ABO血型基因转录结构的研究及应用

目的 建立研究ABO血型系统基因转录结构的方法.方法 使用两套RNA逆转录-巢式PCR-序列测定的反应策略对中国人群6种常见ABO基因型的11个血液标本转录结构进行分析.应用所建立的方法对3例ABO血型正反定型不符的标本进行ABO基因转录结构的分析.结果 未能检测到O基因的转录结构;两套PCR策略均发现有2种转录结构,一种是完整的ABO基因编码区,另一种是缺失了整个第6外显子的ABO基因编码序列.一个变异的ABO等位基因在Bx表型个体被发现.结论 ABO基因转录结构的剪切方式是复杂的,不同剪切位点的ABO转录子被观察到.O等位基因的转录结构在RT-PCR分析未检测出来.O型基因转录结构这个特点的发现,可以应用于ABO基因单倍体序列测定中.     

人血清总胆固醇和甘油三酯的临床观察

随着人们生活水平的日益提高，高蛋白、高脂肪饮食的不断增加，不同年龄组健康人血清总胆固醇（Tch）、甘油三酯（TG）的检测数值比传统的参考值有上升的趋势。我们对2004-04～2006-04来门诊进行健康体检的正常人的血清总胆固醇、甘油三酯进行分析如下。     

颈动脉扭曲的血管内治疗

研究背景颈动脉扭曲被认为是血管内支架成形术的相对禁忌证,颈动脉内膜切除术为主要治疗方法。本研究探讨血管内支架成形术治疗颈动脉扭曲的可行性和安全性,并根据治疗结果初步总结临床经验。方法回顾分析22例接受血管内支架成形术治疗症状性颈动脉扭曲患者的临床资料,并对其临床表现、影像学特征、手术安全性及随访资料进行分析,评价治疗效果。结果 22例患者全部成功施行血管内支架成形术,支架植入成功率为100%,无一例发生支架相关死亡或残疾。共植入自膨式支架24个,术后颈内动脉平均狭窄率由术前的85.63%降至11.25%;扭曲角度(Metz观测分类法)由术前<90°全部纠正至>120°。住院期间无一例患者出现短暂性脑缺血发作或脑梗死,术前头晕、头痛等症状均有不同程度改善或完全消失;未发生永久性并发症或死亡。临床随访6～72个月,除1例发生支架对侧颈动脉系统短暂性脑缺血发作,2例出现同侧颈动脉系统短暂性脑缺血发作(1例血小板聚集试验呈阿司匹林抵抗、1例脑血管造影显示再狭窄),2例失访外,其余17例患者CT血管造影(10例)和B超(7例)检查均显示颈动脉血管形态良好、血流通畅,无再狭窄和扭曲发生。结论血管内支架成形术可治疗一定程度的颈动脉扭曲,其手术技术安全可行,有助于减少脑缺血发作,远期临床效果尚待进一步观察。     

无偿捐献外周血造血干细胞后供者健康状况的研究

目的研究皮下注射粒细胞集落刺激因子(G-CSF)动员剂及捐献外周血造血干细胞(PBSC)对无关健康供者的影响.方法28名外周血造血干细胞捐献者在采集前1～5天,皮下注射粒细胞集落刺激因子5mg/kg,连续1～5天皮下注射,观察G-CSF动员和采集时供者出现的不良反应;并对供者在G-CSF动员前、外周血干细胞采集后的健康状况及血常规进行分析.结果经G-CSF动员并采集了干细胞的28名供者中,23名供者(81.4%)未出现任何不良反应;5名供者(18.6%)出现轻微不良反应,并于采集时或采集后一周内自行消失.28名供者捐献造血干细胞后,经健康状况咨询和体格检查,结果未见异常.供者的血常规大多在捐献的15天后恢复到基础水平,与G-CSF动员前无显著性差异(P＞0.05);但血细胞计数基础值偏低的供者,采集后白细胞和血小板恢复较慢.结论本研究通过对供者捐献造血干细胞后的体检、血常规检测和随访,结果表明无偿捐献造血干细胞对供者是安全的.     

两种从陈旧血中抽提基因组DNA方法的比较

目的比较盐析法和磁珠法从陈旧血中抽提基因组DNA的效果和特点,以便常规用于骨髓库HLA基因分型。方法使用TECAN全自动工作站为平台,分别用Gentra盐析法DNA抽提试剂盒和Promega磁珠法DNA抽提试剂,从48份陈旧全血样本中抽提基因组DNA,提取的基因组DNA均溶于100μlTE中;然后用紫外分光光度计测定其产量和纯度,并用琼脂糖凝胶电泳法测定DNA样本的完整性。结果从400μl陈旧全血中提取基因组DNA,用盐析法获得的DNA含量为28.6±8.7ng/μl,A260/A280值平均为1.63±0.209;用磁珠法获得的DNA含量为94.2±10.3ng/μl,A260-A320/A280-A320值平均为1.821±0.102;琼脂糖电泳法检测表明两种方法提取的DNA的分子量均大于15kb。结论使用磁珠法从陈旧血中所获得的DNA的产量和纯度明显高于盐析法,适合于骨髓资料库陈旧血样本的常规HLA基因分型实验以及下游的分子生物学实验。     

