HPV16 E6/E7对永生化口腔上皮细胞p53、p21表达的影响

目的：为了探讨人乳头状瘤病毒(HPV)转化口腔上皮细胞的作用机制，研究HPV16 E6、E7对永生化口腔上皮细胞细胞周期调节因子p53、p21表达的影响。方法：免疫细胞化学法检测HPV16 E6、E7诱导的永生化口腔上皮细胞HIOEC中野生型和突变型p53的表达；Westem印迹检测HIOEC HPV16 E6、E7、p53、p21蛋白表达，并以正常口腔上皮细胞和转染空白载体的口腔上皮细胞为对照。结果：HIOEC细胞表达HPV16 E6、E7蛋白．野生型p53和p21表达水平高于正常口腔上皮细胞和转染空白载体的口腔上皮细胞。结论：p53的失活可能不是HPV16 E6、E7诱导口腔上皮细胞永生化的主要原因。     

0—10数字评分量表是否可作为临床疼痛测量工具用于患儿？

背景自我疼痛评分已广泛应用于临床和科研,但目前在患儿中的应用情况我们仍知之甚少。本前瞻性、观察性研究对比了0—10分数字评分量表（numericalratingscale,NRS）这-L童手术后疼痛测量方法,与其他疼痛自评指标,如主观镇痛药需求（perceivedneedformedicine,PNM）、疼痛缓解度（painreliel,PR）及手术后镇痛治疗满意度（perceivedsatisfaction,PS）间的相关性。方法本研究纳入了7-16岁伴有术后疼痛的患儿,在术后1。24小时内使用1—4个自评工具对患儿疼痛进行测量。每次测量中,要求患儿使用NRS量表评估疼痛强度,并记录主观镇痛药需求和疼痛治疗满意度。每1—2小时重复测量上述指标,并评估与前次测量相比,PR是无变化、有改善抑或加重。绘制受试者工作特征曲线（receiveroperatorcharacteristic,ROC）并测量NRS在PNM、PS上的潜在截点;结合隙计算疼痛评分的最低临床显著性差异（minimumclinicallysignificantdifference,MCSD）。结果本研究共纳入了113例患儿,共记录了397项测量结果（包括189项配对资料）。自述有镇痛药需求患儿的NRS评分显著高于“无镇痛药需求”患儿（中位数分别是6分和3分,P〈0．001）。NRS评分〉4分判定为需要PNM的敏感性（0．81）和特异性（0．70）较高,但假阳性率和假阴性率（如NRS评分〉4分的患儿42％无需镇痛治疗）也较高。与感觉“好一点”或“差一点”对应的疼痛评分MCSD分别为-1（95％可信区间-0．5—1）和＋1（95％可信区间0．5—2．7）（P〈0．001）。NRS〉6分判定治疗不满意的敏感性为0．82,特异性为0．76,46％的NRS评分〉6分患儿对镇痛勉强满意,24％的患儿对镇痛十分满意。结论本研究为证实NRS用于评估患儿疼痛的临床实用性提供了重要的参考信息。在患儿手术后急性疼痛期,NRS评分作为一种有效的测量疼痛强度的方法,与PNM、PR和Ps有良好的相关性。然而,该评分与其他具有临床意义指标相关性的变异度较大,表明使用NRS截点决定患儿镇痛治疗方案是不恰当的。     

毛细管区带电泳法测定艾塞那肽纯度及在稳定性研究中的应用

目的:建立毛细管区带电泳(CZE)方法测定艾塞那肽纯度,并初步考察其稳定性。方法:采用未涂层熔融石英毛细管(48.5 cm×50μm,有效长度40 cm),考察了运行缓冲液p H及浓度、分离电压、温度、添加剂乙腈浓度对分离效果的影响,最终确立电泳条件:运行缓冲液为200 mmol·L-1磷酸二氢钠-磷酸氢二钠溶液(p H 6.2;含15%乙腈),分离电压为20 k V,温度25℃,检测波长214 nm,压力进样5 k Pa×10 s。结果:艾塞那肽质量浓度在0.05~4.0 mg·m L-1(r=0.999 9)范围内线性关系良好;检测限为3.3μg·m L-1,定量限为8.0μg·m L-1;主峰迁移时间的日内和日间RSD分别为1.07%(n=6)和0.91%(n=9),纯度的日内和日间RSD分别为0.08%(n=6)和0.10%(n=9)。该方法与HPLC法比较,纯度测定结果基本一致,本法分离效果更好,分析时间缩短,能有效检查艾塞那肽的纯度。结论:该方法可用于艾塞那肽的质量控制和稳定性研究。     

