中国14家教学医院2005-2008年临床分离肺炎链球菌耐药性分析

目的 监测2005-2008年我国不同地区14家教学医院临床分离肺炎链球菌的耐药性,为临床经验用药提供科学建议.方法 2005-2008年从14家教学医院收集非重复的1 317株临床分离肺炎链球菌,其中2005年271株、2006年391株、2007年363株、2008年292株.菌株主要为社区呼吸道感染病原菌,即以呼吸道感染收治的门诊和急诊患者或入院48 h内发生呼吸道感染的患者中分离的肺炎链球菌.菌株分离地区包括华北地区、东北地区、华南地区、华中及西北地区以及华东地区.患者按年龄分为成人组(≥18岁)、青少年组(6～17岁)和儿童组(≤5岁).菌株经中心实验室复核后,采用Etest法、琼脂稀释法或纸片扩散法测定8类17种抗菌药物的MIC或抑菌圈直径,数据输入WHONET5.5软件分析敏感率、中介率、耐药率、MIC50、MIC90.结果 肺炎链球菌对利奈唑胺(100%)和氟喹诺酮类药物(95.2%～99.7%)保持了高的敏感率.对于β内酰胺类药物,菌株对阿莫西林-克拉维酸敏感率为73.8%～92.1%,对青霉素、头孢曲松和头孢吡肟也有较高的敏感率,但逐年降低.3种二代头孢菌素的敏感率较低(2008年为36.3%～38.4%).对于红霉素、阿奇霉素、克林霉素、甲氧苄啶-磺胺甲 唑和四环素,菌株的敏感率均较低且逐年下降.PISP的比例在逐年增大,从2005年的4.4%上升至2008年的20.2%.华北地区的PNSP发生率较低(6.0%),而华中及西北地区和华东地区的PNSP发生率较高(30.1%和38.7%).成人组的PNSP发生率(15.7%)明显低于儿童组(33.0%),也低于青少年组(38.2%).结论 肺炎链球菌对利奈唑胺和氟喹诺酮类药物在2005-2008年间保持了较高的敏感性,而对青霉素类和头孢菌素类的敏感性逐年降低,临床需慎用对肺炎链球菌活性较低的药物,包括大环内酯类、克林霉素、甲氧苄啶-磺胺甲 唑和四环素.

Abstract：

Objective To investigate antimicrobial resistance among Streptococcus pneumoniae clinically isolated from 14 teaching hospitals located at different areas in China in 2005-2008 and to give logical guidance for clinical empirical therapy.Methods A total of 1 317 non-repetitive S.pneumoniae isolates in 14 teaching hospitals from 2005-2008 were collected and sent to the central lab for reidentification and susceptibility testing, including 271 isolates collected in 2005, 391 isolates collected in 2006, 363 isolates collected in 2007 and 292 isolates collected in 2008. Most of the isolates were from community-acquired respiratory tract infections, which were isolated from outpatient or emergency department patients with respiratory tract infections or those patients with respiratory tract infections within ≤48 hours hospitalization.The districts where the organisms were isolated include North China, Northeast China, South China, Central and Northwest China and East China.The patients included adults, teenagers and children.The minimum inhibitory concentrations (MICs) or inhibitory zone diameter of 17 antimicrobial agents were determined by Etest method, agar dilution method or disk diffusion method.WHONET5.5 software was used to analyze susceptibility rate, intermediate rate, resistance rate, MIC50 and MIC90.Results Linezolid (100%) and fluoroquinolones (95.2%-99.7%) showed excellent activities against S.pneumoniae.Among β-lactams, amoxicillin-clavulanic acid remained high activities (73.8%-92.1%),followed by penicillin, ceftriaxone and cefepime with year-over-year decrease in activities.The activities of three second-generation cephalosporins were low (36.3%-38.4% in 2008).The activities of erythromycin, azithromycin, clindamycin, trimethoprim/sulfamethoxazole and tetracycline against S.pneumoniae were poor and decreased year over year.The incidence of penicillin non-susceptible S.pneumoniae (PNSP) was increasing especially for PISP (from 4.4% in 2005 to 20.2% in 2008).The incidence of PNSP in North China was low (6.0%), while this value were high in central China and East China (30.1% and 38.7%, separately).The incidence of PNSP in adults (15.7%) was obviously lower than that in children(≤5 years:33.0%) and teenagers (6-17 years:38.2%).Conclusions linezolid and fluoroquinolones showed excellent in vitro activity against S.pneumoniae, followed by penicillin and cephalosporins with year-over-year decrease of activity. Clinicians should pay more attention when using those antimicrobial agents with poor activity against S.pneumoniae, which include macrolides, clindamycin, trimethoprim/sulfamethoxazole and tetracycline.     

