组织工程血管基质的制备及保存

背景:为构建全生物化组织工程血管,制备及保存脱细胞血管基质.目的:制备组织工程血管基质,观察其保存于液氮中的可行性.方法:采用胰蛋白酶、低渗溶液、化学除垢剂法处理兔胸主动脉来制备组织工程血管基质,标本作大体、光镜及扫描电镜、透射电镜观察,并将制备的血管基质放入液氮中保存,3个月后取出作扫描电镜观察.结果与结论:经该法处理的兔血管细胞全部脱除,胶原纤维、弹性纤维无断裂,细胞外基质保持完好,液氮保存3个月后扫描电镜观察与新鲜基质无明显差别.提示酶、低渗溶液、化学除垢剂联合法是制备组织工程血管基质的较好方法,制备的血管基质可放入液氮中进行短期保存.     

不同细胞浓度种植于脱细胞血管基质上的细胞生长方式*☆

背景：对于组织工程血管而言,如何在平滑肌细胞层上成功获得致密的内皮细胞层是最为关键的。 目的：探索不同细胞种植浓度对构建全生物化组织工程血管的影响。 方法：先将不同浓度(5×105,5×107 L-1)猪血管平滑肌细胞种植在猪脱细胞血管基质上,培养3 d后再将不同浓度(5×105,5×107 L-1)内皮祖细胞接种在平滑肌细胞-血管基质复合体上,构建片状全生物化组织工程材料。 结果与结论：高浓度与低浓度平滑肌细胞在脱细胞血管基质上的细胞生长曲线相似,并且种植在孔板上和在脱细胞基质上的生长曲线亦相似,但低浓度组增殖较慢,覆盖率较低。细胞覆盖率由高到低的顺序为：高浓度内皮祖细胞+含高浓度平滑肌细胞的脱细胞基质>高浓度内皮祖细胞+含低浓度平滑肌细胞的脱细胞基质>低浓度内皮祖细胞+含高浓度平滑肌细胞的脱细胞基质>低浓度内皮祖细胞+含低浓度平滑肌细胞的脱细胞基质,且高浓度内皮祖细胞在脱细胞基质上可形成较为致密的细胞层,呈现出铺路石样生长方式。说明提高细胞接种浓度有利于其在材料表面快速形成致密的细胞层。     

猪主动脉脱细胞血管基质制备及保存

目的探讨脱细胞血管基质的制备和保存方法。方法采用酶、低渗溶液、化学除垢剂联合法处理猪胸主动脉制备脱细胞血管基质,标本行苏木精-伊红染色,大体、光镜及扫描电镜、透射电镜观察。并将标本放入液氮中保存,于保存1、2、3月分别取标本用20g/L戊二醛固定,扫描电镜观察。结果经该法处理的猪血管细胞全部脱除,胶原纤维、弹性纤维无断裂,细胞外基质保持完好。液氮保存后1、2、3月扫描电镜观察与新鲜标本无明显差别。结论酶、低渗溶液、化学除垢剂联合法是制备脱细胞血管基质的较好方法,制得的脱细胞血管基质可放入液氮中保存。     

不同细胞浓度种植于脱细胞血管基质上的细胞生长方式

背景：对于组织工程血管而言,如何在平滑肌细胞层上成功获得致密的内皮细胞层是最为关键的。目的：探索不同细胞种植浓度对构建全生物化组织工程血管的影响。方法：先将不同浓度（5×105,5×107L-1）猪血管平滑肌细胞种植在猪脱细胞血管基质上,培养3d后再将不同浓度（5×105,5×107L-1）内皮祖细胞接种在平滑肌细胞-血管基质复合体上,构建片状全生物化组织工程材料。结果与结论：高浓度与低浓度平滑肌细胞在脱细胞血管基质上的细胞生长曲线相似,并且种植在孔板上和在脱细胞基质上的生长曲线亦相似,但低浓度组增殖较慢,覆盖率较低。细胞覆盖率由高到低的顺序为：高浓度内皮祖细胞＋含高浓度平滑肌细胞的脱细胞基质〉高浓度内皮祖细胞＋含低浓度平滑肌细胞的脱细胞基质〉低浓度内皮祖细胞＋含高浓度平滑肌细胞的脱细胞基质〉低浓度内皮祖细胞＋含低浓度平滑肌细胞的脱细胞基质,且高浓度内皮祖细胞在脱细胞基质上可形成较为致密的细胞层,呈现出铺路石样生长方式。说明提高细胞接种浓度有利于其在材料表面快速形成致密的细胞层。     

自发性冠状动脉夹层合并二尖瓣重度关闭不全一例

患者女,43岁。因发作性胸闷、心悸3年,加重10余天入院。既往有癫痫病史3年,高血压病史2年。查体:血压140/94 mm Hg,口唇无紫绀,颈静脉无怒张,双肺呼吸音清,未闻及干湿性啰音,心率80次/分,心律不齐,可闻及早搏,心尖可闻及3/6级收缩期杂音,肝脾无肿大,双下肢无水肿。实     

猪主动脉脱细胞血管基质制备及保存

目的 探讨脱细胞血管基质的制备和保存方法.方法 采用酶、低渗溶液、化学除垢剂联合法处理猪胸主动脉制备脱细胞血管基质, 标本行苏木精-伊红染色,大体、光镜及扫描电镜、透射电镜观察.并将标本放入液氮中保存,于保存1、2、3月分别取标本用20 g/L戊二醛固定,扫描电镜观察.结果 经该法处理的猪血管细胞全部脱除,胶原纤维、弹性纤维无断裂,细胞外基质保持完好.液氮保存后1、2、3月扫描电镜观察与新鲜标本无明显差别.结论 酶、低渗溶液、化学除垢剂联合法是制备脱细胞血管基质的较好方法,制得的脱细胞血管基质可放入液氮中保存.     

