沉默长链非编码RNA FAM83H-AS1提高肺腺癌细胞的化学治疗敏感性

目的 探讨长链非编码RNA FAM83H-AS1调控肺腺癌细胞化学治疗（简称化疗）敏感性（培美曲塞和顺铂）的作用效果及机制。方法 实时定量PCR法检测FAM83H-AS1在肺腺癌组织和细胞系中的表达。CCK8法检测并计算肺腺癌细胞对培美曲塞和顺铂的半抑制率（IC50）。基于TCGA数据库，应用生物信息学方法分析FAM83H-AS1与ATP结合盒亚家族C成员1 (ABCC1)基因表达的相关性。Western boltting检测ABCC1蛋白的表达。结果 与癌旁正常肺组织和人肺泡上皮细胞相比，FAM83H-AS1在肺腺癌组织和细胞系（PC9和A549）中高表达。FAM83H-AS1的表达与肺腺癌患者的吸烟史和化疗不敏感呈正相关。与化疗敏感的肺腺癌组织和细胞系（A549）相比，FAM83H-AS1在化疗（培美曲塞和顺铂）耐药的肺腺癌组织和细胞系（A549/CR）中高表达。沉默FAM83H-AS1能够降低A549/CR细胞对培美曲塞和顺铂的IC50，提高对化疗药物的敏感性。在肺腺癌中FAM83H-AS1与多药耐药相关基因ABCC1的表达呈正相关。沉默FAM83H-AS1能够降低A549/CR...     

外泌体在肿瘤细胞与TAMs之间相互作用中“桥梁”和调控作用的研究进展北大核心

外泌体是一类直径为30~100 nm的圆盘囊泡,其内包含许多组分,诸如复杂RNA和蛋白质等,主要参与细胞间的信号转导。肿瘤相关巨噬细胞(tumor-associated macrophages,TAMs)是肿瘤微环境中普遍存在的巨噬细胞,通过对肿瘤生长、免疫逃逸、侵袭和转移、耐药性等多方面的作用影响肿瘤进程。外泌体在肿瘤相关巨噬细胞的招募、极化及抗肿瘤免疫调控等方面发挥着重要的调节功能。同时,TAMs以外泌体为媒介作用于肿瘤细胞,从而构成了外泌体、TAMs与肿瘤细胞之间相互作用的调控通路。综上所述,本文旨在阐明肿瘤细胞与TAMs之间,以外泌体为“桥梁”相互影响的潜在机制,以及靶向肿瘤细胞和TAMs来源的外泌体在恶性肿瘤治疗中的展望。     

淄博市放射工作人员外周血淋巴细胞微核率分析

[摘要]?目的?探讨GeneXpert MTB/RIF检测技术在肺结核诊断中的应用价值。方法?以2020年7月—2021年6月在天门市第一人民医院治疗的疑似肺结核患者107例作为研究对象，所有患者均留取痰标本，进行痰涂片、痰培养、GeneXpert MTB/RIF检测、比例法药敏试验。以培养法和比例法药敏结果为金标准，计算GeneXpert MTB/RIF检测结核分枝杆菌（Mycobacterium tuberculosis，MTB）及其对于利福平耐药性检测的灵敏度、特异度、与金标准的的一致率。结果?107例疑似肺结核患者中，痰涂片阳性39例（36.45%），涂片阴性68例（63.55%）。以痰培养结果为金标准，GeneXpert MTB/RIF检测TBM的灵敏度为85.42%（41/48），特异度为88.14%（52/59）。GeneXpert MTB/RIF与痰培养诊断一致率为86.92%（93/107）；进一步分析，GeneXpert MTB/RIF检测痰涂片阳性患者MTB的灵敏度为97.22%（35/36），特异度为33.33%（1/3），检测涂片阴性患者MTB的灵敏度为50.00%（6/12），特异度为91.07%（51/56）。以比例法药敏结果为金标准，确认痰培养阳性36例患者中利福平耐药有4例（11.11%），敏感的有32例（88.89%）；GeneXpert MTB/RIF检测痰培养阳性患者利福平耐药的灵敏度为75.00%（3/4），特异度为93.75%（30/32）。GeneXpert MTB/RIF与比例法药敏试验一致率为91.67%。结论?GeneXpert MTB/RIF检测技术对于肺结核诊断以及利福平的耐药分析具有重要实用价值，可以作为金标准。     