13496例围术期抗菌药物预防使用的干预策略

目的通过调查与反馈,干预院内围术期抗菌药物预防使用,提高围术期抗菌药物使用的合理性。方法定期抽查2005-2010年全院无感染征象的手术病例13 496例,与此同时采取各种干预措施,规范围术期抗菌药物预防使用。结果通过干预,全院抗菌药物带入手术室使用率明显上升,从51.19%上升至99.27%,上升了47.71%;Ⅰ类手术围手术期抗菌药物使用天数从平均6.29 d/例下降至3.30 d/例,平均下降2.99 d/例;抗菌药物使用级别合格率逐渐上升,从18.21%上升至74.70%,上升56.49%,医院感染率没有上升。结论制定明确的围术期抗菌药物使用要求,应用计算机后台管理系统,对监测数据进行科学的统计分析,深入临床的沟通和责任到人的考核,以及各级领导重视是提高围术期抗菌药物合理使用的关键。     

2012年中国CHINET血培养临床分离菌的分布及耐药性

目的了解2012年中国CHINET血培养分离菌的构成及耐药性。方法对中国CHINET 细菌耐药监测网2012年1月至12月所有血培养分离菌,按统一方案用K‐B纸片扩散法进行抗菌药物敏感试验。结果2012年自血标本中共获分离菌8490株,其中革兰阳性球菌占56．0％,革兰阴性杆菌占44．0％。居前10位的分离菌依次为凝固酶阴性葡萄球菌（CNS ）（35．5％）、大肠埃希菌（16．4％）、克雷伯菌属（9．8％）（其中91．1％为肺炎克雷伯菌）、肠球菌属（7．2％）、金黄色葡萄球菌（金葡菌）（7．2％）、不动杆菌属（5．9％）（其中93．8％为鲍曼不动杆菌）、草绿色链球菌（4．3％）、铜绿假单胞菌（3．2％）、肠杆菌属（2．4％）和洋葱伯克霍尔德菌（1．5％） ,占所有分离菌株的93．5％。甲氧西林耐药金葡菌（M RSA ）、甲氧西林耐药 CNS （MRCNS）分别占金葡菌和CNS的50．8％和61．7％。粪肠球菌对高浓度庆大霉素和氨苄西林的耐药率分别为29．0％和10． 9％,屎肠球菌对多数测试药物的耐药率显著高于粪肠球菌。草绿色链球菌对青霉素的耐药率为3．8％。儿童分离株中青霉素耐药肺炎链球菌株为31．2％,与成人分离株大致相仿（34．1％）。葡萄球菌属、肺炎链球菌、其他链球菌属和粪肠球菌中均未发现万古霉素和利奈唑胺耐药菌株,屎肠球菌对万古霉素的耐药率为3．5％。大肠埃希菌、肠杆菌属、沙雷菌属、变形菌属和枸橼酸菌属等肠杆菌科细菌对碳青霉烯类的耐药率均在10．0％以下,唯克雷伯菌属对碳青霉烯类耐药率为11．2％～19．8％。不发酵糖革兰阴性杆菌对碳青霉烯类耐药率较高,铜绿假单胞菌对碳青霉烯类的耐药率近30．0％,对不动杆菌属耐药率达70．0％以上。结论2012年中国CHINET监测资料显示,血培养分离菌仍以革兰阳性菌为主,但检出比例有所下降,革兰阴性菌有所上升。血培养分离株对常用抗菌药物耐药性仍严重,尤其革兰阴性菌对碳青霉烯类耐药率呈上升趋势。因此应合理应用抗菌药物,并加强医院感染控制措施抑制耐药菌传播。     

