低氧及常氧条件下体外培养绒毛组织代谢足迹的变化

目的:探讨在1%氧浓度下及6%氧浓度下体外培养正常妊娠孕妇胎盘绒毛组织培养液中代谢足迹的变化。方法:选择正常妊娠孕妇27例,在胎盘边缘、中间、近脐带处取绒毛组织,分别在1%氧浓度下及6%氧浓度下培养96 h,采用高效液相色谱-质谱法检测培养液中代谢产物,观察不同氧浓度下培养的绒毛组织代谢足迹的变化。结果:1%氧浓度和6%氧浓度下分别取自同一胎盘边缘、中间、近脐带三点处胎盘绒毛组织代谢足迹比较,无统计学差异(P>0.05);1%氧浓度与6%氧浓度下培养的孕妇胎盘绒毛组织代谢产物比较,发现545个代谢物有统计学差异(P<0.05)。结论:代谢组学提供了从另一个角度研究胎盘功能的方法,应用严谨的实验技术和适当的统计学分析,能确定体外培养的胎盘组织在不同氧浓度下的代谢差异,从而研究与胎盘病理学相关的改变。     

Minimum dose of hCG to trigger final oocyte maturation and prevent OHSS in a long GnRHa protocol

This paper was aimed to study the minimum dose of human chorionic gonadotropin (hCG) to effectively trigger maturation of oocytes and prevent ovarian hyperstimulation syndrome (OHSS) in a series of hyper-responders treated with a long gonadotropin releasing hormone agonist (GnRHa) protocol. Six women at high risk of developing severe OHSS in a long GnRHa protocol were enrolled into this study. Serum hormone levels on the day of and after hCG administration, antral follicle count, oocyte retrieval number and quality were determined. In total, 6 women aged between 29 and 36 years and at risk of developing severe OHSS, received 2000 U hCG. Five of them were treated with coasting for 1 day and the rest one for 4 days. The mean number of oocytes collected was 19 (range 14-27) and the fertilization rate per collected oocyte was 72.81%. Of the 6 women in the study, only one cancelled embryos transfer and all embryos were frozen, and then she delivered two health boys on term in the sub-sequent frozen-thawed embryo transfer (FET) cycle. Pregnancies and births were achieved in 3 patients out of 5 in vitro fertilization-embryo transfer (IVF-ET) cycles. No woman developed moderate or severe OHSS. Triggering with 2000 U hCG is feasible to prevent OHSS in unpredicted hyper-responders undergoing IVF in a long GnRHa protocol.     

首例经自体颗粒细胞线粒体移植的双胞胎儿出生

1名37岁妇女，婚后有2次自然流产史，并发不孕症。来我院2次行体外受精和胚胎移植，由于胚胎质量差，均未妊娠。第3周期对患者的5个成熟卵子进行自体颗粒细胞线粒体移植。4个卵子做胞浆内单精子注射。经线粒体移植后的胚胎质量优于胞浆内单精子注射组。移植3个经线粒体移植后的胚胎，获3胎临床妊娠。妊娠5周时l例胚胎停育，其余2胎发育正常。患者在妊娠前后进行了5次丈夫淋巴细胞免疫治疗。妊娠30周患者因重度妊高征住院治疗，疗效不明显。遂于2003年8月6日妊娠32周时行剖宫产，娩出发育正常的男女2个新生儿。在新生儿病房治疗后健康出院。此为我国大陆地区首例经线粒体移植妊娠出生的胎儿。     

丝裂原活化蛋白激酶对佛波酯诱导滋养细胞MMP-9基因表达的影响

目的 探讨佛波酯(PMA)诱导细胞滋养层细胞(CTB)MMP-9基因表达的调控机制。方法 用细胞ELISA法测定CTB细胞的蛋白激酶活性变化；用反转录聚合酶链反应检测CTB中MMP-9的基因表达。结果 100nmol／L PMA能迅速激活CTB中丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)家族中细胞外信号调节蛋白激酶(ERK)、c-jun氨基末端激酶(JNK)以及p38 MAPK激酶的活性。100nmol／L PMA刺激CTB引起MMP-9 mRNA表达显著增加，能被ERK或p38 MAPK的特异性抑制剂所抑制。结论 ERK和p38 MAPK可能是PMA诱导CTB中MMP-9基因表达增加的重要调节物质。     

白细胞介素15在生殖领域的研究进展

白细胞介素15（IL-15）属于Th1相关性细胞因子，它首先由GRABSTEIN等在1994年从无血清培养基培养的猴肾上皮细胞系CV-1／EBVA的培养上清液中纯化而得，是一种能维持CTLL-2细胞系增殖的可溶性细胞因子。它具有广泛的生物学作用：刺激CTLL和PHA激活外周血B细胞增殖；刺激鼠抗原特异性T细胞（包括Th和Tc）的增殖；对人外周血T细胞具有化学趋化性；     