EXO1蛋白在DNA损伤中研究进展

核酸外切酶(EXO)1兼有5'端-3'端外切酶及5'端结构特异性内切酶活性[1],属于皮瓣结构特异性内切酶(Rad)2/着色性干皮病(XP)G组蛋白家族的成员。EXO1蛋白具有EXO1a及EXO1b两种异构体,其中EXO1b的C端额外具有48个氨基酸,因而活性明显优于EXO1a[1],但两者的功能并无区别。     

线粒体通透性转换孔在锌缺乏模型大鼠心肌缺血/再灌注损伤中的作用

目的 观察锌缺乏是否通过线粒体通透性转换孔(mPTP)对心肌缺血/再灌注(I/R)损伤发挥作用。方法 通过饲喂锌缺乏饲料建立锌缺乏模型大鼠,将离体大鼠心脏全心缺血30 min,然后再灌注120 min,造成心肌I/R损伤模型。左心室插管检测心功能;分光光度法检测乳酸脱氢酶(LDH)活性;氯化三苯四氯唑(TTC)染色法检测心肌梗死面积;钙诱发线粒体肿胀法检测mPTP的开放程度。结果 锌缺乏大鼠心肌梗死面积以及LDH释放增加(P<0.05),同时伴随左心室收缩功能降低(P<0.05)。与对照组相比,锌缺乏大鼠缺血前心脏线粒体的mPTP开放程度降低(P<0.05),但在缺血30 min后mPTP开放显著增加(P<0.05)。对照组和锌缺乏大鼠的心脏I/R损伤可通过抑制mPTP开放而明显减轻(P<0.01)。结论 锌缺乏可通过增加心肌线粒体mPTP开放加重大鼠心肌I/R损伤。     

阿克替苷通过激活血红素加氧酶-1抑制H_(2)O_(2)诱导的视网膜神经节细胞氧化损伤北大核心

目的研究阿克替苷对视网膜神经节细胞(RGC-5)的保护作用及其机制。方法将RGC-5细胞分为对照组、H_(2)O_(2)组、阿克替苷+H_(2)O_(2)组(1μmol·L^(-1)、10μmol·L^(-1)、30μmol·L^(-1)阿克替苷分别预处理细胞2 h),MTT法检测各组细胞活力;后续实验阿克替苷+H_(2)O_(2)组选择阿克替苷30μmol·L^(-1)作为治疗浓度,荧光探针H2DCF-DA检测活性氧(ROS)产生和罗丹明123检测线粒体膜电位,Western blot检测各组细胞中Bcl-2、Bcl-2/Bax、半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)蛋白表达。机制研究中首先用不同浓度阿克替苷单独处理RGC-5细胞24 h,Western blot检测血红素加氧酶-1(HO-1)蛋白表达水平,进一步锌原卟啉(ZnPP)预处理RGC-5细胞1 h,而后30μmol·L^(-1)阿克替苷单独预处理后与200μmol·L^(-1)H_(2)O_(2)共孵育24 h,通过MTT法测定细胞活力。结果与对照组相比,H_(2)O_(2)组中细胞活力明显降低(P<0.01)。与H_(2)O_(2)组相比,阿克替苷+H_(2)O_(2)组中10μmol·L^(-1)、30μmol·L^(-1)阿克替苷预处理可显著提高细胞活力(P<0.05、P<0.01)。与对照组相比,H_(2)O_(2)组RGC-5细胞ROS生成明显增加,线料体膜电位显著降低,同时Bcl-2/Bax比值降低和Caspase-3蛋白相对表达量增加(均为P<0.05)。与H_(2)O_(2)组相比,阿克替苷+H_(2)O_(2)组RGC-5细胞ROS生成减少,线粒体膜电位增加,Bcl-2/Bax比值提高,Caspase-3蛋白相对表达量减少(均为P<0.05)。与阿克替苷未处理组相比,阿克替苷剂量依赖性诱导HO-1蛋白的表达,与阿克替苷+H_(2)O_(2)组相比,加入ZnPP后细胞活力降低(P<0.01),说明HO-1抑制剂ZnPP降低了阿克替苷对H_(2)O_(2)损伤的抑制作用。结论阿克替苷能够通过上调HO-1表达抑制H_(2)O_(2)诱导的RGC-5氧化应激损伤。     