江苏海安地区分离的金黄色葡萄球菌的分子特征及其耐药性分析

目的分析江苏海安地区分离的金黄色葡萄球菌的分子生物学特征及其耐药性。方法收集2011年7月至2012年7月江苏海安地区分离的金黄色葡萄球菌43株,采用生化表型及血浆凝固酶试验鉴定菌株,纸片扩散法和肉汤稀释法检测菌株对12种抗菌药物的敏感性,聚合酶链反应(PCR)检测PV杀白细胞素(PVL)基因,采用多重PCR进行葡萄球菌染色体mec基因盒(SCCmec)分型,运用PCR及序列分析进行金黄色葡萄球菌A蛋白(SPA)基因分型。结果 43株金黄色葡萄球菌中有21株为耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA),t030-Ⅲ为主要流行克隆,该克隆有2个主要的耐药谱型,即P-CX-CN-TOB-E-CC-RA和P-CX-CN-TOBRA。结论江苏海安地区MRSA分离率较高,克隆流行特点明显。     

TEM-1β内酰胺酶介导的大肠埃希菌对哌拉西林-他唑巴坦和头孢哌酮耐药机制的研究

目的探讨临床分离大肠埃希菌RJ904对阿莫西林-克拉维酸、哌拉西林-他唑巴坦等含β内酰胺酶抑制剂抗菌药物和头孢哌酮耐药,而对头孢西丁、头孢噻肟敏感的机制。方法通过三相水解试验了解大肠埃希菌RJ904所产酶的水解特性;以大肠埃希菌J53Azr为受体菌,临床菌株RJ904为供体菌,通过接合试验了解该耐药特性是否由质粒介导;通过"鸟枪法"随机克隆试验将耐药质粒经BamHI和HindⅢ双酶切后的片段插入到克隆载体pACYC184中表达并测序,明确介导该耐药特性的基因;通过重叠延伸法定点突变及亚克隆了解启动子对耐药基因表达的影响。结果菌株RJ904中的酶可水解哌拉西林-他唑巴坦、头孢哌酮,但不水解头孢西丁、头孢噻肟,而且其耐药性可通过质粒接合转移。耐药质粒经BamHI和HindⅢ酶切后重组到载体pACYC184中的3.9 kb双酶切片段,含有大小861 bp的blaTEM-1B基因,其上游的启动子为Pa/Pb。该重组载体表达后对头孢哌酮、哌拉西林-他唑巴坦等含酶抑制剂抗菌药物耐药,而对头孢西丁、头孢噻肟敏感,重组载体中blaTEM-1B基因启动子经32位的T→C定点突变后,由强启动子Pa/Pb变为弱启动子P3,突变后的重组质粒转化入大肠埃希菌DH5α后所表达的耐药性与突变前相比MIC值均有较大下降。结论本试验首次证实在大肠埃希菌中Pa/Pb启动子调控TEM-1β内酰胺酶的高表达可使细菌对阿莫西林-克拉维酸、哌拉西林-他唑巴坦等含酶抑制剂抗菌药物和头孢哌酮耐药,而且这种耐药基因位于转座子和质粒上,可通过接合转移扩散。     

上海出现PER-1型超广谱β内酰胺酶

目的 分析多重耐药鲍曼不动杆菌148号试验菌株耐β内酰胺抗生素的原因及耐药性的转移能力。方法 用等电聚焦电泳试验和三相水解试验分析148号试验菌株所产β内酰胺酶，并进行初步分类，再用聚合酶链反应(PCR)扩增和PCR产物测序方法确认β内酰胺酶基因。结果 148号试验菌株产超广谱β内酰胺酶(ESBLs)，经分子生物学方法证实有blaPER—1基因，同时还有aacA4基因。结论 148号试验菌株耐β内酰胺抗生素的原因，可能是产生了可转移的PER—1型ESBLs，blaPER—1基因位于质粒上。     