培养环境的温度变化与人MⅡ期卵母细胞纺锤体形态学变化的关系

目的:观察环境温度的改变对MⅡ期人卵纺锤体结构的影响.方法:40例非男性因素的不孕妇女,将常规体外授精后未受精的MⅡ期卵子置于室温(23～25℃)直至纺锤体消失.于纺锤体消失后,将卵子分成3个实验组:1组纺锤体消失后立即复温(n=8);2组纺锤体消失后室温下静置5 min再复温(n=6);3组纺锤体消失后室温下静置10 min再复温(n=6).卵子复温后5 min,10 min,2 h分别观察纺锤体的复现情况.结果:20个未受精的MⅡ期卵子置于室温下5 min内纺锤体均消失.1组中的8个卵子,2组中的6个卵子复温后再次观测到了MⅡ期纺锤体.3组中的6个卵子只有3个卵子再次出现了MⅡ期纺锤体.对照组的18个卵子放置于37℃恒温板上观察30 min,纺锤体均未见消失.结论:MⅡ期卵子纺锤体对环境温度的改变非常敏感.温度降低将导致纺锤体消失,随着时间的延长,纺锤体复现几率明显减少.     

第一极体不能精确定位人卵母细胞纺锤体

目的 观测人卵母细胞纺锤体的确切位置，从而指导今后的生殖医学临床工作。方法 应用纺锤体成像系统观测体外成熟及体内成熟组人卵母细胞纺锤体，测量卵子中心、纺锤体与第一极体之间形成的角度。比较两组结果的差异。结果 体外成熟组纺锤体与第一极体形成角度和体内成熟组存在显著差异(P=0．006)。结论 人卵母细胞的位置并不能准确定位卵母细胞纺锤体的位置。体外成熟组纺锤体与第一极体形成的角度要明显小于体内成熟组。应用纺锤体成像系统可以安全、有效地观察人卵母细胞纺锤体。     

7条印迹基因在人类种植前胚胎的表达

目的完善印迹基因在人类种植前胚胎的表达图谱。方法应用巢式RT-PCR技术检测7条印迹基因P57^KIP2、LIT1、TSSC3、GRB10、PEG3、ARHI、ZAC1在人类卵子和种植前胚胎中的正常表达。结果卵子和各期种植前胚胎、囊胚中均存在P57^KIP2、ZAC1的表达；LIT1自8细胞胚胎开始表达，持续至囊胚期；TSSC3于卵子及各期种植前胚胎中均未表达；4细胞、8细胞胚胎、囊胚及卵子中均可测到GRB10正常表达；除4细胞胚胎未见表达外，卵子和其余各期胚胎均可测得ARHI表达；Peg3表达于4细胞、8细胞胚胎和囊胚。结论除TSSC3外的其余6条基因均表达于种植前胚胎，有助于开展种植前遗传学诊断，为探讨印迹基因与辅助生殖、先天性印迹疾病以及肿瘤的关系提供理论依据。     

卵细胞质内单精子注射治疗不孕症34例临床总结

目的总结应用单精子卵细胞质内注射（ICSI）治疗不孕症的临床效果。方法对34对男性因素、原因不明、受精障碍不孕患者采用GnRHa长周期促排卵方案,给有第一极体的卵细胞行单精子注射。结果34例34个治疗周期中,1例因反应不良取消。取卵数378个,注射卵数317（83．9％）个,正常受精卵231个（72．9％）卵裂228（98．3％）个,良好胚胎99（43．4％）个,平均移植胚胎数36个,临床妊娠12例（移植周期妊娠率为36.4％）。结论ICSI是治疗男性因素、原因不明、受精障碍等因素引起不孕症的一种切实可行的方法。     

几种中药对大鼠垂体前叶细胞分泌泌乳素影响的实验研究

高泌乳素(PRL)血症可引起无排卵、不孕、月经紊乱、闭经甚至出现更年期症状,长期处于高 PRL 血症状态可致骨质疏松,我们利用大鼠垂体前叶细胞培养体系观察了芍药等9种中药对垂体前叶细胞分泌 PRL 的影响。材料与方法1 材料1.1 动物雌性 Wistar 系大鼠,体重180～250g,胎龄12～15周,日本德岛大学医学部实验动物中心提供。1.2 药物及试剂中药:芍药、甘草、仙茅、巴戟天、菟丝子、淫羊藿、肉苁蓉、熟地、枸杞子均由日本津村顺天堂制药株式会社提供的实验用药物粉末,粗提物,DMEM_Ⅰ、DMEM_Ⅱ(pH7.3)