大蒜素诱导THP-1细胞凋亡的作用及机制

目的:探讨大蒜素对急性单核细胞白血病细胞株THP-1凋亡及凋亡基因Fas/FasL表达的影响。方法:采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定大蒜素对THP-1细胞增殖抑制率;AO/EB染色观察细胞凋亡形态;Annexin V-FITC/PI双染法流式细胞术(FCM)检测凋亡率的变化;FCM检测细胞凋亡率和细胞周期分布;免疫细胞化学法和Western blot观察细胞Fas、FasL蛋白表达。结果:MTT显示大蒜素能抑制THP-1细胞增殖,呈时间-剂量依赖性,72h中效浓度(IC50)为12.8mg/L。Annexin V-FITC/PI检测凋亡率随大蒜素浓度增加而增加。6.4、12.8mg/L大蒜素作用THP-1细胞72h后,FCM检测G0/G1期细胞比率明显上升,而S期比率明显下降,均出现凋亡峰,凋亡率分别为(22.93±2.93)%和(36.73±2.88)%,呈剂量依赖性,与对照组比较有显著差异(P<0.01)。在荧光显微镜下可区分早、晚期凋亡细胞、活细胞和坏死细胞。免疫组化显示大蒜素作用后Fas/FasL蛋白上调,主要分布在细胞浆和细胞膜。Western blot结果显示Fas/FasL蛋白表达量随大蒜素浓...     

非器质性呼吸困难诊治特点

随着现代社会身心压力的增大，非器质性呼吸困难患者明显增加。非器质性呼吸困难，是指患者有突出的呼吸困难主诉，但经系统检查找不出器质性病理改变的一种疾患，国际上称之为“医学上无法解释的呼吸困难“。此类患者一般多与睡眠、情绪、压力等因素相关，自述气短、呼吸困难而就医，症状感觉强烈，多次奔走于多家医疗单位，多次进行相应的检查均未见明显异常，浪费了大量的精力、物力。而临床医师多对此认识不足，当有效检查未能获得阳性发现时，临床医生更是束手无策，故而导致此类患者未能及时诊断、治疗，而患者的持续多次就诊，加重了患者的心理、精神、经济负担，有的甚至导致呼吸困难发作更频、更重，如此恶性循环。为提高临床医师对非器质性呼吸困难的认识及诊治水平，本文即对非器质性呼吸困难的临床特点及研究现状进行如下综述。     

自体造血干细胞移植治疗恶性血液病患者118例生存分析

目的：评价自体造血干细胞移植（autologous hematopoietic stem cell transplantation,auto-HSCT）治疗血液系统恶性肿瘤的疗效。方法：回顾性分析2007年3月至2013年7月接受auto-HSCT的118例血液病患者的临床资料,急性髓系白血病23例,恶性淋巴瘤69例,多发性骨髓瘤26例。对患者总生存率（overall survival,OS）、无病生存率（disease free survival,DFS）、复发率等进行统计。结果：除1例因感染未成功植入外,余117例患者均获得造血重建,中性粒细胞≥0.5×109个/L平均时间为9.8 d,血小板≥20×109个/L平均时间为12.3 d,中位生存时间为47.6月（1～80）月,3年OS及DFS分别为62.3%、54.3%,5年OS及DFS分别为49.0%、42.8%,累积复发率为28.0%,其中淋巴瘤预后较白血病、骨髓瘤较好（P＜0.05）。结论：auto-HSCT治疗急性白血病有效,能明显提高淋巴瘤及多发性骨髓瘤患者生存期。多发性骨髓瘤应个体化综合治疗。     

非霍奇金淋巴瘤自体外周血造血干细胞移植后继发急性单核细胞白血病一例

患者男,69岁,因确诊非霍奇金淋巴瘤(NHL)4年,皮肤瘀点、瘀斑1d于2012年9月15日入院.患者4年前因发现右颈部包块于我院行病理活组织检查,结果示:NHL,Ⅲ期A组(弥漫大B细胞型).先后予CHOD方案(环磷酰胺1000 mg×1d,表柔比星120 mg×1 d,长春地辛3mg×1d,地塞米松20mg×5 d) ×2次、CEOD方案(环磷酰胺1000 mg×1 d,依托泊苷100mg×3d,长春地辛3mg×1d,地塞米松20mg×5d)×1次、ECHOD方案(依托泊苷100mg×3d,环磷酰胺1000 mg×1d,表柔比星120 mg×1 d,长春地辛3mg×1d,地塞米松20mg×5 d) ×1次、MEOD方案(米托蒽醌8mg×3d,依托泊苷100mg×3 d,长春地辛3mg×1d,地塞米松20 mg×5 d)×1次.     

