时最强.vWF表达是逐步出现的,第7天时表达为100%.结论:大鼠外周血干细胞向内皮祖细胞分化的过程中,干细胞标志物逐渐消失,内皮细胞的表型逐步出现.     

非心脏缺血预处理对未成熟心肌和心肌间质保护作用的研究

目的 :研究非心脏缺血预处理对未成熟心肌和心肌间质的保护作用。方法 :建立动物离体心脏 L angendorff灌注模型 ,分为 4组 :1缺血 /再灌注 （I/R,n=6 ） ,离体心灌注 15 min转为工作心 15 min;2心脏缺血预处理组 （IPC,n=6 ） ,离体灌注 15 min转为工作心 15 m in,缺血 5 m in/再灌 5 min各 2次 ;3双下肢缺血预处理组 （DL- IPC,n=6 ） ,反复 3次阻断双下肢血流 5 min/松开 5 m in,建立离体心脏 L angendorff灌注模型 ,灌注 15 min转为工作心 15min;4肾缺血预处理组 （K- IPC,n=6 ） ,反复 3次阻断左肾动脉 5 m in/放开 5 min,建立离体心脏 L angendorff灌注模型 ,灌注 15 min转为工作心 15 min。然后各组全心缺血 45 min,恢复灌注 15 m in改为工作心 30 m in。以左室功能恢复、心肌含水量、血清肌酸激酶 （CK）和乳酸脱氢酶 （L DH）漏出率、心肌组织 ATP和丙二醛 （MDA）含量、超氧化物歧化酶 （SOD）活性、心肌羟脯氨酸 （HP）含量及血清内皮素 （ET）含量作为观察指标。结果 :IPC,DL- IPC及 K-IPC组左室功能恢复优于 I/R组 （P<0 .0 5 ） ,ATP含量、SOD活性、HP含量均优于 I/R组 （P<0 .0 1） ,心肌含水量低于 I/R组 （P<0 .0 5 ） ,MDA含量 ,CK,L DH漏出率及 ET含量均低于 I/R组 （P<0 .0 1）。结论 :非心脏缺血预处理与心脏缺     

手术治疗巨大心脏瓣膜病79例疗效观察

巨大心脏瓣膜病往往病程较长、心肌损害重、心功能差，常继发多脏器功能障碍及全身营养差、免疫力低下，手术死亡率高，属于危重患者。于2001年3月～2003年6月，我院对79例巨大心脏瓣膜病患者施行瓣膜置换术。现报告如下。     

去甲肾上腺素预处理对大鼠供心超氧化物歧化酶及丙二醛表达的影响

目的探讨去甲肾上腺素预处理对大鼠供心心肌细胞超氧化物歧化酶(SOD)及丙二醛(MDA)表达的影响。方法雄性Wistar大鼠18只随机分为对照组和实验组各9只,对照组腹腔注射生理盐水0.5 mL,24 h后取离体心脏灌注Histidine-tryptophan-ketoglutarate心脏保护液,4℃保存3 h后建立Langendorff离体心脏灌注模型,灌注Krebs-Henseleit液2 h;实验组腹腔注射重酒石酸去甲肾上腺素(溶于生理盐水)3.1μmol.kg-1(0.53 mg.kg-1),24 h后取离体心脏,处理方法同对照组。测定2组肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)漏出率以及心肌水含量(MWC)、SOD、MDA的水平。结果实验组SOD的水平较对照组明显升高(P<0.01);MWC、MDA含量、CK、LDH漏出率较对照组明显降低(P<0.01)。结论去甲肾上腺素预处理能促进SOD表达,降低MDA含量,对抗氧自由基损伤,从而发挥对离体大鼠供心心肌的保护效应。     

不同缺血预处理对未成熟心肌保护作用的研究

目的研究不同部位缺血预处理对未成熟心肌的保护作用,探讨未成熟心肌保护方法.方法采用经典心脏缺血预处理、双下肢缺血预处理及肾缺血预处理动物Langendorff灌注模型比较三种方法对缺血/再灌注(I/R)未成熟心肌损伤的效应.分为5组,正常对照组(NC,n=6)仅灌注KH液70min;缺血/再灌组(I/R,n=6)工作心15min后缺血45min,恢复灌注15min改为工作心30min;心脏缺血预处理组(IPC,n=6)工作心15min后反复2次缺血5min,再灌注5min,然后重复I/R组方法;双下肢缺血预处理组(DL-IPC,n=6)反复3次捆扎双下肢5min,松开5min,然后重复I/R组方法;肾缺血预处理组(K-IPC,n=6)反复3次阻断左肾动脉5min,放开5min,然后重复I/R组方法.以左室功能恢复、心肌含水量、血清肌酸激酶(CK)和乳酸脱氢酶(LDH)漏出率、心肌组织ATP和丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性及电镜作为观察指标.结果IPC、DL-IPC及K-IPC组在左室功能恢复方面优于I/R组(P＜0.05),在ATP含量、SOD活性及心肌超微结构方面均优于I/R组(P＜0.01),在心肌含水量方面低于I/R组(P＜0.05),在MDA含量、CK、LDH漏出率方面均低于I/R组(P＜0.01).结论缺血预处理对未成熟心肌具有明显保护作用,不同缺血预处理可诱发同等的心肌保护作用.     

热休克蛋白70表达对未成熟心肌和心肌间质的保护作用

目的 观察热休克蛋白70(HSP70)对未成熟心肌和心肌间质的保护作用.方法 健康新生长耳大白兔30只随机分为5组.对照组:腹腔注射生理盐水0.4 ml 24 h后取离体心脏,建立Langendorff离体心脏灌注模型;E4h、E12h、E24h、E48h组,腹腔注射去甲肾上腺素,4、12、24、48 h后分别取离体心脏,方法同对照组.测定心肌细胞中HSPT0含量、血流动力学指标、心肌含水量(MWC)、心肌肌酸激酶(CK)和乳酸脱氢酶(LDH)漏出率、三磷酸腺苷(ATP)含量、超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)含量、心肌组织羟脯氨酸(HP)含量、内皮素(ET)含量、心肌细胞内Ca2+含量、心肌线粒体Ca2+-ATPase活性及其Ca2+含量、心肌线粒体合成ATP能力[ATP]m,心肌超微结构.结果 E24h组与其他各组比较,HSPT0含量明显增高(P＜0.01),MWC(72.48±1.36)低于其他各组(P＜0.05),ATP含量(11.64±1.87)、SOD活性(235.83±12.30)、心肌线粒体Ca2+-AT-Pase活性(18.46±1.95)、[ATP]m(106.26±9.42),HP含量(6.45±1.53)优于其他各组(P＜0.01),MDA含量(1.17±0.12)、CK(57.38±4.75),LDH漏出率(37.28±3.26)、心肌细胞内Ca2+含量(2.54±0.34)、心肌线粒体Ca2+含量(38.37±3.61)、ET含量(76.84±10.37)低于其他各组(P＜0.01),心肌超微结构损伤较其他各组明显减轻.结论 腹腔注射去甲肾上腺素24 h后可诱导未成熟心肌HSP70高表达,一定量的HSP70表达可明显减轻未成熟心肌和心肌间质的缺血再灌注损伤.