FHIT基因异常转录与胃癌相关性的研究

目的研究胃癌组织中脆性组氨酸三位体(fragile histidine triad,FHIT)基因转录的改变。方法采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法对43例胃癌组织及其相应癌旁非癌组织进行FHIT基因cDNA检测。结果除5例胃癌、2例非癌组织缺失FHIT基因野生型cDNA外,其余标本均扩增出FHIT基因野生型cDNA片段。22例(51.2％)胃癌、9例(20.9％)的癌旁非癌组织扩增出FHIT基因异常cDNA片段,二者统计学差异有显著性(P＜0.05)。结论FHIT基因的异常转录可能与胃癌的发生有关。     

抑瘤细胞运动和侵袭的鼠FRNK重组腺病毒的构建

目的应用AdEasy复制缺陷型腺病毒载体系统构建小鼠FRNK基因重组腺病毒，并在293HEK细胞中扩增制备重组病毒。方法把小鼠FRNK基因克隆入腺病毒穿梭载体pAdTrack—CMV中，构建腺病毒穿梭质粒pAdTrack—CMV-FRNK，经PmeⅠ内切酶酶切成线性化后，采用电穿孔转化将其转化到含有腺病毒骨架载体pAdEasy-1的感受态大肠杆菌BJ5183中，通过卡那霉素筛选获得阳性腺病毒重组质粒。再将获得的腺病毒重组质粒转染到293HEK细胞进行包装，获得FRNK重组腺病毒pAdFRNK。荧光显微镜下观察绿荧光的表达。结果经酶切和绿荧光表达证明了小鼠FRNK基因的重组腺病毒载体pAdFRNK构建成功，并制备出高滴度的重组病毒。结论成功构建携带小鼠FRNK基因的重组腺病毒pAdFRNK，为研究FRNK的基因治疗奠定了基础。     

胃癌组织中细胞FLICE抑制蛋白基因的表达研究

目的　本研究检测细胞FLICE抑制蛋白 (c-FLIP)基因在胃癌中的表达及其与临床病理特征的关系,初步探讨c-FLIP在胃癌发生、发展中的意义。方法　收集 48例胃癌及相应癌旁正常组织标本,以免疫组化、Western印迹法检测c FLIP蛋白表达;半定量RT PCR法检测c FLIPmRNA表达;原位末端标记法检测胃癌细胞凋亡指数。结果　胃癌及癌旁正常组织均表达c FLIPmRNA,平均相对吸光度值分别为(0. 59±0. 16)和 ( 0. 24±0. 13 ),前者显著高于后者 (P<0. 01 )。免疫组化结果表明c FLIP蛋白在胃癌中表达的阳性率为 100% (48 /48),且 68. 8% (33 /48)呈强阳性表达,而在癌旁正常组织中的阳性率为 75%,且未见强阳性表达,癌组织中的表达水平 ( 6. 93±0. 58 )显著高于癌旁正常组织(3. 19±0. 26,P<0. 01)。较低表达c FLIP蛋白的癌组织其平均凋亡指数 [ (2. 96±0. 15)% ]明显高于高表达c FLIP的癌组织[ (1. 36±0. 11)%,P<0. 01]。另外,在有淋巴结转移组中c FLIPmRNA(0. 64±0. 18)和蛋白(7. 15±0. 63)的表达水平明显高于无淋巴结转移组的c FLIPmRNA( 0. 52±0. 13,P<0. 05)和蛋白水平(6. 69±0. 47,P<0. 01)。Western印迹分析表明,胃癌组织中长型和短型c FLIP蛋白的水平分别为癌旁正常组织的 2. 6倍(P<0. 01)和 2. 8倍 (P<0. 01     

人类乳头瘤病毒16,18型,p53基因与胃癌

３０例新鲜胃癌标本，采用多聚酶链反应技术检测人类乳头瘤病毒１６、１８感染、并采用多聚酶链反应－单链构象多态性技术对ｐ５３基因突变进行检测。结果：ＨＰＶ１５阳性率为４０．０％，未发现ＨＰＶ１８感染：Ｐ５３基因突变率为５０．０％，ＨＰＶ１６感染和Ｐ５３基因突变同时存在者为１６．７％。     

环氧化酶-2 血管内皮生长因子-C的表达与胃癌淋巴结转移的关系

目的探讨胃癌组织中环氧化酶-2(COX-2)、血管内皮生长因子-C(VEGF-C)表达的相互关系及其在淋巴结转移过程中的作用和可能机制.方法 收集武汉大学人民医院1999-01～2003-02手术标本.应用免疫组化法检测42例胃癌组织和20例癌旁组织中COX-2及VEGF-C的表达水平.结果 (1)胃癌组织中COX-2、VEGF-C阳性表达率分别为59.5%、64.3%显著高于癌旁非癌组织的10%(P<0.05).(2)COX-2、VEGF-C蛋白的表达与胃癌的浸润深度、淋巴结转移及TNM分期有关(P<0.05或P<0.01),与胃癌的分化程度、远处转移无关(P>0.05).(3)COX-2、VEGF-C表达呈正相关(r=0.425,P<0.01).结论 胃癌组织中COX-2、VEGF-C表达均增高并且呈正相关.两者在胃癌淋巴结转移中有协同效应,共同促进胃癌的淋巴转移.     