苦参碱诱导卵巢癌SKOV_3细胞凋亡的机制研究

目的探讨苦参碱(matrine,Mat)诱导SKOV3细胞凋亡及可能的作用机制。方法四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测不同浓度Mat(0.4、0.8、1.2、1.6、2.0g·L-1)处理24、48、72h对SKOV3细胞增殖作用;流式细胞仪检测细胞的凋亡率,RT-PCR检测Survivin mRNA表达,Western blot检测Sur-vivin和Caspase-3蛋白的表达。结果一定浓度范围的Mat对SKOV3细胞的增殖均有抑制作用,且呈量效和时效关系,24、48、72h的IC50分别为3.38、1.57、1.13g·L-1;0.8、1.6g·L-1Mat作用48h后SKOV3细胞凋亡率分别为(11.44±0.56)%、(17.68±0.98)%,与空白对照组(4.85±0.31)%比较差异具有显著性(P<0.05)。RT-PCR及Western blot分析表明药物处理后SKOV3细胞的Survivin mRNA和蛋白表达均明显下调,而Caspase-3蛋白表达增加(P<0.05)。结论 Mat能抑制卵巢癌SKOV3细胞的增殖,促进其凋亡,其作用机制可能与下调Survivin表达和提高Caspase-3活性有关。     

TKIs联合自体造血干细胞移植治疗成人费成染色体阳性急性淋巴细胞白血病的Meta分析

目的探讨酪氨酸激酶抑制剂(TKIs)联合自体造血干细胞移植治疗成人费城染色体阳性急性淋巴细胞白血病(Ph+ALL)的效果。方法通过计算机检索PubMed、Embase、Cochrane library、CNKI、万方、维普等数据库,检索时间均从建库至2019年6月30日,检索TKIs联合自体与异基因造血干细胞移植治疗成人Ph+ALL的临床对照试验。由2位研究者严格按照纳入标准与排除标准独立筛选相关文献、提取资料和评价纳入研究的方法学质量,采用RevMan 5.3软件进行Meta分析。结果全面检索得到892篇相关文献。最终纳入5篇文献,总共872例患者,其中自体造血干细胞移植(auto-HSCT)组136例,异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)组736例。Meta分析结果显示,自体组与异基因组相比,二者总体生存率(OR=1.14,95%CI:0.77～1.70,P=0.52)、无病生存率(OR=1.35,95%CI:0.56～3.28,P=0.50)、非复发死亡率(OR=0.42,95%CI:0.00～60.76,P=0.73),差异均无统计学意义。结论对于不能耐受异基因造血干细胞移植的Ph+ALL患者,TKIs联合自体移植可能使患者获益。     