Bel亚型与α1,3半乳糖基转移酶基因G952A多态性关系的研究

目的 研究红细胞ABO血型系统中B放散型的ABO基因分子遗传基础.方法 通过标准血型血清学试验鉴定了3例Bel亚型及15例对照B型样本,采用ABO基因分型PCR序列特异性引物、ABO基因第6及第7外显子PCR产物直接测序及克隆测序等方法进行ABO基因及亚型的定型.结果 在1例血型血清学检测为Bel亚型标本中,发现一个新的B等位基因.该等位基因与B101标准等位基因相比,差异仅在于ABO基因的第7外显子上nt952位G>A突变,导致多肽链Val318Met,定为B放散型(Bel)新基因,GenBank注册号为EF117687.而其余2例Bel型样本及15例对照B型样本含正常标准B基因.结论 首次在ABO基因编码区核苷酸930位后的错义突变中发现并报道了新B等位基因,表明1,3半乳糖基转移酶基因G952A多态性可能是Bel分子遗传机制之一.     

血浆皮质醇薄层扫描定量分析法

用扫描薄层层析定量分析血浆皮质醇。作者用三氯甲烷作提取剂,经济、快速。血浆皮质醇在2.5～5.0μg/dl 范围内线性良好.CV%为8.8%,平均回收率为97.2%.作者同时摸索了实验的有关条件.     

磁共振张量成像基底节区脑出血致远端锥体束继发损害的研究

目的 研究磁共振弥散张量成像(diffusion tensor imaging,DTI)对基底节区急性脑出血病例锥体束的各向异性值(fractional anisotropy,FA)的变化.方法 收集30例基底节区急性脑出血病例,用弥散张量成像方法,测量出血灶同侧、对侧位于大脑脚和桥脑平面感兴趣区(region of interest,ROI)内的锥体束FA值变化,比较病灶同侧和对侧相同区域范围内FA值差异.结果 30例基底节区急性脑出血病例的病灶侧大脑脚平面ROI区锥体束FA值(0.45±0.06)明显低于对侧ROI区锥体束FA值(0.50±0.05)(t=5.15,P＜0.05),桥脑平面ROI区域的FA值略低于对侧但差别无统计学意义(0.45±0.05 vs 0.47±0.05;t=1.4,P＞0.05).结论 DTI不仅可直观显示基底节区急性脑出血纤维束的受损改变,还可通过测量FA值的变化量化评估基底节区急性脑出血锥体束损伤的程度.     

年龄对精子DNA损伤及男性生育能力的影响

目的探讨年龄对精子DNA和精液常规参数的影响及可能机制.方法102例年龄在20岁到46岁的健康男性,分为5个组:1组为20~24岁、2组为25~29岁、3组为30~34岁、4组为35~39岁、5组为40~46岁.根据WHO标准进行精液分析,用精子染色质扩散实验(SCD)法检测精子DNA损伤率,并用相关回归分析研究年龄、精子DNA损伤、精液常规参数之间的相关性.结果35岁以上男性精子DNA损伤率明显高于35岁以下(P<0.001),精子DNA损伤率与年龄显著正相关(r=0.439,P<0.001).各年龄组精液量、密度、活动率、活力无差异,但发现精子活力与年龄负相关(r=-0.258,P=0.009).精液各项常规参数与精子DNA损伤率无相关性.结论精子DNA损伤率随年龄的增加而增加,健康男性35岁以上精子DNA损伤水平将明显增高,精子活力随着年龄的增长将下降.     

老年人颈动脉狭窄支架置入术并发症的预防和处理

目的 总结老年人颈动脉狭窄支架置入术(carotid endartreetomy,CEA)并发症的发生、预防和处理方法 . 方法 收集我院收治的行CAS的老年患者88例,回顾性分析并发症的防治措施. 结果 88例患者共置人支架92个,均为自膨式支架.支架置入成功率100%,平均狭窄率由术前的84.6%下降至13.2%.所有患者随访3～12个月.发生颈动脉窦反应23例,占26.1%.70～79岁组和80岁以上组与60～69岁组比较.差异有统计学意义(P＜0.05).狭窄与颈动脉分叉部的距离≤10 mm者与＞10 mm者比较,差异有统计学意义(P＜0.05).高血压(收缩压＞160mm Hg)6例,高灌注综合征4例,其中颅内出血1例;缺血性脑卒中1例,脑血管痉挛4例,肾功能不全3例,穿刺部位淤斑或血肿7例.随访期间发生短暂脑缺血发作(TIA)3例,心肌梗死1例,脑出血1例.遗留轻度神经功能障碍2例,无死亡病例. 结论 老年人CAS风险相对较高,正确预防和处理可以降低并发症的发生.