银椴苷对激活的原代小胶质细胞极化及神经炎症的影响＊

目的 银椴苷（Tiliroside，Tle）是一种天然产物，存在于结香花（Edgeworthia chrysantha Lindl.）、金英（Galphimia gracilis）、和Phlomoides spectabilis等生物体中。本文主要探讨Tle对脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）激活的原代小胶质细胞的M1/M2极化的转化作用及其抑制神经炎症反应的影响。方法 MTT检测各浓度Tle对LPS激活的原代小胶质细胞活性的影响；Griess试剂检测LPS激活的原代小胶质细胞的一氧化氮（Nitric oxide，NO）产物生成量的影响；ELISA法检测Tle对LPS激活的原代小胶质细胞的肿瘤坏死因子-α（Tumor necrosis factor-α，TNF-α）、白细胞介素-6（Interleukin-6，IL-6）蛋白水平的影响；qRT-PCR检测Tle对LPS激活的原代小胶质细胞的精氨酸酶-1（Arginase-1，Arg-1）和胰岛素生长因子-1（Insulin growth factor-1，IGF-1）的mRNA表达水平。结果 Tle（0-80 μmol·L^-1）对LPS激活的原代小胶质细胞活性没有明显影响；Tle显著降低LPS激活的原代小胶质细胞亚硝酸盐的含量，并对炎症因子IL-6、TNF-α蛋白水平有显著抑制作用，同时显著提高抗炎因子Arg-1和IGF-1的mRNA水平。结论 Tle能够通过促进LPS激活的原代小胶质细胞M1型向M2型转化从而抑制神经炎症反应，因此Tle具有一定的神经保护作用。     

基于生物信息学的肥厚型心肌病易感基因TNNC1单核苷酸多态性致病表型分析

肥厚型心肌病(HCM)是一种常见的遗传性心脏病,是青少年及年轻运动员心源性猝死的最主要原因之一,其分子遗传学基础为基因突变。TNNC1是HCM的重要致病基因之一,目前仅发现其少量非同义单核苷酸多态性(nsSNPs)位点与HCM发病相关,但该基因其他nsSNPs数量较多,结合临床进行实验遗传检测其基因型与表型的关系,工作量巨大,尚不可行。因此,采用生物信息学方法,从dbSNP数据库中筛选出TNNC1基因全部的nsSNPs,联合4款(Mutation Taster、PolyPhen-2、PhD-SNP和MutPred)专业软件,进行有害性分级筛选和致病关联预测,最后进行突变蛋白三维结构建模及可视化分析。结果显示,首次从TNNC1基因102个nsSNPs位点中预测出疾病相关的18个(G159D、S69R、P52R、D149G、D3V、G140E、N51K、D151V、M47R、G110C、A23D、G140R、K158N、C35Y、R147C、L48P、F74C和V44G)高风险nsSNPs。基于生物信息学方法,以TNNC1基因的nsSNPs为示范,分析其nsSNPs与疾病表型的关系,这为其他遗传疾病致病基因nsSNPs的关联分析打下理论研究基础,具有重要的参考价值。