配型相合同胞供者与单倍体相合造血干细胞移植治疗恶性血液病的单中心临床研究

目的 通过与配型相合同胞供者造血干细胞移植(MSD-HSCT)比较,评估单倍体相合造血干细胞移植(haplo-HSCT)治疗恶性血液病的安全性与疗效.方法 选取2011年1月至2015年5月于重庆医科大学附属第一医院血液内科行血缘相关造血干细胞移植(HSCT)的恶性血液病患者共计68例作为研究对象.按照接受血缘相关HSCT类型的不同,将其分为MSD-HSCT组(n=33)与haplo-HSCT组(n=35).所有患者疾病诊断均符合《血液病诊断及疗效标准》(3版)中相应恶性血液病的诊断标准,本研究纳入标准;患者诊断符合恶性血液病诊断标准;临床资料完整.排除标准:临床资料不全者.对两组患者及供者的一般临床资料进行回顾性分析;检测HSCT后两组患者造血干细胞的植入情况;比较两组患者HSCT方案、输入造血干细胞数及移植相关并发症发生率、总体生存(OS)率、无病生存(DFS)率、复发率、死亡率,并进行统计学分析.本研究遵循的程序符合重庆医科大学附属第一医院人体试验委员会所制定的伦理学标准,得到该委员会批准.两组患者性别构成比、预处理方案类型及干细胞移植类型、供者年龄等一般临床资料相比,差异均无统计学意义(P＞0.05).结果 ①MSD-HSCT组与haplo-HSCT组患者疾病种类分布,疾病状态分布,供、受者间血型匹配程度相比,差异均无统计学意义(x2 =2.313、2.809、3.420,P=0.678、0.094、0.331);但MSD-H SCT组患者年龄大于haplo-HSCT组,且差异有统计学意义(t=2.534,P=0.010).②MSD-HSCT组患者输入单个核细胞(MNC)数为(15.0±3.8)×108/kg,haplo-HSCT组为(16.3±4.2)×108/kg,两组相比,差异无统计学意义(t=1.277,P=0.206).MSD-HSCT组患者输入CD34+细胞数为(5.8±3.1)×106/kg,haplo-HSCT组为(6.8±2.7)×106/kg,两组相比,差异亦无统计学意义(t=1.062,P=0.294).③MSD-HSCT组患者中性粒细胞植活平均时间为(12.7±2.9)d,早于haplo-HSCT组的(16.1±4.8)d,且差异有统计学意义(t=3.510,P=0.001);MSD-HSCT组患者血小板植活平均时间为(12.7±4.9)d亦早于haplo-HSCT组的(16.1±7.9)d,且差异亦有统计学意义(t=2.094,P=0.016).本研究68例患者移植后均获得造血功能重建.MSD-HSCT组与haplo-HSCT组供、受者嵌合度均为完全嵌合.④两组患者急性移植物抗宿主病(aGVHD)累积发生率(18.2％比22.9％)、慢性移植物抗宿主病(cGVHD)累积发生率(39.3％比26.9％)、植入综合征(ES)发生率(0比2.9％)、出血性膀胱炎(HC)发生率(24.2％比45.7％)、血栓性微血管病变(TMA)发生率(3.0％比2.9％)、肝静脉阻塞性疾病(VOD)发生率(3.0％比2.9％)、毛细血管渗漏综合征(CLS)发生率(0比2.9％)、疱疹发生率(24.2％比14.3％)、细菌感染发生率(33.3％比20.0％)、真菌感染发生率(12.1％比20.0％)、巨细胞病毒(CMV)感染发生率(9.1％比5.7％)、继发肿瘤发生率(3.0％比0)、可逆性脑后部白质综合征(RPLS)发生率(0比2.9％)相比,差异均无统计学意义(x2=0.227、1.551、0.957、3.429、0.002、0.002、0.957、1.089、1.551、0.778、0.284、1.076、0.957,P=0.634、0.336、0.328、0.064、0.966、0.966、0.328、0.297、0.213、0.378、0.594、0.299、0.328).⑤截至2015年9月1日,MSD-HSCT组共计21例患者存活,本组患者的死亡率为36.4％,复发率为18.2％,平均生存时间为(34.7±4.2)个月,3年OS率及DFS率分别为60.6％、56.0％.haplo-HSCT组23例存活,本组患者的死亡率为34.3％,复发率为5.7％,平均生存时间为(27.3±3.2)个月,3年OS率及DFS率分别为61.9％、58.5％.两组患者的复发率、死亡率相比,差异均无统计学意义(x2 =2.543、0.032,P=0.111、0.858);两组患者平均生存时间比较,差异亦无统计学意义(t=1.537,P=0.129);两组患者3年OS率及DFS率比较,差异无统计学意义(x2=0.137、0.032,P=0.706、0.694).结论 恶性血液病患者接受MSD-HSCT后,造血重建时间早于接受haplo-HSCT者,但二者的OS率、DFS率、复发率、死亡率及移植物抗宿主病(GVHD)发生率相近.haplo-HSCT治疗恶性血液病的安全性及疗效与MSD-HSCT相似.     