2005年上海瑞金医院细菌耐药性监测

目的了解2005年我院临床分离菌的分布和耐药特征,指导临床合理使用抗菌药物。方法采用纸片扩散法(K-B法)对我院临床分离的菌株进行药敏试验并对肠杆菌科细菌进行ESBL检测,按CLSI2005年标准判定药敏结果,用WHO-NET5.3软件进行数据分析。结果2005年我院共分离细菌3960株,其中革兰阴性杆菌2448株,占61.8%,革兰阳性球菌1512株,占38.2%。大肠埃希菌和金葡菌分别占革兰阴性杆菌和革兰阳性球菌的首位。大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和奇异变形杆菌中ESBLs的检出率分别为39.5%、35.8%和6.6%。32.2%鲍曼不动杆菌和10.1%铜绿假单胞菌为泛耐药株(只对多黏菌素敏感);葡萄球菌属中MRSA和MRCNS的检出率分别为69.0%和80.4%;从肠球菌属中检出1株耐万古霉素的屎肠球菌。结论从我院住院患者分离的细菌耐药性比较严重,应该加强监测,指导临床合理使用抗菌药物。     

泛耐药鲍曼不动杆菌ICU交叉感染防控策略

目的探索防控泛耐药鲍曼不动杆菌交叉感染的有效方法。方法2005年收集RICU患者分离的泛耐药鲍曼不动杆菌共7株,采用脉冲场凝胶电泳(PFGE)进行分型,分析相关临床资料,实施"降阶梯防控策略"。结果4例患者检出的5株泛耐药鲍曼不动杆菌药物敏感试验相同,存在交叉感染高危因素,PFGE图形一致,明确存在交叉感染;采取"降阶梯防控策略"后,无其他患者发生交叉感染。结论"降阶梯防控策略"对控制泛耐药菌交叉感染有重要临床意义。     

30株星座链球菌的分离鉴定及抗生素敏感性试验

星座链球菌属米勒链球菌群 ,该群还包括咽峡炎链球菌和中间链球菌 ,过去由于临床分离率较低 ,所以对其致病地位的分析研究尚欠重视。但近年来发现该菌可引起心内膜炎 ,肺炎 ,菌血症 ,腹腔或皮肤感染等 ,尤其在宿主免疫功能减弱的情况下 (如吸毒、ＨＩＶ感染等 )。为此引起临床及检验人员的重视是至关重要的。在此 ,我们将分离到的 30株星座链球菌的鉴定及药敏情况总结如下。一、材料与方法1.菌株来源　 2 0 0 0年 4月至 2 0 0 1年 10月间从临床标本的脓及分泌物中分离出 8株 ,痰标本中分离出 8株 ,尿标本中分离出 6株 ,血标本中分离出 4株 ,…     

抗菌药物的应用与医院感染控制

所有的微生物都可能引起医院感染,但是那些能够通过接触传播、造成外源性感染、致病性和耐药性均很强的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(Methicillin-resistant staphylococcus aureus,MRSA)和多重耐药的革兰阴性杆菌是医院感染的重点控制目标.抗菌药物的不合理应用能够促使这些耐药细菌的快速增长.控制抗菌药物的不合理应用,通制细菌耐药的产生和耐药细菌在医院内的播散,是医院感染控制的重点工作之一.从医院感染控制的角度控制抗菌药物临床应用,首先是监测,在监测的基础上,参照有关文件和要求,制订医院抗菌药物应用指南和实施细则,并借助计算机系统的力量,进行抗菌药物应用的管理,同时在广泛宣传、教育、培训的基础上,开展以自查、自评、督查和整改相结合的抗菌药物合理应用行动计划,力求改变传统的思维及行为模式,促进临床医师自觉合理应用抗菌药物.