疟疾疫苗现场试验研究进展

安全有效的疟疾疫苗可能是预防、控制疟疾的有效途径。然而,迄今为止,仍无一个安全有效的疟疾疫苗应用于现场。疟疾疫苗主要分为红前期疫苗、红内期疫苗及传播阻断疫苗,本文对这3类疫苗临床试验的进展进行综述。     

内镜超声对早期胃食管癌内镜可切除性的评估价值

目的 探讨内镜超声对早期胃食管癌内镜可切除性的评估价值.方法 观察经EUS检查后,并在之后2周内通过内镜黏膜切除术或内镜黏膜下剥离术术后病理证实的早期胃食管癌共65例,比较EUS和病理检查对病变浸润深度的判断.结果超声内镜诊断早期癌浸润深度的总准确性达93.8%(61/65),对病变内镜可切除性的评估总准确率为89.2%.结论超声内镜可较准确地评估早期胃食管癌的内镜可切除性.     

内镜下钛夹治疗非静脉曲张性消化道出血47例

目的:观察内镜下金属钛夹治疗非静脉曲张性消化道出血的疗效.方法:收集我院2003-12/2006-07非静脉曲张性消化道出血患者47例,在内镜直视下明确出血部位,使用钛夹推送器对准出血部位两端,钳夹止血.结果:非静脉曲张性消化道出血患者47例经钛夹钳夹治疗后,均一次性止血成功,即时止血率100%,术后无明显并发症,随访3mo无1例再发出血.结论:金属钛夹是非静脉曲张性消化道出血的一种有效的止血方法,具有操作简单、止血效率高及无明显并发症等优点,值得临床推广应用.     

HIF-1α及耐药蛋白在胰腺癌中的表达及相关性分析

目的:探讨HIF-1α及耐药相关指标P糖蛋白(P-Gp),凋亡相关Bcl-2家族成员Bcl-X_L及Bax在人胰腺癌组织中表达的相关性.方法:免疫组化法检测手术切除的胰腺癌组织34例中HIF-1α、P-Gp、Bcl-X_L、Bax蛋白表达.结果:34例胰腺癌标本中有26例(76.5%)HIF- 1α,28例(82.4%)P-Gp,30例(88.2%)Bcl-X_L,26例(76.5%)Bax表达阳性.HIF-1α和P-Gp、Bcl-X_L、Bax蛋白表达呈正相关(r=0.471,P= 0.005;r=0.443,P=0.009;r=0.510,P=0.002).结论:在胰腺癌组织中HIF-1α、P-Gp、Bcl- X_L、Bax蛋白存在高表达;HIF-1α与P-Gp、Bcl- X_L、Bax的蛋白表达呈正相关,提示HIF-1α可能通过上调耐药相关蛋白P-Gp、Bcl-X_L及Bax蛋白表达在胰腺癌耐药机制中起重要作用.     