含聚乙二醇环孢素注射液致过敏性休克1例分析

目的分析含聚乙二醇环孢素注射液致1例过敏性休克的原因,提示临床重视分析药物致敏成分。方法对1例重型再生障碍性贫血患者行造血干细胞移植过程中输注环孢素注射液过敏性休克原因进行诺氏评分与文献分析。结果诺氏评分量表评估为11分,考虑过敏反应“肯定”与环孢素注射液输注有关。结论含聚乙二醇成分的药物出现过敏反应一定要细致分析过敏反应原因,使用科学评判工具评价,一旦确认过敏反应与聚乙二醇相关,则需要警惕其他含聚乙二醇成分药物再次使用时可能致命的不良反应,需及时识别并立即处置,或使用其他不含该成分的药物替换。     

环状RNA circSP3（hsa-circ-0002642）促进肝细胞癌细胞增殖及迁移

目的 探讨环状RNA circSP3（hsa-circ-0002642）在肝细胞癌（HCC）中的表达及其对HCC细胞增殖及迁移的影响。方法 收集重庆医科大学附属第一医院肝胆外科2017年6月至2018年12月收治的42例HCC患者手术切除的癌组织和癌旁组织标本,采用实时定量PCR检测组织中circSP3的表达,分析癌组织中circSP3表达与患者临床病理学指标的关系。培养人HCC细胞系Hep-3B、Huh7、SMMC-7721、Bel-7402及人正常肝细胞系HL-7702,采用实时定量PCR检测细胞中circSP3的表达。使用circSP3过表达及干扰质粒分别转染Hep-3B和Huh7细胞后,采用细胞计数试剂盒-8（CCK-8）检测细胞增殖情况,Transwell法检测细胞侵袭和迁移能力,蛋白质印迹法检测上皮-间质转化（EMT）相关标志物波形蛋白、E-钙黏蛋白的表达。结果 HCC患者癌组织中circSP3的表达高于癌旁组织（P<0.01）,并且circSP3的表达与HCC肿瘤最大径及TNM分期呈正相关（P均<0.05）。circSP3在4种HCC细胞系中的表达均高于正常肝细胞系（P均<0.01）。circSP3过表达可以促进HCC细胞的增殖、侵袭和迁移（P<0.05、P<0.01）,而干扰circSP3表达则抑制HCC细胞的增殖、侵袭和迁移（P<0.05、P<0.01）。波形蛋白表达在circSP3过表达的HCC细胞中高于对照细胞（P<0.05）,而在干扰circSP3表达的HCC细胞中低于对照细胞（P<0.05）。E-钙黏蛋白表达在circSP3过表达的细胞中低于对照细胞（P<0.01）,而在干扰circSP3表达的HCC细胞中高于对照细胞（P<0.01）。结论 circSP3的异常表达与HCC肿瘤大小及TNM分期呈正相关,有助于评价病情及预后。circSP3能促进HCC细胞的增殖,并且可能通过促进EMT进程进而促进HCC细胞的迁移和侵袭。     

48例非霍奇金淋巴瘤患者自体外周造血干细胞动员采集的影响因素分析

目的 回顾性分析非霍奇金淋巴瘤患者自体外周造血干细胞动员采集过程中的影响因素.方法 2014 年1月至2016年8月,共有48例非霍奇金淋巴瘤患者在该院血液科行自体外周造血干细胞动员采集,对患者的年 龄、性别、疾病分期、诊断时是否骨髓侵犯、化疗次数及病程中是否复发等因素进行回顾性分析.结果 37例患 者(77.10%)干细胞动员采集成功,其成功率受疾病诊断到干细胞动员采集的间隔时间、化疗次数、前期化疗 (包含氟达拉滨)、复发,以及采集干细胞前的白细胞及血小板水平的影响.结论 拟行自体外周造血干细胞的 非霍奇金淋巴瘤患者,前期化疗次数不宜多,动员采集要尽早,尽量避免使用可能损伤干细胞的药物,需同时关 注患者外周血白细胞和血小板水平,来确定动员采集时机.