心痛定对人体消化间期胆囊容积和餐后胆囊排空的作用

心痛定是一种钙通道阻滞剂,对平滑肌有普遍的松弛作用,推测其对胆囊收缩也有抑制作用。因此,作者采用双盲和安慰剂对照法,研究口服心痛定对人类胆囊容积和进餐引起胆囊排空的作用。材料与方法:用实时超声对12名健康志愿者作胆囊容积和胆囊收缩功能测定,每次测量均应在相同的呼吸相和探头置于同一位置进行。受试者禁食一夜后于次晨先测量首次空腹胆囊容积。然后8名受试者     

抑癌基因PTEN在胃癌细胞中的表达及意义

目的探讨PTEN基因mRNA及蛋白在胃癌细胞中的表达规律及其生物学意义。方法分别采用RT-PCR技术和Western blot方法检测SGC-790l，BGC-823，MGC-803，HGC-27等4种胃癌细胞系的PTEN mRNA表达及蛋白表达水平。结果PTEN mRNA与蛋白质在4种胃癌细胞系中均有异常表达，且表达水平呈正相关（r=0．99，P〈0．01），表达顺序依次为：SGC-7901（中分化）表达最高（P〈0．01），BGC-823（低分化）、MGC-803（低分化）次之（两者差异无显著性，P〉0．05），HGC-27（未分化）表达水平最低（P〈0.01），其相关表达与细胞分化程度呈正比关系。结论PTEN基因的异常改变与胃癌的发生发展密切相关；PTEN基因mRNA及其蛋白表达可能是反映胃癌发生发展及预后的重要生物学指标之一。     

胃泌素干预影响人结肠癌细胞P190RhoGAP磷酸化的机制

目的:研究胃泌素对人结肠癌细胞P190RhoGAP的酪氨酸磷酸化水平的影响。方法:使用胆囊收缩素2受体(CCK2R)的真核表达载体pCR3.1/CCK2R转染人结肠癌细胞株Colo320,上调胃泌素表达;使用胃泌素拮抗剂下调胃泌素表达。使用相同浓度的胃泌素(1×10-7mol/L)按时间梯度刺激细胞;采用蛋白质印迹法检测总FAK、酪氨酸磷酸化的FAK的表达情况,并确定FAK最大磷酸化时间点;以免疫沉淀和蛋白质印迹法检测FAK最大磷酸化时间点的P190RhoGAP的酪氨酸磷酸化水平。结果:胃泌素引起FAK最大酪氨酸磷酸化作用时间点为12 h,胃泌素刺激12 h较0 h、胃泌素拮抗剂+胃泌素刺激12 h后P190RhoGAP的酪氨酸磷酸化水平明显增加。结论:P190RhoGAP为FAK的下游信号分子,酪氨酸磷酸化的P190RhoGAP在胃泌素-CCK2R-FAK信号通路引起肿瘤细胞的侵袭、浸润、转移过程中发挥重要作用。     

人FRNK重组腺病毒的构建

目的:应用AdEasy复制缺陷型腺病毒载体系统构建人FRNK基因重组腺病毒,并在HEK293细胞中扩增制备重组病毒。方法:把人FRNK基因克隆入腺病毒穿梭载体pAdTrack-CMV中,构建腺病毒质粒pAdTrack-CMV-hFRNK,经PmeⅠ内切酶酶切成线性化后,采用电穿孔转化将其转化到含有腺病毒骨架载体pAdEasy-1的感受态大肠杆菌BJ5183中,通过卡那霉素筛选获得阳性腺病毒重组质粒。再将获得的腺病毒重组质粒转染到HEK293细胞进行包装,获得人FRNK重组腺病毒pAdhFRNK。荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白的表达。结果:经酶切和绿色荧光蛋白表达证明了hFRNK基因的重组腺病毒载体pAdhFRNK构建成功,并制备出高滴度的重组病毒。结论:成功构建携带人FRNK基因的重组腺病毒pAdhFRNK,为研究FRNK的基因治疗奠定了基础。     

胃镜检出老年消化性溃疡124例

目的:探讨老年消化性溃疡的临床特点.方法:回顾性分析我院内镜中心2007-01/2008-10经胃镜检出的的老年消化性溃疡患者,并与同期行胃镜检查的60岁以下的消化性溃疡患者进行对比.结果:老年组124例,胃溃疡61例,十二指肠球部溃疡51例,复合溃疡12例;中青年组100例,胃溃疡29例,十二指肠球部溃疡64例,复合溃疡7例.两组相比胃溃疡有显著差异( P<0.01).老年组胃体溃疡占胃溃疡的36.1%,直径>2cm的溃疡占29.5%,并发症以上消化道出血为主,占43.5%,均较中青年组有显著性差异( P<0.05).结论:老年消化性溃疡症状不典型,溃疡部位由幽门向贲门推移,且胃溃疡比十二指肠球部溃疡多,溃疡面积较大,合并症多且较严重.