胃泌素对结肠癌细胞中粘着斑激酶通路下游E-钙粘蛋白/β-连环蛋白复合物的影响

目的探讨胃泌素对结肠癌细胞CoLo320WT中粘着斑激酶（FAK）通路下游E-钙粘蛋白／β-连环蛋白（E-cadherin／β-catenin）复合物分布的影响；方法脂质体转染表达胃泌索受体CCK-2R的pCR3．1／OR质粒于结肠癌细胞CoLo320中。G418筛选出稳定表达CCK-2R的阳性克隆，RT-PCR鉴定，转染成功命为CoLo320WT。应用10^-8mmol／L 胃泌素（G17）以时间梯度（0h、1h、6h、12h、24h、48h）干预CoLo320WT细胞，同时应用10^-6mmol／L胃泌素受体拮抗剂L365，260干预CoLo320WT细胞30min，再予10^-8mmol／L胃泌素干预。采用免疫印迹法检测磷酸化的FAK Tyr397和总FAK的表达。采用免疫共沉淀和免疫印迹法检测CoLo320WT中TX-100溶解和未溶部分中的E-钙粘蛋白和β-连环蛋白的表达。用免疫细胞化学法观察E-钙粘蛋白和β-连环蛋白的在胞膜、胞质和胞核的分布。结果随着胃泌素干预时间的延长，细胞中磷酸化的FAK Tyr397的表达量呈增加趋势，12h达最大值。胃泌素受体拮抗剂L365，260阻断后磷酸化的FAK Tyr397表达减少。而胃泌素对总FAK没有明显影响。TX-100可溶性部分中E-钙粘蛋白和酽连环蛋白的量在胃泌素干预后表达减少，拮抗剂L365，260阻断后又增加。而TX-100不溶解部分中表达却相反。免疫细胞化学观察到在胃泌素干预下CoLo320WT细胞中E-钙粘蛋白和β-连环蛋白的分布发生胞质和胞核转移。结论胃泌素与其受体CCK-2受体结合，磷酸化的FAK Tyr397、激活FAK通路进而影响结肠癌细胞中E-钙粘蛋白和β-连环蛋白的分布，促进结肠癌细胞侵袭和转移。     

外源性一氧化氮体外杀伤红内期间日疟原虫的实验研究

目的 探讨外源性一氧化氮（NO）对红内期间日疟原虫的杀伤作用。 方法 采集以早期滋养体期为主,原虫密度＞0.5%的患者血样,配成含2%红细胞的虫血混悬液。96孔板中每孔加100 μl虫血混悬液,再加入各组试剂,亚硝基铁氰化钠（SNP,分别为0.02、0.05、0.10、0.20、0.50、1.00 mmol/L）,SNP + 血红蛋白（Hb）0.15 mmol/L,SNP + 硫酸亚铁（FeSO₄）0.15 mmol/L,SNP + L-半胱氨酸（L-cyst）1.00 mmol/L,SNP + FeSO₄ 0.15 mmol/L+ L-cyst 1.00 mmol/L,后4组SNP浓度均为1.00 mmol/L,设对照组,每组重复3次,置37 ℃ 5% CO2培养箱中培养。根据虫龄,估计发育至裂殖体时间,提前3 h取空白对照孔涂片镜检,确定终止培养时间,培养终止后吉氏染色,镜检计数成熟裂殖体,计算NO对红内期间日疟原虫的抑制率,统计分析各组对间日疟原虫抑制率的差异。 结果 SNP 0.02 mmol/L组,间日疟原虫抑制率为（0.84±1.69）%,对培养的红内期间日疟原虫无杀伤作用（P＞0.05）;SNP 0.05 mmol/L组,间日疟原虫抑制率为（12.26±3.04）%,对培养的红内期间日疟原虫存在杀伤作用（P＜0.01）。且抑制率随SNP浓度上升而升高。在含有1.00 mmol/L SNP的孔中分别加入Hb、L-cyst、FeSO4和FeSO4+L-cyst与只添加SNP 1.00 mmol/L孔相比,红内期间日疟原虫抑制率自（85.40±2.90）%下降为（5.90±2.90）%、 （25.86±4.02）%、 （30.16±2.75）%和（16.71±2.30）%。结论 外源性NO对体外培养的红内期间日疟原虫有杀伤作用,而Hb、L-cyst和FeSO₄可以逆转这种杀伤作用。     

内镜超声对早期胃食管癌内镜可切除性的评估价值

目的 探讨内镜超声对早期胃食管癌内镜可切除性的评估价值.方法 观察经EUS检查后,并在之后2周内通过内镜黏膜切除术或内镜黏膜下剥离术术后病理证实的早期胃食管癌共65例,比较EUS和病理检查对病变浸润深度的判断.结果超声内镜诊断早期癌浸润深度的总准确性达93.8%(61/65),对病变内镜可切除性的评估总准确率为89.2%.结论超声内镜可较准确地评估早期胃食管癌的内镜可切除性.