PCI失败后的心脏外科急救

目的 总结经皮冠状动脉介入术(PCI)失败后的心脏外科急救经验.方法 2001～2008年,我科共有10例病人在行PCI时出现意外,其中1例行心包引流术,3月后行冠状动脉旁路移植术.2例行冠状动脉修补术,同期行冠状动脉旁路移植术.7例急症行冠状动脉旁路移植术(其中不停搏冠状动脉旁路移植术4例).结果 病人术后恢复顺利,心绞痛症状消失,无围术期心肌梗死,无脑出血或栓塞并发症.结论 PCI失败后应根据病人的实际情况选择不同的心脏外科急救措施进行急救.     

去甲肾上腺素预处理对大鼠心脏低温保存作用的实验研究

目的 探讨去甲肾上腺素预处理是否可诱导心肌热休克蛋白70(HSP70)的合成,研究其对离体大鼠心脏低温保存的保护作用,并探讨其发挥保护作用的可能机制.方法 雄性Wistar大鼠20只,随机分为2组:对照组(n=10),腹腔注射生理盐水0.5mL,24 h后取离体心脏灌注HTK心肌保护液,4℃保存3 h.然后行Langendorff离体心脏灌注,灌注Krebs-Hcnseleit(K-H)液10min.实验组(n=10),腹腔注射重酒石酸去甲肾上腺素(溶于生理盐水中)3.1umol/kg(0.53 mg/kg),腹腔注射24 h后取离体心脏,处理方法同对照组.心脏灌流结束后取材测定各组心肌HSP70表达,计算心肌肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)10min漏出率、心肌含水量(MWC)等相关生化指标并做统计学处理比较.观察心肌细胞先镜结构和电镜下的超微结构.结果 实验组心肌组织HSP70表达明显高于对照组(t=21.24,P<0.01),MWC、CK/LDH 10min漏出率均显著低于对照组(t=5.45～11.38.P<0.01).实验组心肌组织光镜下结构以及电镜下超微结构的损伤较对照组明显减轻.结论 去甲肾上腺素预处理能诱导心肌组织HSP70高表达,对离体大鼠心脏经过低温保存后具有明显的保护效应,能够明显保护心肌的结构和功能,减轻低温保存带来的心肌损伤.去甲肾上腺素预处理诱导HSP70高表达是其发挥心脏保护作用可能的机制之一.     

双下肢缺血预处理对未成熟心肌细胞凋亡和相关凋亡蛋白表达的影响

目的　探讨双下肢缺血预处理对未成熟心肌细胞凋亡和 B淋巴细胞瘤 /白血病 2蛋白 (bcl- 2 )、bcl- 2家族 bax蛋白、神经生长因子 fas蛋白表达的影响。方法　采用兔离体心脏灌注 (L angendorff)模型 ,2 4只幼兔随机分为 3组 ,对照组 (C,n=8) :仅灌注重碳酸氢盐缓冲液 (KH) 180 min,然后取标本 ;缺血 /再灌组 (I/ R,n=8) :灌注 2 0 min后 ,停灌 4 5 min,复灌 12 0 min;双下肢缺血预处理组 (DL IP,n=8) ,反复 3次阻断双下肢血流 5 m in/放开 5 min,建立L angendorff模型 ,然后重复 I/ R组缺血 /再灌方法。以凋亡细胞原位标记与半定量分析、琼脂糖凝胶电泳检测 DNA片段梯及 bcl- 2、bax、fas基因蛋白的表达作为检查指标。结果　凋亡细胞原位标记与半定量分析 :DL IP组与 I/ R组比较 ,心肌细胞凋亡率明显减少 ;琼脂糖凝胶电泳检测 DNA片段梯 :DL IP组与 I/ R组比较 ,光密度明显增强 ;DL IP组与 I/ R组比较 ,bcl- 2表达明显增多 ,bax、fas表达明显减少。结论　 DL IP通过影响 bcl- 2、bax、fas基因蛋白的表达减少心肌细胞凋亡。     

不同类型生物材料的心脏瓣膜应用及安全性评价（英文）

背景：组织工程心脏瓣膜是应用工程学和生命科学的原理和方法构建具有生理功能和生物活性的瓣膜替代物,但仍处于动物实验阶段。目的：总结常用的组织工程心脏瓣膜,对不同类型生物材料的心脏瓣膜应用的安全性进行评价。方法：以＂生物材料,心脏瓣膜,支架材料,综述文献,组织工程＂为中文关键词,采用计算机检索2000-01/2010-12相关文章。纳入与生物材料与组织工程心脏瓣膜研究相关的文章;排除重复研究或Meta分析类文章。结果与结论：共纳入生物材料与组织工程心脏瓣膜研究相关文献20篇。天然支架材料因其优越的生物相容性和三维空间构象,具有其他材料不可比拟的仿生性。合成可降解高分子材料具有良好的可控性和力学性能也备受研究者青睐,而将天然材料和高分子材料融合一体构建的复合支架材料为组织工程心脏瓣膜的研究提供了新的策略和方向,具有广阔的应用前景。